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紫花苜蓿Na~+/H~+逆向转运蛋白基因的分离与鉴定

中文摘要第1-9页
英文摘要第9-11页
1 引言第11-27页
   ·盐分对植物的伤害第11-12页
   ·植物的盐胁迫适应机制第12-22页
     ·细胞内的渗透调节机制第12-14页
     ·活性氧清除机制第14-16页
     ·盐胁迫下的信号传导途径第16-20页
     ·Na~+的外排和液泡区域化机制第20-22页
   ·Na~+/H~+ 逆向转运蛋白研究现状第22-25页
     ·Na~+/H~+ 逆向转运蛋白的发现及结构特点第22-23页
     ·Na~+/H~+ 逆向转运蛋白在植物耐盐中的作用第23-24页
     ·Na~+/H~+ 逆向转运蛋白基因的研究进展第24-25页
   ·本研究的目的意义第25-27页
2 材料与方法第27-55页
   ·实验材料第27-28页
     ·植物材料第27页
     ·菌株与质粒第27页
     ·PCR 引物第27-28页
     ·酶及生化试剂第28页
   ·实验方法第28-55页
     ·取材第28-29页
     ·总 RNA 的提取及检测第29-31页
     ·反转录 cDNA 第一条链的合成第31页
     ·目的基因全长cDNA 的分离第31-38页
     ·MsNHX1 在紫花苜蓿中的表达(Northern 杂交)第38-42页
     ·紫花苜蓿WL323 的Southern 杂交第42-43页
     ·表达载体的构建第43-46页
     ·农杆菌介导的拟南芥转化第46-51页
     ·转基因植株生理指标的测定第51-52页
     ·紫花苜蓿遗传转化体系的初步建立第52-55页
3 结果与分析第55-76页
   ·苜蓿液泡型 Na~+/H~+ 逆向转运蛋白基因的分离第55-57页
     ·MsNHX1 基因中间片断的分离第55页
     ·MsNHX1 基因 3′片段的分离第55-56页
     ·MsNHX1 基因 5′片段的分离第56页
     ·MsNHX1 基因的全长cDNA 克隆第56-57页
   ·MsNHX1 基因编码的氨基酸序列特征分析第57-63页
     ·MsNHX1 基因编码的氨基酸序列分析第57-60页
     ·MsNHX1 基因编码的氨基酸序列同源性分析第60-62页
     ·MsNHX1 基因表达产物的结构预测第62-63页
   ·紫花苜蓿MsNHX1 在基因组中的分析第63页
   ·MsNHX1 基因的表达分析第63-65页
   ·MsNHX1 基因的功能分析第65-71页
     ·MsNHX1 基因在拟南芥中的分子鉴定第65-66页
     ·转基因拟南芥的耐盐性分析第66-68页
     ·盐胁迫对野生型和转基因拟南芥气孔开闭的影响第68-69页
     ·盐胁迫对野生型和转基因拟南芥光合速率的影响第69-70页
     ·盐胁迫对野生型和转基因拟南芥中丙二醛含量的影响第70-71页
   ·紫花苜蓿遗传转化体系的初步建立第71-76页
     ·紫花苜蓿品种的选择第71页
     ·紫花苜蓿外植体种类的选择第71-72页
     ·愈伤组织的分类第72页
     ·再生苗的产生第72-73页
     ·抗生素浓度的探索第73-74页
     ·GUS 基因转化结果第74页
     ·MsNHX1 基因转化进展第74-76页
4 讨论第76-81页
   ·MsNHX1 基因序列特征分析第76-77页
   ·MsNHX1 在基因组中的情况及表达特征分析第77-78页
   ·MsNHX1 基因在拟南芥中的功能分析第78页
   ·紫花苜蓿遗传转化体系的初步建立第78-81页
     ·苜蓿遗传转化品种的选择第79页
     ·愈伤组织再生系统第79页
     ·愈伤组织生长状况第79-81页
5 结论第81-83页
参考文献第83-91页
附录第91-95页
致谢第95-96页
攻读学位期间论文发表情况第96-98页

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