| 独创声明 | 第1页 |
| 学位论文版权使用授权书 | 第3-4页 |
| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 缩略语 | 第8-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-32页 |
| 1 发育生物学和进化生物学研究的模式动物-文昌鱼 | 第11-23页 |
| 2 分子伴侣p23蛋白的研究进展 | 第23-31页 |
| 3 主要内容和技术路线 | 第31-32页 |
| 第二章 青岛文昌鱼AmphiP23基因的特征、表达和进化分析 | 第32-58页 |
| 1 前言 | 第32-33页 |
| 2 材料与方法 | 第33-48页 |
| ·材料 | 第33-37页 |
| ·实验方法 | 第37-48页 |
| ·文昌鱼肠cDNA文库的构建与测序 | 第37页 |
| ·序列比较与系统进化分析 | 第37-38页 |
| ·Nortern blot | 第38-44页 |
| ·文昌鱼胚胎p23基因的整体原位杂交 | 第44-48页 |
| 3 结果 | 第48-55页 |
| ·文昌鱼p23 cDNA的确定和序列分析 | 第48-51页 |
| ·文昌鱼p23蛋白的进化分析 | 第51-52页 |
| ·文昌鱼p23基因在成体组织中的表达 | 第52-54页 |
| ·整体原位杂交技术检测p23基因在文昌鱼不同发育时期的时空表达 | 第54-55页 |
| 4 讨论 | 第55-58页 |
| 第三章 青岛文昌鱼p23蛋白的融合表达、纯化、鉴定和多克隆抗体制备 | 第58-75页 |
| 1 前言 | 第58页 |
| 2 材料与方法 | 第58-67页 |
| ·材料 | 第58-60页 |
| ·实验方法 | 第60-67页 |
| ·表达载体的构建 | 第60-62页 |
| ·CaCl_2感受态细胞的制备 | 第62页 |
| ·连接产物的转化 | 第62-63页 |
| ·重组质粒pGEX-6P-1-P23的筛选 | 第63页 |
| ·重组质粒pGEX-6P-1P23的提取和酶切鉴定 | 第63-64页 |
| ·重组质粒pGEX-6P-1P23的序列测定 | 第64页 |
| ·重组p23基因在大肠杆菌中的融合表达 | 第64页 |
| ·重组GST-p23融合蛋白的纯化 | 第64-65页 |
| ·p23融合蛋白的鉴定 | 第65页 |
| ·多克隆抗体的制备及纯化 | 第65页 |
| ·抗体的特异性和文昌鱼体液的Western blot检测 | 第65-66页 |
| ·文昌鱼p23蛋白的免疫组织化学检测 | 第66-67页 |
| 3 结果 | 第67-74页 |
| ·p23基因的PCR扩增 | 第67-68页 |
| ·pGEX-6P-1-p23表达载体的构建 | 第68-70页 |
| ·重组pGEX-6P-1-p23在大肠杆菌中的表达 | 第70-71页 |
| ·GST-p23融合蛋白的纯化 | 第71-72页 |
| ·p23蛋白的多克隆抗体制备及Western blot检测 | 第72-73页 |
| ·文昌鱼p23蛋白的免疫组织化学分析 | 第73-74页 |
| 4 讨论 | 第74-75页 |
| 第四章 文昌鱼p23蛋白的生物信息学分析及三维结构的同源模建 | 第75-87页 |
| 1 前言 | 第75-76页 |
| 2 研究方法 | 第76-78页 |
| ·文昌鱼p23蛋白序列的生物信息学分析 | 第76-77页 |
| ·文昌鱼三维空间结构的同源模建 | 第77-78页 |
| 3 结果 | 第78-86页 |
| ·文昌鱼p23蛋白的生物信息学分析 | 第78-82页 |
| ·文昌鱼p23蛋白的同源模建 | 第82-86页 |
| 4 讨论 | 第86-87页 |
| 总结与展望 | 第87-89页 |
| 参考文献 | 第89-107页 |
| 附录 | 第107-115页 |
| 发表论文 | 第115-118页 |
| 作者简介 | 第118-119页 |
| 致谢 | 第119页 |
