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人朊蛋白基因的克隆表达及抗血清的制备

引 言第1-4页
摘 要第4-5页
Summary第5-6页
目 录第6-9页
第一篇 文献综述第9-31页
 朊蛋白结构及其生物学功能和朊病毒检测研究进展第9-31页
  前言第10-11页
  1 朊蛋白的结构第11-16页
   ·朊蛋白基因的结构第11-12页
   ·朊蛋白的一级结构第12-14页
   ·朊蛋白的二级结构第14-15页
   ·朊蛋白的三维结构第15-16页
  2 朊病毒的结构及细胞培养模型第16-18页
   ·PrP~C 与PrP~(Sc) 的区别及PrP~C 向PrP~(Sc) 的转变第16-18页
   ·朊病毒研究的细胞培养模型第18页
  3 朊蛋白生物学功能及其分布第18-19页
  4 朊病毒的体内播散途径第19-20页
   ·在淋巴网状内皮细胞系统的复制储存第19-20页
   ·神经轴突输送链第20页
   ·血源性播散第20页
  5 朊病毒的检测第20-23页
   ·蛋白酶K 处理的检测方法第20-22页
     ·免疫检测第20-22页
     ·蛋白错误折叠循环扩增法(PMCA)第22页
   ·血纤维蛋白溶酶原处理的检测方法第22-23页
   ·直接检测PrP~(Sc) 的方法第23页
     ·质谱检测第23页
     ·光谱检测第23页
  6 存在问题及展望第23-25页
  参考文献第25-31页
第二篇 研究报告第31-53页
 第一章 人朊蛋白基因的克隆表达及反应原性分析第31-46页
  1 前言第31-32页
  2 材料与方法第32-39页
   ·材料第32-33页
     ·菌株和质粒第32页
     ·血液来源第32页
     ·酶与试剂第32页
     ·主要仪器第32-33页
   ·方法第33-39页
     ·人PrP 基因ORF 克隆至pMD18-T 载体第33-35页
     ·重组表达载体的构建第35-37页
     ·重组菌的诱导表达及表达产物的纯化第37-38页
     ·表达产物的反应原性分析第38-39页
  3 结果与分析第39-41页
   ·人PRNP 基因ORF 克隆到pMD18-T 载体第39页
   ·人PRNP 基因ORF 序列分析第39-40页
   ·重组表达载体的构建第40页
   ·pET-HomPrP 的大肠杆菌高效表达及表达产物SDS-PAGE 检测第40页
   ·人重组mPrP 的纯化第40页
   ·人重组mPrP 的反应原性分析第40-41页
  4 讨论第41-44页
  参考文献第44-46页
 第二章 人成熟朊蛋白抗血清的制备第46-53页
  1 前言第46页
  2 材料与方法第46-48页
   ·材料第46-47页
     ·抗原第46页
     ·动物第46页
     ·主要仪器第46-47页
   ·方法第47-48页
     ·动物免疫第47页
     ·抗血清的制备第47页
     ·抗血清特异性的检测第47-48页
  3 结果与分析第48-50页
   ·方阵滴定确定抗原和抗体的工作浓度第48-49页
   ·抗血清的间接ELISA 检测结果第49页
   ·抗血清的Western-blotting 分析第49-50页
  4 讨论第50-52页
  参考文献第52-53页
缩写词英汉对照表第53-55页
致谢第55-56页
作者简介第56-57页
导师简介第57-58页

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