前言 | 第1-23页 |
1 杆状病毒简介 | 第10-18页 |
1.1 杆状病毒的分类和命名 | 第10-11页 |
1.2 杆状病毒的结构 | 第11-12页 |
1.3 杆状病毒的感染周期 | 第12-14页 |
1.4 杆状病毒基因组特征 | 第14-15页 |
1.5 杆状病毒的结构蛋白基因 | 第15页 |
1.6 杆状病毒基因的时序性表达与相关基因 | 第15-16页 |
1.7 杆状病毒 DNA复制与相关基因 | 第16页 |
1.8 杆状病毒与宿主相互作用的基因 | 第16-17页 |
1.9 杆状病毒的应用 | 第17-18页 |
2 本实验的研究背景及目的 | 第18-23页 |
2.1 本实验的研究背景一杆状病毒与肌动蛋白的相互作用 | 第18-21页 |
2.2 本试验的目的和意义 | 第21-23页 |
材料和方法 | 第23-36页 |
1 材料 | 第23-27页 |
1.1 大肠杆菌菌株 | 第23页 |
1.2 昆虫细胞系 | 第23页 |
1.3 病毒和 Bacmid | 第23-24页 |
1.4 质粒 | 第24页 |
1.5 引物 | 第24-25页 |
1.6 培养基 | 第25-26页 |
1.7 酶、化学试剂和试剂盒 | 第26页 |
1.8 抗生素 | 第26-27页 |
2 方法 | 第27-36页 |
2.1 大肠杆菌中质粒 DNA的提取方法 | 第27页 |
2.2 大肠杆菌中Bacmid的提取法 | 第27页 |
2.3 DNA限制性酶切片段和 PCR产物的回收 | 第27-28页 |
2.4 PCR(聚合酶链反应) | 第28页 |
2.5 电转化用感受态细胞的制备和电转化 | 第28-29页 |
2.6 SDS-PAGE | 第29-30页 |
2.7 杆状病毒对昆虫细胞的感染和扩增 | 第30页 |
2.8 重组bacmid DNA转染 Sf9细胞 | 第30页 |
2.9 重组病毒的构建 | 第30-33页 |
2.10 终点稀释法测定病毒滴度 | 第33-34页 |
2.11 重组病毒生长特性比较 | 第34页 |
2.12 重组病毒感染 Sf9细胞的切片制备和电子显微镜观察 | 第34页 |
2.13 转录分析(RT-PCR) | 第34-35页 |
2.14 AcMNPV-GFP-actin(Ph~-)感染的 Sf9细胞中肌动蛋白的亚细胞定位 | 第35页 |
2.15 Hoechst33258核染色以及激光共聚焦显微镜观察 | 第35页 |
2.16 CD处理 | 第35-36页 |
结果和讨论 | 第36-52页 |
1 对重组病毒 AcMNPV-GFP-actin(ph~-)的分析 | 第36-41页 |
1.1 AcMNPV-GFP-actin(ph~-)感染 Sf9细胞中肌动蛋白基因的转录分析 | 第36页 |
1.2 AcMNPV-GFP-actin(ph~-)与 AcMNPV生长特性的比较 | 第36-37页 |
1.3 AcMNPV-GFP-actin(ph~-)感染的 Sf9细胞中肌动蛋白的亚细胞定位 | 第37-39页 |
1.4 CD对AcMNPV-GFP-actin(ph~-)感染的Sf9细胞中肌动蛋白亚细胞定位的影响 | 第39页 |
1.5 AcMNPV-GFP-actin(ph~-)感染 Sf9细胞的切片观察 | 第39-41页 |
2 重组病毒的构建、鉴定和分析 | 第41-48页 |
2.1 多角体基因的克隆和测序 | 第41页 |
2.2 转移载体的构建 | 第41-44页 |
2.3 重组 Bacmid的构建 | 第44页 |
2.4 重组病毒的获得和 PCR鉴定 | 第44-45页 |
2.5 感染实验 | 第45-46页 |
2.6 重组病毒vAc-ph/70GA感染 Sf9细胞的超微结构分析 | 第46-47页 |
2.7 重组病毒vAc-ph和vAc-ph/70GA多角体基因表达的分析 | 第47-48页 |
2.8 重组病毒vAc-ph/70GA的生长特性 | 第48页 |
3 讨论 | 第48-52页 |
参考文献 | 第52-59页 |
已发表和撰写的文章 | 第59-60页 |
致谢 | 第60-61页 |