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苹果[Malus domestica]DHAR基因cDNA全长克隆及其植物表达载体构建

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-8页
第一章 文献综述第8-23页
   ·植物抗坏血酸的研究进展第8-15页
     ·抗坏血酸的生物学功能第8-12页
     ·植物抗坏血酸的生物合成第12-14页
     ·植物抗坏血酸的代谢和转运第14页
     ·植物抗坏血酸的调控机制第14-15页
   ·植物脱氢抗坏血酸还原酶的研究进展第15-17页
   ·植物基因克隆研究和应用进展第17-19页
     ·通过已知基因产物的分析和鉴定第17页
     ·通过遗传表型分析第17-18页
     ·从研究缺失突变体的表型着手分离基因第18页
     ·从大的基因组区域直接分离编码序列第18页
     ·通过研究m RNA 差异表达筛选克隆基因第18-19页
     ·表型克隆法第19页
     ·应用DNA 芯片技术筛选新基因第19页
   ·RACE 方法及其研究进展第19-22页
     ·RACE 原理第19-20页
     ·RACE 技术的优点和缺点第20页
     ·传统RACE 的改良第20-21页
     ·新型RACE第21-22页
   ·本试验的目的和意义第22-23页
第二章 材料与方法第23-32页
   ·试验材料第23-24页
   ·试验内容与方法第24-32页
     ·苹果叶片总RNA 的提取第24-25页
     ·DHAR 基因中间片段的获得第25-26页
     ·DHAR 基因3’端的获得第26-27页
     ·DHAR 基因5’端的获得第27-28页
     ·DHAR 基因全长的获得第28-29页
     ·RT-PCR 扩增产物的克隆第29-31页
     ·基因序列的测定及分析第31页
     ·植物表达载体的构建第31-32页
第三章 结果与分析第32-43页
   ·苹果叶片总RNA 提取方法的筛选第32-33页
   ·DHAR 基因cDNA 中间片段的克隆第33-34页
     ·DHAR 基因cDNA 中间片段的获得第33页
     ·DHAR 基因cDNA 中间片段重组质粒的鉴定第33-34页
     ·DHAR 基因cDNA 中间片段的序列测定第34页
   ·DHAR 基因cDNA 3’端的克隆第34-37页
     ·DHAR 基因3’端的获得第34-35页
     ·DHAR 基因cDNA 3’端片段重组质粒的鉴定第35-36页
     ·DHAR 基因cDNA 3’端片段的序列测定第36-37页
   ·DHAR 基因5’端的克隆第37-38页
     ·DHAR 基因cDNA 5’端的获得第37页
     ·DHAR 基因cDNA 5’端片段重组质粒的鉴定第37-38页
     ·DHAR 基因cDNA 5’端片段的序列测定第38页
   ·DHAR 基因cDNA 全长的克隆第38-41页
     ·DHAR 基因cDNA 全长的获得第38-39页
     ·DHAR 基因cDNA 全长重组质粒的鉴定第39-40页
     ·DHAR 基因cDNA 全长的序列测定及结果分析第40-41页
   ·植物表达载体pSB-DHAR 的鉴定第41-43页
第四章 讨论第43-47页
   ·DHAR 在AsA-GSH 循环中的重要作用及其研究意义第43-44页
   ·关于RNA 的提取第44页
   ·关于PCR 体系及各要素第44-46页
     ·PCR 反应体系五要素第44-45页
     ·PCR 反应条件的选择第45-46页
   ·RACE 技术的优化第46-47页
第五章 结论第47-48页
参考文献第48-55页
致谢第55-56页
作者简介第56页

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