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大肠杆菌海藻糖磷酸合成酶otsA基因、大麦HVA1基因的克隆及对小麦的遗传转化

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-8页
符号说明第8-9页
第一部分 文献综述第9-33页
 1. 植物抵抗非生物胁迫的信号传导途径及分子机理第9-23页
 2. 海藻糖及其代谢的功能及在遗传改良中的应用第23-33页
第二部分 研究工作第33-73页
 一、材料与方法第33-56页
  1. 试剂与材料第33-34页
  2. 常规方法第34-40页
  3. E.coli海藻糖磷酸合成酶基因otsA的克隆及表达载体构建第40-47页
  4. 大麦LEA蛋白基因HVA1的克隆及表达载体构建第47-54页
  5. otsA、HVA1基因对小麦遗传转化及转基因植株检测第54-56页
 二、结果与分析第56-70页
  1. E. coli otsA基因克隆及其表达载体构建第56-62页
   1.1 PCR扩增otsA基因第56-57页
   1.2 目的片段与T载体连接及重组子鉴定第57-58页
   1.3 测序结果第58-59页
   1.4 pRAL-otsA表达载体构建第59-60页
   1.5 通用植物表达载体pR29A构建第60-61页
   1.6 pR29A-otsA表达载体构建第61-62页
  2. HVA1基因克隆及表达载体构建第62-66页
   2.1 大麦叶片总RNA提取第62页
   2.2 RT-PCR结果第62-63页
   2.3 目的片段与T载体连接及重组子鉴定第63-64页
   2.4 测序结果第64-65页
   2.5 pRAL-HVA1表达载体构建第65页
   2.6 pR29A-HVA1表达载体构建第65-66页
  3. 小麦的苗端转化第66-70页
   3.1 otsA、HVA1基因转化小麦及T_0代植株表型第66页
   3.2 转pRAL-otsA小麦植株的T_0、T_1代PCR检测第66-68页
   3.3 转pRAL-otsA T_1代植株表型第68-70页
 三、讨论第70-73页
  1. 关于小麦的苗端转化第70-71页
  2. 关于转pRAL-otsA T_1代植株的变异第71-72页
  3. 关于提高载体构建过程中连接效率的措施第72-73页
工作总结及展望第73-74页
参考文献(REFERENCES)第74-83页
致谢第83页
发表文献第83-84页
学位论文评阅及答辩情况表第84页

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