| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 目录 | 第7-10页 |
| 英文缩略表 | 第10-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-19页 |
| ·研究背景、目的及意义 | 第11-13页 |
| ·国内外研究现状 | 第13-18页 |
| ·传统的ELISA方法 | 第13-15页 |
| ·新型的ELISA方法 | 第15-18页 |
| ·ELISA面临的问题与发展方向 | 第18-19页 |
| 第二章 单克隆抗体的制备及3ABC融合蛋白的表达 | 第19-27页 |
| ·材料 | 第19-20页 |
| ·方法 | 第20-24页 |
| ·HIS标签3ABC融合蛋白的表达 | 第20页 |
| ·HIS标签3ABC融合蛋白的纯化 | 第20页 |
| ·间接ELISA测定HIS标签3ABC融合蛋白亲和力 | 第20-21页 |
| ·杂交瘤细胞的复苏 | 第21页 |
| ·腹水的制备 | 第21-22页 |
| ·腹水型单抗的纯化 | 第22页 |
| ·间接ELISA法测定单抗对3ABC融合蛋白的亲和力 | 第22-23页 |
| ·单克隆抗体的标记 | 第23页 |
| ·直接ELISA法测定酶标记后的腹水单抗对3ABC融合蛋白的亲和力 | 第23页 |
| ·杂交瘤细胞的冻存 | 第23页 |
| ·对HIS-单抗进行处理 | 第23-24页 |
| ·间接ELISA测定HIS-单抗的亲和力 | 第24页 |
| ·结果 | 第24-26页 |
| ·3ABC融合蛋白的纯化结果 | 第24页 |
| ·3ABC融合蛋白对牛、羊、猪阴性及阳性血清亲和力的测定结果 | 第24-25页 |
| ·3A及3B单克隆抗体的纯化结果 | 第25页 |
| ·3A及3B单克隆抗体对3ABC融合蛋白亲和力的测定结果 | 第25-26页 |
| ·His-单抗对3ABC融合蛋白的亲和力测定结果 | 第26页 |
| ·小结 | 第26页 |
| ·讨论 | 第26-27页 |
| 第三章 检测口蹄疫病毒非结构蛋白3ABC的单克隆抗体阻断ELISA方法的建立 | 第27-37页 |
| ·材料 | 第27-28页 |
| ·试剂与材料 | 第27页 |
| ·相关试剂盒 | 第27页 |
| ·标准血清 | 第27页 |
| ·血清样品背景 | 第27-28页 |
| ·主要仪器 | 第28页 |
| ·方法 | 第28-29页 |
| ·设计实验流程 | 第28页 |
| ·方阵滴定法测定3ABC抗原的工作浓度 | 第28页 |
| ·方阵滴定法测定单克隆抗体的工作浓度 | 第28页 |
| ·最佳血清稀释度的确定 | 第28-29页 |
| ·加入血清后最佳反应温度和反应时间的确定 | 第29页 |
| ·实验用非结构蛋白单克隆抗体株的确定 | 第29页 |
| ·对非结构蛋白3B单抗及3ABC融合蛋白进行绝对定量 | 第29页 |
| ·制定FMDV NSP B-ELISA的操作流程 | 第29页 |
| ·阴阳行判定标准的确定 | 第29页 |
| ·结果 | 第29-36页 |
| ·3ABC蛋白相对工作浓度的测定结果 | 第29-30页 |
| ·单克隆抗体相对工作浓度的测定结果 | 第30页 |
| ·最佳血清稀释度的确定结果 | 第30-31页 |
| ·加入血清后最佳反应时间及反应温度的确定结果 | 第31-33页 |
| ·两株非结构蛋白单抗的选择结果 | 第33页 |
| ·3B单抗和3ABC融合蛋白的绝对定量结果 | 第33-34页 |
| ·FMDV NSP B-ELISA的操作流程 | 第34页 |
| ·血清抗体阳性及阴性判定标准的确定结果 | 第34-36页 |
| ·小结 | 第36页 |
| ·讨论 | 第36-37页 |
| 第四章 检测口蹄疫非结构蛋白3ABC的单克隆抗体阻断ELISA的效果评价 | 第37-42页 |
| ·材料 | 第37页 |
| ·血清样品的背景 | 第37页 |
| ·相关试剂盒 | 第37页 |
| ·主要仪器 | 第37页 |
| ·方法 | 第37-38页 |
| ·本方法的敏感性及特异性检测 | 第37页 |
| ·本方法与Ceditest NS ELISA试剂盒、FMD 3ABC-ELISA试剂盒的符合率对比试验 | 第37-38页 |
| ·结果 | 第38-40页 |
| ·本方法的敏感性及特异性判定结果 | 第38页 |
| ·本方法与Ceditest NS ELISA试剂盒及FMD 3ABC-ELISA试剂盒三种方法检测猪、牛及羊血清后的符合率统计结果 | 第38-39页 |
| ·本方法与Ceditest NS ELISA试剂盒及FMD 3ABC-ELISA试剂盒检测实验室感染动物持续采血血清后的对比结果 | 第39-40页 |
| ·小结 | 第40-41页 |
| ·讨论 | 第41-42页 |
| 第五章 全文结论 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 作者简历 | 第50页 |
