| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 英文缩写词表 | 第8-9页 |
| 前言 | 第9-10页 |
| 研究目的和意义 | 第9-10页 |
| 文献综述一 展青霉素毒性及其检测方法的研究进展 | 第10-17页 |
| 1 展青霉素的毒性 | 第10-13页 |
| ·急性毒性 | 第10页 |
| ·亚急性毒性 | 第10页 |
| ·致癌性 | 第10-11页 |
| ·PAT的致畸、致突变性 | 第11页 |
| ·细胞毒性 | 第11-12页 |
| ·对免疫系统的影响 | 第12-13页 |
| ·PAT的毒性作用机理 | 第13页 |
| 2 展青霉素的检测方法 | 第13-16页 |
| ·薄层色谱法 | 第13-14页 |
| ·气相-质相联机色谱法 | 第14-15页 |
| ·液相色谱法 | 第15页 |
| ·免疫学检测方法 | 第15-16页 |
| 3 展望 | 第16-17页 |
| 文献综述二 蛋白质偶联方法及其应用 | 第17-22页 |
| 1 常见的半抗原种类及性质 | 第17页 |
| 2 半抗原-载体偶联方法 | 第17-21页 |
| ·碳二亚胺法 | 第18页 |
| ·戊二醛法 | 第18页 |
| ·重氮化法 | 第18-19页 |
| ·琥珀酸酐法 | 第19页 |
| ·混合酸酐法 | 第19页 |
| ·对氨基苯甲酸法 | 第19页 |
| ·羧甲基羟胺法 | 第19页 |
| ·活泼酯法 | 第19页 |
| ·多元酸酐法 | 第19-20页 |
| ·过碘酸盐氧化法 | 第20页 |
| ·二异氰酸酯法 | 第20页 |
| ·亚胺酸酯法 | 第20页 |
| ·马来酰亚胺基类活泼酯法 | 第20页 |
| ·SPDP试剂法 | 第20-21页 |
| 3 小结 | 第21-22页 |
| 实验一 展青霉素衍生物的完全抗原的合成 | 第22-25页 |
| 1 材料与方法 | 第22页 |
| ·药品及试剂 | 第22页 |
| ·仪器与设备 | 第22页 |
| 2 展青霉素衍生物的完全抗原的合成 | 第22-23页 |
| ·展青霉素的修饰 | 第22页 |
| ·牛血清白蛋白的修饰 | 第22-23页 |
| ·免疫抗原PAT-HS-EDA-BSA的合成 | 第23页 |
| ·检测抗原PAT-HS-OVA的合成 | 第23页 |
| 3 结果与分析 | 第23-24页 |
| ·气质联机对修饰后的展青霉素(PAT-HS)的鉴定 | 第23-24页 |
| 4 讨论 | 第24-25页 |
| ·展青霉素及载体蛋白的修饰 | 第24页 |
| ·合成展青霉素完全抗原的方法 | 第24-25页 |
| 实验二 展青霉素多克隆抗体的制备及免疫学检测方法的建立 | 第25-37页 |
| 1 材料与方法 | 第25页 |
| ·药品及试剂 | 第25页 |
| ·仪器与设备 | 第25页 |
| ·实验动物 | 第25页 |
| 2 多克隆抗体的制备 | 第25-26页 |
| ·动物免疫 | 第25页 |
| ·抗体纯化及效价测定 | 第25-26页 |
| ·抗体特异性测定 | 第26页 |
| 3 免疫学检测方法的建立 | 第26-29页 |
| ·间接ELISA的步骤 | 第26页 |
| ·PAT-HS-OVA包被浓度及抗血清最佳使用浓度的确定 | 第26-27页 |
| ·酶标反应板均一性的测定 | 第27页 |
| ·PAT-HS-OVA包被条件的确定 | 第27页 |
| ·封闭液的确定 | 第27页 |
| ·封闭时间的确定 | 第27-28页 |
| ·酶标二抗最佳反应浓度的确定 | 第28页 |
| ·酶标二抗的最佳反应时间的确定 | 第28页 |
| ·底物反应时间的确定 | 第28-29页 |
| ·底物中不同H_2O_2浓度对反应结果的影响 | 第29页 |
| 4 结果与分析 | 第29-35页 |
| ·PAT-HS-OVA包被浓度及抗PAT血清最佳使用浓度的确定 | 第29页 |
| ·抗体特异性的确定 | 第29-30页 |
| ·酶标反应板均一性的测定结果 | 第30-31页 |
| ·PAT-HS-OVA包被条件的确定 | 第31页 |
| ·封闭液确定结果 | 第31-32页 |
| ·封闭时间确定结果 | 第32页 |
| ·酶标二抗最佳工作浓度的确定 | 第32-33页 |
| ·酶标二抗最佳反应时间的确定 | 第33页 |
| ·底物反应时间的确定 | 第33-34页 |
| ·底物稀释液中不同H_2O_2浓度对结果的影响 | 第34-35页 |
| 5 讨论 | 第35-37页 |
| ·免疫抗原对抗血清的影响 | 第35页 |
| ·封闭条件的确定 | 第35页 |
| ·二抗使用浓度及反应时间的确定 | 第35页 |
| ·本实验底物反应时间及底物稀释液中H_2O_2浓度的确定 | 第35-36页 |
| ·展青霉素筛选方法与其确证方法的区别 | 第36页 |
| ·本实验的进一步研究 | 第36-37页 |
| 结论 | 第37-38页 |
| 参考文献 | 第38-42页 |
| 致谢 | 第42-43页 |
| 附录 | 第43-44页 |
