摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
符号说明 | 第8-9页 |
第一部分 文献综述 | 第9-33页 |
1. 植物抵抗非生物胁迫的信号传导途径及分子机理 | 第9-23页 |
2. 海藻糖及其代谢的功能及在遗传改良中的应用 | 第23-33页 |
第二部分 研究工作 | 第33-73页 |
一、材料与方法 | 第33-56页 |
1. 试剂与材料 | 第33-34页 |
2. 常规方法 | 第34-40页 |
3. E.coli海藻糖磷酸合成酶基因otsA的克隆及表达载体构建 | 第40-47页 |
4. 大麦LEA蛋白基因HVA1的克隆及表达载体构建 | 第47-54页 |
5. otsA、HVA1基因对小麦遗传转化及转基因植株检测 | 第54-56页 |
二、结果与分析 | 第56-70页 |
1. E. coli otsA基因克隆及其表达载体构建 | 第56-62页 |
1.1 PCR扩增otsA基因 | 第56-57页 |
1.2 目的片段与T载体连接及重组子鉴定 | 第57-58页 |
1.3 测序结果 | 第58-59页 |
1.4 pRAL-otsA表达载体构建 | 第59-60页 |
1.5 通用植物表达载体pR29A构建 | 第60-61页 |
1.6 pR29A-otsA表达载体构建 | 第61-62页 |
2. HVA1基因克隆及表达载体构建 | 第62-66页 |
2.1 大麦叶片总RNA提取 | 第62页 |
2.2 RT-PCR结果 | 第62-63页 |
2.3 目的片段与T载体连接及重组子鉴定 | 第63-64页 |
2.4 测序结果 | 第64-65页 |
2.5 pRAL-HVA1表达载体构建 | 第65页 |
2.6 pR29A-HVA1表达载体构建 | 第65-66页 |
3. 小麦的苗端转化 | 第66-70页 |
3.1 otsA、HVA1基因转化小麦及T_0代植株表型 | 第66页 |
3.2 转pRAL-otsA小麦植株的T_0、T_1代PCR检测 | 第66-68页 |
3.3 转pRAL-otsA T_1代植株表型 | 第68-70页 |
三、讨论 | 第70-73页 |
1. 关于小麦的苗端转化 | 第70-71页 |
2. 关于转pRAL-otsA T_1代植株的变异 | 第71-72页 |
3. 关于提高载体构建过程中连接效率的措施 | 第72-73页 |
工作总结及展望 | 第73-74页 |
参考文献(REFERENCES) | 第74-83页 |
致谢 | 第83页 |
发表文献 | 第83-84页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第84页 |