| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 第一部分 SRC蛋白激酶的研究进展 | 第8-20页 |
| 前言 | 第9页 |
| 1.Src的发现 | 第9-10页 |
| 2.Src的基因及蛋白结构 | 第10-12页 |
| ·src的基因结构特征 | 第10-11页 |
| ·Src蛋白的结构特征 | 第11-12页 |
| 3.Src蛋白的激酶活性 | 第12-14页 |
| ·Src蛋白的激酶活性的发现 | 第12-13页 |
| ·Src蛋白的激酶活性的调节 | 第13-14页 |
| 4.Src蛋白的生理功能 | 第14-18页 |
| ·细胞粘附 | 第15页 |
| ·细胞凋亡 | 第15-16页 |
| ·细胞周期 | 第16-17页 |
| ·对洲A合成的诱导 | 第16页 |
| ·在G2/M期的转变 | 第16-17页 |
| ·细胞迁移 | 第17页 |
| ·血管收缩 | 第17-18页 |
| 5.与Src相关的人类疾病 | 第18-19页 |
| 6.Src蛋白的应用及前景展望 | 第19-20页 |
| 第二部分 c-src激酶域基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达研究 | 第20-53页 |
| 前言 | 第21-23页 |
| 1.实验材料及仪器 | 第23-27页 |
| ·菌种 | 第23页 |
| ·质粒 | 第23页 |
| ·酶 | 第23页 |
| ·试剂盒来源 | 第23页 |
| ·缓冲液及其他溶液配方 | 第23-25页 |
| ·液体培养基和固体培乔量 | 第25页 |
| ·电泳胶的配制 | 第25-26页 |
| ·其它主要试剂和商品来源 | 第26页 |
| ·主要仪器及设备 | 第26-27页 |
| 2.实验方案 | 第27-38页 |
| ·PCR扩增及产物回收 | 第27-28页 |
| ·PCR扩增 | 第27-28页 |
| 2 2 2 PCR产物的回收 | 第28页 |
| ·质粒抽提同 | 第28-30页 |
| ·细菌的培养和保存 | 第28-29页 |
| ·碱法抽提质粒 | 第29页 |
| ·试剂盒抽提质粒 | 第29-30页 |
| ·酶切及产物回收 | 第30页 |
| ·克隆载体构建 | 第30-31页 |
| ·表达载体的构建 | 第31-32页 |
| ·大肠杆菌转化筛选 | 第32-34页 |
| ·感受的制备 | 第32-33页 |
| ·转化 | 第33页 |
| ·筛选及鉴定 | 第33-34页 |
| ·蛋白的表达及鉴定 | 第34-35页 |
| ·蛋白的纯化 | 第35-36页 |
| ·蛋白的复性及活性研究 | 第36-38页 |
| ·蛋白浓度的测定 | 第36页 |
| ·蛋白的复性 | 第36页 |
| ·酪氨酸激酶活性研究方法 | 第36-38页 |
| 3．实验结果及分析 | 第38-50页 |
| ·PCR扩增结果 | 第38-39页 |
| ·克隆载体构建结果 | 第39-41页 |
| ·表达载体构建结果 | 第41-43页 |
| ·蛋白表达 | 第43-44页 |
| ·表达条件的优化 | 第44-45页 |
| ·蛋白纯化 | 第45-47页 |
| ·蛋白复性及活性研究 | 第47-50页 |
| ·复性 | 第47-48页 |
| ·蛋白浓度的测定 | 第48页 |
| ·制备磷酸肽标准曲线 | 第48-49页 |
| ·表达产物的酪氨酸蛋白激酶活性 | 第49-50页 |
| 4．讨论 | 第50-53页 |
| ·PCR扩增条件 | 第50-51页 |
| ·表达载体 | 第51-52页 |
| ·复性方法 | 第52页 |
| ·结论及展望 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-57页 |
| 硕士研究生期间发表论文 | 第57-58页 |
| 附录 | 第58-62页 |
| 附录1：英文缩写词表 | 第58-59页 |
| 附录2：Hc-sRc基因序列及蛋白序列 | 第59-60页 |
| 附录3：PUCM-T VEcToR图谱 | 第60-61页 |
| 附录4：PET-22B(+)质粒图谱 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62页 |