| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 英文缩略表 | 第10-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-19页 |
| ·DPL的发现 | 第13页 |
| ·DPL的分布 | 第13-14页 |
| ·DPL蛋白的结构 | 第14-15页 |
| ·DPL的功能 | 第15-17页 |
| ·Dpl 的生殖功能 | 第15-16页 |
| ·Dpl 的神经功能 | 第16页 |
| ·Dpl 与 PrPc的相互作用 | 第16-17页 |
| ·大肠杆菌表达系统 | 第17页 |
| ·单克隆抗体的应用 | 第17-18页 |
| ·本实验的研究目的、意义与内容 | 第18-19页 |
| 第二章 牛成熟叠朊在大肠杆菌中的高效表达 | 第19-26页 |
| ·实验材料 | 第19-20页 |
| ·质粒载体与菌株 | 第19页 |
| ·主要试剂 | 第19页 |
| ·主要试剂的配制 | 第19-20页 |
| ·仪器 | 第20页 |
| ·实验方法 | 第20-23页 |
| ·牛 Dpl 在 E.coli 中的诱导表达 | 第20-21页 |
| ·亲和层析法纯化牛重组 Dpl 表达产物 | 第21-22页 |
| ·表达蛋白 Dpl 的制备 | 第21-22页 |
| ·用亲和层析纯化包涵体 | 第22页 |
| ·电洗脱牛重组 Dpl | 第22页 |
| ·Western Blot 分析重组 Dpl 的反应原性 | 第22-23页 |
| ·结果 | 第23-24页 |
| ·牛 Dpl 在大肠杆菌中表达 | 第23-24页 |
| ·重组牛成熟 Dpl 的反应原性 | 第24页 |
| ·讨论 | 第24-26页 |
| 第三章 牛成熟朊蛋白单克隆抗体的制备及鉴定 | 第26-41页 |
| ·实验材料 | 第26-27页 |
| ·细胞株和实验动物 | 第26页 |
| ·重组质粒和载体 | 第26页 |
| ·ELISA 所需试剂 | 第26-27页 |
| ·细胞培养液配制 | 第27页 |
| ·其它试剂 | 第27页 |
| ·方法 | 第27-34页 |
| ·制备免疫原 | 第28页 |
| ·重组牛 Dpl 免疫原制备 | 第28页 |
| ·pET-30a（+）空载体菌体蛋白免疫原制备 | 第28页 |
| ·动物免疫 | 第28页 |
| ·细胞融合 | 第28-29页 |
| ·培养 SP2／0 骨髓瘤细胞 | 第28页 |
| ·制备饲养细胞 | 第28-29页 |
| ·制备免疫脾细胞 | 第29页 |
| ·细胞融合 | 第29页 |
| ·检测抗体 | 第29-30页 |
| ·杂交瘤细胞的亚克隆、冻存和稳定性检测 | 第30-31页 |
| ·腹水抗体的大量制备 | 第31-32页 |
| ·纯化腹水抗体 | 第31页 |
| ·检测腹水抗体的纯度 | 第31-32页 |
| ·测定纯化腹水单抗浓度 | 第32页 |
| ·单克隆抗体的鉴定 | 第32-34页 |
| ·鉴定单克隆抗体的特异性和交叉反应 | 第32-33页 |
| ·单克隆抗体的 Ig 类与亚类鉴定 | 第33页 |
| ·单抗识别抗原表位的鉴定 | 第33-34页 |
| ·测定纯化腹水单抗效价 | 第34页 |
| ·测定单抗亲和常数 | 第34页 |
| ·腹水单抗的初步应用 | 第34页 |
| ·结果 | 第34-39页 |
| ·免疫原的表达、纯化和复性 | 第34页 |
| ·间接 ELISA 法中抗原和抗体的工作浓度 | 第34-35页 |
| ·阳性杂交瘤细胞的筛选 | 第35页 |
| ·阳性杂交瘤细胞的稳定性检测 | 第35-36页 |
| ·单抗生物学特性鉴定 | 第36-38页 |
| ·腹水抗体的纯度和浓度测定 | 第36页 |
| ·单克隆抗体的鉴定 | 第36-37页 |
| ·Ig 类及亚类的鉴定 | 第37页 |
| ·单抗识别抗原表位的初步鉴定 | 第37页 |
| ·测定纯化腹水单抗的效价和亲和常数 | 第37-38页 |
| ·腹水单抗的初步应用 | 第38-39页 |
| ·讨论 | 第39-41页 |
| 第四章 全文总结 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
| 作者简历 | 第49页 |