| 中文摘要 | 第1-8页 |
| 英文摘要 | 第8-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-24页 |
| 1 百合花卉及衰老生理 | 第13-17页 |
| ·百合花卉 | 第13-14页 |
| ·乙烯与百合切花衰老的关系 | 第14-17页 |
| ·乙烯的生物合成 | 第14-15页 |
| ·乙烯与切花衰老生理 | 第15-16页 |
| ·乙烯与切花衰老化学 | 第16-17页 |
| 2 ACC氧化酶基因的研究 | 第17-20页 |
| ·ACC氧化酶及其基因的发现 | 第17-18页 |
| ·ACC氧化酶的关键限速作用 | 第18-19页 |
| ·反义导入ACC氧化酶基因的研究 | 第19-20页 |
| 3 反义RNA技术 | 第20-22页 |
| ·反义RNA的概念及其发现 | 第20页 |
| ·反义RNA的作用机理 | 第20-21页 |
| ·反义RNA技术及在植物基因工程中的应用 | 第21-22页 |
| 4 本研究的目的意义 | 第22-24页 |
| 第二章 百合ACC氧化酶基因cDNA片段的克隆 | 第24-38页 |
| 1 试验材料 | 第24页 |
| ·供试材料 | 第24页 |
| ·主要仪器 | 第24页 |
| ·主要试剂 | 第24页 |
| 2 试验方法 | 第24-28页 |
| ·百合花瓣总RNA的提取 | 第24-25页 |
| ·异硫氰酸胍法 | 第24-25页 |
| ·SDS/酚法 | 第25页 |
| ·CTAB-LiCl法 | 第25页 |
| ·改进CTAB-LiCl法 | 第25页 |
| ·百合花瓣总RNA的纯化和检测 | 第25-26页 |
| ·百合花瓣总RNA的纯化 | 第25-26页 |
| ·总RNA的检测 | 第26页 |
| ·RT-PCR | 第26-27页 |
| ·合成cDNA第一链 | 第26-27页 |
| ·ACC氧化酶基因的PCR扩增 | 第27页 |
| ·PCR产物的克隆及检测 | 第27-28页 |
| ·与克隆载体的连接反应 | 第27页 |
| ·大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备 | 第27-28页 |
| ·连接产物的转化 | 第28页 |
| ·重组质粒的筛选和鉴定 | 第28页 |
| ·测序和生物信息学分析 | 第28页 |
| 3 结果与分析 | 第28-34页 |
| ·百合总RNA的提取 | 第28-30页 |
| ·用不同方法提取总RNA的质量 | 第28-29页 |
| ·总RNA的纯度与产率 | 第29-30页 |
| ·百合总RNA的RT-PCR及特异条带的获得 | 第30页 |
| ·百合ACO基因cDNA片段的序列 | 第30-32页 |
| ·百合ACO基因片段的生物信息学分析 | 第32-34页 |
| ·序列在GenBank中的Blast同源性比较 | 第32-33页 |
| ·得到的4个序列之间的同源性分析 | 第33-34页 |
| ·其他生物信息学分析 | 第34页 |
| 4 讨论 | 第34-38页 |
| ·百合RNA的提取方法 | 第34-36页 |
| ·基因体外扩增和克隆的关键技术——引物设计 | 第36页 |
| ·百合ACC氧化酶基因cDNA片段的应用 | 第36-38页 |
| 第三章 亚洲百合ACC氧化酶基因片段反义植物表达载体的构建 | 第38-46页 |
| 1 材料与方法 | 第38-41页 |
| ·试验材料 | 第38-39页 |
| ·菌种和质粒 | 第38页 |
| ·主要试剂和仪器设备 | 第38-39页 |
| ·试验方法 | 第39-41页 |
| ·亚洲百合ACO基因片段的获得(带特异酶切位点) | 第39页 |
| ·反义表达载体的酶切连接 | 第39-41页 |
| 2 结果与分析 | 第41-44页 |
| ·亚洲百合ACO氧化酶基因片段(含特异酶切位点)克隆的获得 | 第41-42页 |
| ·亚洲百合ACO质粒和pWR306质粒的BamHⅠ/SalⅠ双酶切 | 第42-43页 |
| ·重组子的检测 | 第43-44页 |
| 3 讨论 | 第44-46页 |
| 第四章 亚洲百合隐症病毒基因片段的克隆 | 第46-53页 |
| 1 材料与方法 | 第46-47页 |
| ·实验材料 | 第46页 |
| ·供试材料 | 第46页 |
| ·主要仪器 | 第46页 |
| ·主要试剂 | 第46页 |
| ·实验方法 | 第46-47页 |
| 2 结果与分析 | 第47-50页 |
| ·特异条带的获得 | 第47-48页 |
| ·重组子鉴定结果 | 第48页 |
| ·测序结果 | 第48-49页 |
| ·生物信息学分析 | 第49-50页 |
| 3 讨论 | 第50-53页 |
| ·百合病毒病的特点 | 第50-51页 |
| ·分子生物学检测 | 第51-52页 |
| ·双链RNA(dsRNA)技术 | 第51页 |
| ·反转录聚合酶链式反应 | 第51-52页 |
| ·亚洲百合LSV基因克隆得到的可能机理 | 第52页 |
| ·亚洲百合LSV基因的利用前景 | 第52-53页 |
| 第五章 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 作者简介 | 第60页 |
