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离体培养下氮素浓度对小麦籽粒蛋白质和mRNA差异表达影响的研究

前言第1-13页
第一章 文献综述第13-23页
   ·氮素对小麦农艺性状和品质性状的影响第13-15页
     ·氮素在土壤一小麦系统中的转化、运输和运转再分配第13-14页
     ·施氮对小麦产量与品质的影响第14-15页
   ·高分子量谷蛋白和醇溶蛋白与小麦品质的关系研究第15-19页
     ·HMW-GS 与小麦品质关系的研究进展第16-18页
     ·麦醇溶蛋白的国内外研究进展第18-19页
   ·MRNA 差别显示技术的原理及在小麦基因研究中的应用第19-21页
     ·mRNA 差别显示的原理第19-20页
     ·mRNA 差别显示实验的基本过程第20页
     ·mRNA 差别显示法的优点和局限性第20-21页
     ·应用差异显示方法对小麦基因的研究进展第21页
   ·本研究的主要内容和意义第21-23页
第二章 离体培养下氮素浓度对小麦农艺性状和品质性状的影响第23-34页
   ·材料与方法第23-25页
     ·材料第23-24页
     ·植株培养方法和实验设计第24页
     ·样品制备及指标测定第24-25页
     ·膨胀势测定第25页
     ·谷蛋白膨胀指数(SIG)测定第25页
     ·因子分析第25页
     ·有关氮素利用效率指标的计算方法如下第25页
   ·结果与分析第25-33页
     ·不同氮素处理对氮素利用效率及农艺性状的影响第25-28页
     ·品质对氮素浓度及氮素利用效率的反应第28-30页
     ·部分品质性状与产量性状的关系第30-31页
     ·受氮素浓度影响的15 个性状的因子分析第31-33页
   ·结论与讨论第33-34页
     ·离体培养下氮素浓度对小麦农艺性状的影响第33页
     ·离体培养下氮素浓度对部分小麦品质性状的影响第33页
     ·利于小麦籽粒产量与蛋白品质最佳结合的离体培养氮素浓度第33-34页
第三章 氮素浓度对小麦籽粒HMW-GS 表达动态和含量的影响第34-42页
   ·材料与方法第34-36页
     ·试验地点及条件第34-35页
     ·实验方法第35页
     ·样品制备第35页
     ·样品测定方法——SDS-PAGE第35-36页
   ·结果与分析第36-41页
     ·籽粒建成期HMW-GS 表达动态第36-37页
     ·不同氮素浓度下的HMW-GS 积累动态第37-38页
     ·不同氮素浓度下的HMW-GS 含量变化第38-41页
   ·讨论第41-42页
第四章 离体培养下氮素浓度对小麦醇溶蛋白积累动态及差异表达的研究第42-46页
   ·材料与方法第42-44页
     ·材料及处理第42-43页
     ·方法—A-PAGE第43-44页
   ·结果与讨论第44-46页
     ·不同氮素浓度下的醇溶蛋白的表达动态第44页
     ·不同氮素浓度下醇溶蛋白的差异表达第44-46页
第五章 DDRT-PCR 分析氮素浓度对离体培养小麦基因差异表达的研究第46-58页
   ·材料与方法第46-50页
     ·材料培养与处理第46-47页
     ·试验方法第47-50页
     ·差异片断的回收、二次扩增第50页
     ·差异片断的克隆、测序第50页
     ·序列同源性比对第50页
   ·结果与分析第50-55页
     ·mRNA 的提取第50-51页
     ·cDNA 反转录和RT-PCR第51页
     ·cDNA 差异片段展示第51-54页
     ·差异片断的克隆,测序第54-55页
     ·序列同源性分析第55页
   ·结论与讨论第55-58页
     ·试验中对mRNA 差显技术的优化措施第55-57页
     ·差显结果第57-58页
第六章 结论与展望第58-61页
   ·结论第58-59页
     ·小麦穗离体培养下不同氮素供应的农艺性状和品质性状差异表达第58页
     ·不同氮素浓度下的氮素利用规律第58-59页
     ·穗离体培养中不同氮素浓度胁迫对小麦籽粒HMW-GS 的差异表达第59页
     ·穗离体培养中不同氮素浓度胁迫对醇溶蛋白差异表达第59页
     ·穗离体培养下小麦籽粒基因差异表达第59页
   ·今后的研究设想第59-61页
参考文献第61-67页
附录1 谷蛋白电泳试剂配置和SDS—PAGE 具体方法、步骤第67-69页
附录2 醇溶蛋白电泳试剂配制和电泳方法(A—PAGE)第69-70页
附录3 粗蛋白含量和蛋白组分测定第70-71页
附录4 膨胀势测定和谷蛋白膨胀指数(SLG)测定方法第71-72页
附录5 10%丙烯酰胺电泳、银染检测方法第72-73页
附图 穗离体培养第73-74页
致谢第74-75页
作者简介第75-76页
导师评阅表第76页

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