目录 | 第1-8页 |
ABBREVIATIONS | 第8-9页 |
摘要 | 第9-11页 |
ABSTRACT | 第11-13页 |
前言 | 第13-15页 |
第一章 文献综述 | 第15-25页 |
第一节 十字花科作物转基因研究进展 | 第15-22页 |
1 转化受体 | 第15-16页 |
2 转化方法 | 第16-18页 |
·载体介导转化法 | 第16-17页 |
·DNA直接导入转化 | 第17-18页 |
·种质系统介导转化法 | 第18页 |
3 目的基因 | 第18-19页 |
4 最佳转化系统及最高转化频率 | 第19-20页 |
5 无选择标记基因转化 | 第20-21页 |
6 转基因存在的问题 | 第21页 |
7 前景 | 第21-22页 |
第二节 转基因植物抗病毒机理 | 第22-25页 |
第二章 以子叶为外植体进行HC-PRO基因的转化 | 第25-39页 |
1 材料与方法: | 第25-28页 |
·试验材料 | 第25-26页 |
·植物材料 | 第25页 |
·根癌农杆菌菌株及载体 | 第25-26页 |
·试验方法 | 第26-28页 |
·子叶的组织培养再生途径 | 第26页 |
·无菌苗的获得 | 第26页 |
·外植体的获得及不定芽的诱导 | 第26页 |
·不定芽的生长及生根 | 第26页 |
·基因转化途径 | 第26-28页 |
·外植体的预培养 | 第26页 |
·工程菌液的准备及侵染 | 第26-27页 |
·农杆菌与外植体共培养 | 第27页 |
·筛选、分化及生根 | 第27页 |
·培养基配制及培养条件 | 第27-28页 |
·数据的处理 | 第28页 |
2 结果与分析 | 第28-34页 |
·不定芽的诱导 | 第28-29页 |
·除草剂对子叶分化及苗生长的影响 | 第29-30页 |
·农杆菌对子叶的影响 | 第30-32页 |
·抗生素对子叶分化的影响 | 第32页 |
·转化条件对转化效率的影响 | 第32-33页 |
·转化频率 | 第33-34页 |
3 讨论 | 第34-37页 |
·除草剂(BASTA)对不定芽的影响 | 第34-36页 |
·抗生素对子叶的影响 | 第36页 |
·农杆菌浓度对转化效率的影响 | 第36-37页 |
·预培养及共培养对转化效率的影响 | 第37页 |
4 小结 | 第37-39页 |
第三章 以愈伤组织为外植体进行HC-PRO基因的转化 | 第39-51页 |
1 材料与方法 | 第39-42页 |
·试验材料 | 第39-40页 |
·植物材料 | 第39页 |
·根癌农杆菌菌株及载体 | 第39-40页 |
·试验方法 | 第40-42页 |
·愈伤组织的诱导 | 第40页 |
·无菌苗的获得 | 第40页 |
·愈伤组织的诱导 | 第40页 |
·愈伤组织的分化 | 第40页 |
·基因转化途径 | 第40-41页 |
·外植体的准备 | 第40页 |
·工程菌液的准备及侵染 | 第40-41页 |
·农杆菌与外植体共培养 | 第41页 |
·筛选、分化及生根 | 第41页 |
·转化植株的遗传多样性分析(RAPD分析) | 第41-42页 |
2 结果及分析 | 第42-48页 |
·子叶诱导愈伤组织生长曲线的获得 | 第42-43页 |
·除草剂对愈伤组织的影响 | 第43页 |
·抗生素对愈伤组织分化的影响 | 第43-44页 |
·工程菌液的准备及转化 | 第44-45页 |
·转化条件对转化效率的影响 | 第45-48页 |
·转化效率 | 第48页 |
·转化植株的遗传多样性 | 第48页 |
3 讨论 | 第48-51页 |
第四章 转化植株的鉴定及其病毒抗性研究 | 第51-58页 |
1 转化植株的分子生物学鉴定 | 第51-55页 |
·材料与方法 | 第51-54页 |
·试验材料 | 第51页 |
·方法 | 第51-54页 |
·PCR检测 | 第51-52页 |
·DNA的快速微量提取 | 第51-52页 |
·PCR检测方法 | 第52页 |
·反应体系 | 第52页 |
·Southern杂交检测 | 第52-54页 |
·DNA提取方法 | 第52页 |
·杂交方法 | 第52-54页 |
·限制性内切酶酶切茎瘤芥总DNA | 第53页 |
·Southern转印 | 第53页 |
·探针的制备 | 第53-54页 |
·预杂交、杂交 | 第54页 |
·洗膜及放射性自显影 | 第54页 |
·结果与分析 | 第54-55页 |
·PCR检测 | 第54-55页 |
·Southern杂交检测 | 第55页 |
2 转化植株的田间接种鉴定及ELASA分析 | 第55-56页 |
·材料与方法 | 第55-56页 |
·材料 | 第55页 |
·方法 | 第55-56页 |
·病毒接种 | 第55页 |
·ELASA检测 | 第55-56页 |
·结果及分析 | 第56页 |
3 讨论 | 第56-58页 |
参考文献 | 第58-67页 |
附图 1:基因转化流程 | 第67-68页 |
附图 2:子叶再生及转化途径 | 第68-69页 |
附图 3:愈伤组织再生途径 | 第69页 |