| 摘要 | 第1-12页 |
| 英文摘要 | 第12-15页 |
| 简写及缩略语 | 第15-16页 |
| 第一部分 文献综述 | 第16-43页 |
| 第一章 猪卵母细胞体外成熟与体外受精的研究进展 | 第16-32页 |
| 1 猪卵母细胞发育、成熟与受精的一般规律 | 第16-20页 |
| ·母细胞体内发育和成熟的特点 | 第16-19页 |
| ·卵子发生与成熟 | 第16-17页 |
| ·卵母细胞成熟过程中结构成分的变化 | 第17-18页 |
| ·成熟过程中卵丘细胞的变化 | 第18-19页 |
| ·卵母细胞受精过程中的重要事件 | 第19-20页 |
| ·精子获能 | 第19页 |
| ·精子穿过卵丘和透明带 | 第19页 |
| ·精卵激活 | 第19-20页 |
| ·雌雄原核的形成及其融合 | 第20页 |
| 2 影响猪胚胎体外生产技术的因素 | 第20-27页 |
| ·卵源性因素 | 第20-22页 |
| ·猪的品种、年龄和健康状况 | 第20页 |
| ·卵巢运输时的保存温度和时间 | 第20-21页 |
| ·采卵方法与卵丘-卵母细胞复合体质量 | 第21页 |
| ·卵泡大小对卵母细胞体外成熟与受精的影响 | 第21-22页 |
| ·培养系统对猪卵母细胞体外成熟和受精的影响 | 第22-23页 |
| ·添加激素 | 第22页 |
| ·添加生长因子对猪胚胎体外生产的影响 | 第22-23页 |
| ·猪卵泡液(porcine follicular fluid,pFF) | 第23页 |
| ·蛋白质和谷胱苷肽 | 第23页 |
| ·精源性因素对猪胚胎体外生产的影响 | 第23-25页 |
| ·体外受精液 | 第23-24页 |
| ·精子密度和受精时间对体外受精的影响 | 第24-25页 |
| ·培养条件对体外受精胚发育的影响 | 第25-26页 |
| ·其它因素 | 第26-27页 |
| 参考文献 | 第27-32页 |
| 第二章 卵母细胞冷冻保存技术的研究进展 | 第32-43页 |
| 1 卵母细胞冷冻保存的原理 | 第32-35页 |
| ·传统快速冷冻法的冷冻保存原理 | 第32-33页 |
| ·冷冻保护剂 | 第33-34页 |
| ·玻璃化冷冻保存原理 | 第34-35页 |
| 2 冷冻对卵母细胞的损害 | 第35-36页 |
| ·冷冻对细胞骨架的影响 | 第35页 |
| ·冷冻对透明带和细胞器的损害 | 第35-36页 |
| 3 影响卵母细胞冷冻保存的关键因素 | 第36-37页 |
| ·冷冻程序 | 第36页 |
| ·卵母细胞发育阶段 | 第36-37页 |
| 4 猪卵母细胞冷冻的最新进展 | 第37-39页 |
| 参考文献 | 第39-43页 |
| 第二部分 试验研究 | 第43-80页 |
| 第三章 猪胚胎体外生产的关键技术研究 | 第43-64页 |
| 1 材料 | 第44-46页 |
| ·猪卵巢来源 | 第44页 |
| ·主要仪器设备 | 第44-45页 |
| ·主要试剂 | 第45页 |
| ·试剂配制 | 第45-46页 |
| ·激素贮存液配制 | 第46页 |
| ·L-半胱氨酸存储液的配制 | 第46页 |
| ·TCM199、NCSU23、PBS、DPBS和mTBM的配制 | 第46页 |
| 2 方法 | 第46-49页 |
| ·猪卵母细胞采集 | 第46页 |
| ·猪卵泡液(pFF)的制备 | 第46页 |
| ·猪卵母细胞体外成熟 | 第46-47页 |
| ·体外受精 | 第47页 |
| ·卵丘细胞单层制备 | 第47-48页 |
| ·实验设计 | 第48-49页 |
| ·采卵方法对卵母细胞回收与发育的影响 | 第48页 |
| ·卵巢运输温度对卵母细胞发育的影响 | 第48页 |
| ·添加血清对猪卵母细胞体外成熟的影响 | 第48页 |
| ·精子获能液中添加肝素和咖啡因的受精效果比较 | 第48页 |
| ·不同类型卵泡卵母细胞的体外成熟和体外受精 | 第48页 |
| ·体外成熟培养系统对卵母细胞发育的影响 | 第48页 |
| ·卵巢生理状态对猪卵母细胞发育的影响 | 第48-49页 |
