| 中文摘要 | 第1-6页 |
| 英文摘要 | 第6-12页 |
| 前言 | 第12-25页 |
| 1 小鹅瘟及其危害 | 第12页 |
| 2 鹅细小病毒的特性 | 第12-19页 |
| ·鹅细小病毒分类学地位 | 第12页 |
| ·GPV的理化特性 | 第12-13页 |
| ·GPV的培养特性 | 第13页 |
| ·GPV的基因组特点 | 第13-15页 |
| ·末端回文结构 | 第14-15页 |
| ·编码区 | 第15页 |
| ·GPV基因编码蛋白及其功能 | 第15-17页 |
| ·非结构蛋白 | 第15-16页 |
| ·GPV的结构蛋白 | 第16-17页 |
| ·GPV的转录与调控 | 第17-19页 |
| ·核酸的克隆及表达 | 第19页 |
| 3 鹅细小病毒的诊断与防制 | 第19-21页 |
| ·病毒的分离和鉴定 | 第19-20页 |
| ·血清学诊断方法 | 第20页 |
| ·分子生物学诊断方法 | 第20页 |
| ·防制 | 第20-21页 |
| 4 核酸疫苗 | 第21-24页 |
| ·核酸疫苗的发展 | 第21-22页 |
| ·核酸疫苗的作用机理 | 第22页 |
| ·核酸疫苗的特点 | 第22-23页 |
| ·核酸疫苗的应用现状 | 第23-24页 |
| 5 研究的目的和意义 | 第24-25页 |
| 正文 | 第25-51页 |
| 实验一 鹅细小病毒四平分离株VP3基因克隆与序列分析 | 第25-40页 |
| 1 引言 | 第25-26页 |
| 2 材料和方法 | 第26-32页 |
| ·材料 | 第26-28页 |
| ·病毒 | 第26页 |
| ·质粒和感受态菌 | 第26页 |
| ·工具酶 | 第26页 |
| ·核酸分子量标准 | 第26页 |
| ·试剂盒 | 第26页 |
| ·主要试剂 | 第26-27页 |
| ·主要溶液的配制 | 第27-28页 |
| ·主要培养基的配制 | 第28页 |
| ·主要仪器 | 第28页 |
| ·方法 | 第28-32页 |
| ·鹅细小病毒的培养 | 第28页 |
| ·病毒核酸的提取 | 第28-29页 |
| ·引物设计与合成 | 第29页 |
| ·目的基因的扩增 | 第29-30页 |
| ·PCR产物的纯化 | 第30页 |
| ·目的基因与克隆载体pMD18-T连接 | 第30页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备(CaCl_2法) | 第30-31页 |
| ·转化大肠杆菌感受态细胞 | 第31页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第31-32页 |
| ·序列测定与分析 | 第32页 |
| 3 结果 | 第32-38页 |
| ·PCR扩增结果 | 第32-33页 |
| ·重组质粒PCR鉴定结果 | 第33页 |
| ·重组质粒酶切鉴定结果 | 第33-34页 |
| ·VP3基因的测序及与GPV B株序列比较结果 | 第34-38页 |
| 4 讨论 | 第38-40页 |
| ·病毒的选择 | 第38页 |
| ·目的基因的选择 | 第38页 |
| ·核酸的提取 | 第38-39页 |
| ·目的基因的序列分析 | 第39-40页 |
| 实验二 鹅细小病毒VP3基因核酸疫苗的构建及表达 | 第40-51页 |
| 1 引言 | 第40页 |
| 2 材料和方法 | 第40-46页 |
| ·材料 | 第40-41页 |
| ·细胞和感受态菌 | 第40页 |
| ·质粒和表达载体 | 第40页 |
| ·工具酶 | 第40-41页 |
| ·核酸分子量标准 | 第41页 |
| ·试剂盒 | 第41页 |
| ·主要试剂 | 第41页 |
| ·主要仪器 | 第41页 |
| ·方法 | 第41-46页 |
| ·质粒DNA的定量 | 第41-42页 |
| ·器皿处理 | 第42页 |
| ·主要试剂的配置 | 第42-43页 |
| ·重组表达质粒的筛选 | 第43-45页 |
| ·重组表达质粒的大量提取 | 第45页 |
| ·重组质粒转染Vero | 第45页 |
| ·免疫荧光检测 | 第45页 |
| ·RT-CR检测 | 第45-46页 |
| 3 结果 | 第46-48页 |
| ·真核表达质粒酶切鉴定 | 第46页 |
| ·真核表达质粒PCR鉴定 | 第46-47页 |
| ·RT-PCR检测结果 | 第47页 |
| ·免疫荧光检测结果 | 第47-48页 |
| 4 讨论 | 第48-51页 |
| ·表达载体的选择 | 第48-49页 |
| ·转染的方法 | 第49页 |
| ·RNA的提取 | 第49页 |
| ·目的蛋白的表达检测 | 第49-51页 |
| 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 作者简历 | 第59页 |