| ·不同培养系统对体外受精胚发育的影响 | 第49页 |
| ·数据处理 | 第49页 |
| 3 结果 | 第49-54页 |
| ·不同采卵方法对卵母细胞回收与发育的影响 | 第49页 |
| ·卵巢运输温度对猪卵母细胞发育能力的影响 | 第49-50页 |
| ·血清对猪卵母细胞体外成熟的影响 | 第50-51页 |
| ·精子获能液中添加肝素和咖啡因的受精效果比较 | 第51-52页 |
| ·不同类型卵泡卵母细胞的体外发育能力 | 第52页 |
| ·体外成熟培养系统对猪卵母细胞发育能力的影响 | 第52-53页 |
| ·卵巢生理状态对猪卵母细胞发育的影响 | 第53-54页 |
| ·不同培养系统对体外受精胚发育的影响 | 第54页 |
| 4 讨论 | 第54-60页 |
| ·采卵方法对卵母细胞回收与体外发育的影响 | 第55页 |
| ·卵巢运输温度对猪卵母细胞发育能力的影响 | 第55-56页 |
| ·添加血清对猪卵母细胞体外成熟的影响 | 第56页 |
| ·精子获能液中添加肝素和咖啡因对受精效果的影响 | 第56-57页 |
| ·不同类型卵泡卵母细胞的体外发育能力 | 第57-58页 |
| ·添加激素和pFF对体外成熟和体外受精的影响 | 第58页 |
| ·卵巢生理状态对猪卵母细胞发育的影响 | 第58-59页 |
| ·不同培养系统对猪体外受精胚发育的影响 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-64页 |
| 第四章 猪卵母细胞的玻璃化冷冻保存技术研究 | 第64-80页 |
| 1 材料 | 第65-66页 |
| ·猪卵巢来源 | 第65页 |
| ·主要仪器和设备 | 第65页 |
| ·主要试剂和药品 | 第65-66页 |
| ·试剂配制 | 第66页 |
| ·ED和EDS溶液的配制 | 第66页 |
| ·EFS20和EFS40溶液的配制 | 第66页 |
| ·EG和ES溶液的配制 | 第66页 |
| ·台盼蓝(TB)的配制 | 第66页 |
| ·二乙酸荧光素(FDA)贮存液的配制 | 第66页 |
| ·细胞松弛素B(CB)的配制 | 第66页 |
| 2 方法 | 第66-69页 |
| ·OPS管制作 | 第66-67页 |
| ·GⅤ期与MⅡ期卵母细胞来源 | 第67页 |
| ·细胞松弛素B与离心极化共处理 | 第67页 |
| ·卵母细胞玻璃化冷冻与解冻 | 第67-68页 |
| ·常规细管法玻璃化冷冻与解冻 | 第67页 |
| ·OPS法玻璃化冷冻与解冻 | 第67-68页 |
| ·电镜铜网(EMG)法玻璃化冷冻与解冻 | 第68页 |
| ·卵母细胞冷冻效果的评价 | 第68页 |
| ·试验设计 | 第68-69页 |
| ·不同冷冻保护剂处理对猪卵母细胞存活与发育的影响 | 第68-69页 |
| ·不同冷冻载体对猪卵母细胞冷冻效果的观察 | 第69页 |
| ·猪GⅤ期和MⅡ期卵母细胞的冷冻保存 | 第69页 |
| ·细胞松弛素B和离心极化处理对卵母细胞冻后存活与发育的影响 | 第69页 |
| ·统计分析 | 第69页 |
| 3 结果 | 第69-75页 |
| ·不同冷冻保护剂处理对猪卵母细胞存活与发育的影响 | 第70-71页 |
| ·不同冷冻载体对猪卵母细胞冷冻效果的观察 | 第71-72页 |
| ·猪GⅤ期和MⅡ期卵母细胞的冷冻保存 | 第72-73页 |
| ·细胞松弛素B和离心极化处理对卵母细胞冻后存活与发育的影响 | 第73-75页 |
| 4 讨论 | 第75-80页 |
| ·不同冷冻保护剂处理对猪卵母细胞存活与发育的影响 | 第75-77页 |
| ·不同冷冻载体对猪卵母细胞冷冻效果的影响 | 第77-78页 |
| ·猪GⅤ期和MⅡ期卵母细胞的冷冻保存 | 第78页 |
| ·细胞松弛素B和离心极化处理对卵母细胞冻后存活与发育的影响 | 第78-80页 |
| 参考文献 | 第80-85页 |
| 全文总结 | 第85-86页 |
| 图版 | 第86-90页 |
| 附录 | 第90-92页 |
| 致谢 | 第92页 |
