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甘菊ALDH超家族基因分离及DIBADH基因对切花菊的转化

摘要第1-5页
Abstract第5-11页
中英文对照表第11-12页
1 绪论第12-22页
   ·菊花与非生物胁迫相关的表型第12-13页
     ·胁迫损伤后的表型变化第12-13页
     ·抗逆性较强的菊花品种的形态特征第13页
   ·菊花对非生物胁迫的生理响应第13-16页
     ·逆境造成的损伤第13-14页
       ·膜系统损伤第13-14页
       ·光合作用损伤第14页
       ·其他损伤表现第14页
     ·菊花对逆境的抵御第14-16页
       ·保护酶活性第15页
       ·渗透调节物质第15-16页
   ·菊花及其近缘种响应非生物胁迫的分子机制第16-17页
   ·植物中与非生物胁迫相关的ALDH超家族第17-19页
   ·提高菊花抗逆性的途径第19-20页
   ·本研究的设计思想第20-21页
     ·研究的目的和意义第20页
     ·研究内容第20-21页
   ·本研究的技术路线第21-22页
2 甘菊ALDH超家族相关基因的分离与筛选第22-38页
   ·甘菊ALDHs关键成员的分离与表达分析第22-32页
     ·材料与方法第22-24页
       ·植物材料第22页
       ·试验方法第22-24页
     ·结果与分析第24-30页
       ·甘菊ALDH各家族与不同生物间的比较第24-25页
       ·全长序列的获得第25-26页
       ·保守结构域分析第26-27页
       ·系统进化分析第27-29页
       ·不同胁迫和诱导条件下的ALDHs表达分析第29-30页
       ·不同器官中的ALDHs表达分析第30页
     ·小结与讨论第30-32页
       ·甘菊ALDH超家族的特点第30-31页
       ·甘菊ALDHs在非生物胁迫下的表达模式第31-32页
   ·甘菊甜菜碱合成通路表达分析第32-38页
     ·材料与方法第32-33页
       ·植物材料和处理第32页
       ·试验方法第32-33页
     ·结果与分析第33-36页
       ·ClCMO基因全长cDNA扩增第33-34页
       ·ClCMO蛋白的系统进化关系分析第34-35页
       ·ClCMO和DlBADH在甘菊不同器官中的表达第35页
       ·ClCMO和DlBADH在胁迫和激素处理下的表达分析第35-36页
     ·小结与讨论第36-38页
       ·甘菊甜菜碱合成通路的表达特征第36-37页
       ·ClCMO和DlBADH是ABA非依赖型基因第37页
       ·DlBADH基因是甘菊响应盐诱导的关键基因第37-38页
3 切花菊3个新品种再生体系的建立第38-51页
   ·材料与方法第38-41页
     ·试验材料第38页
     ·试验方法第38-41页
       ·试验设计与流程第38-41页
       ·培养条件第41页
       ·试验试剂第41页
     ·数据分析方法第41页
   ·结果与分析第41-49页
     ·‘雪山’再生体系第41-44页
       ·愈伤组织诱导、分化、丛生芽增殖试验结果第41-42页
       ·带芽茎段扩繁结果第42-43页
       ·生根试验结果第43-44页
     ·‘雪神’再生体系第44-46页
       ·外植体的筛选第44页
       ·愈伤组织分化结果第44-45页
       ·生根试验结果第45-46页
     ·‘粉贵人’再生体系第46-49页
       ·愈伤组织诱导、分化及丛生芽的扩繁第46-47页
       ·带芽茎段扩繁结果第47-48页
       ·生根试验结果第48-49页
   ·小结与讨论第49-51页
     ·小结第49页
     ·菊花组织培养具有品种特异性第49页
     ·不同外植体再生能力有差异第49-50页
     ·植物组织培养的试验设计方法比较第50-51页
4 甘菊BADH基因对切花菊‘雪山’的遗传转化第51-69页
   ·材料与方法第51-59页
     ·试验材料第51页
       ·植物材料第51页
       ·载体与菌种第51页
       ·相关试剂第51页
     ·植物表达载体构建方法第51-56页
       ·酶切位点的选择和引物设计第51-52页
       ·RNA提取及反转录第52页
       ·DlBADH基因全长的获得第52-53页
       ·中间载体构建第53-54页
       ·表达载体构建第54-55页
       ·表达载体鉴定第55页
       ·农杆菌感受态细胞制备第55页
       ·表达载体转化农杆菌感受态第55-56页
       ·农杆菌转化菌体鉴定第56页
       ·菌液的保存第56页
     ·遗传转化体系建立方法第56-58页
       ·转化条件的确定第56-57页
       ·预培养第57页
       ·侵染第57-58页
       ·共培养第58页
       ·延迟培养第58页
       ·分化培养第58页
     ·再生苗的分离与鉴定第58-59页
       ·再生苗的分离第58页
       ·生根筛选第58-59页
       ·基因组DNA提取第59页
       ·PCR鉴定第59页
   ·结果与分析第59-67页
     ·pBI121-BADH植物表达载体构建第59-62页
       ·DlBADH基因全长的扩增第59页
       ·中间表达载体构建第59-60页
       ·表达载体构建第60-61页
       ·农杆菌菌液PCR鉴定第61-62页
     ·侵染条件筛选第62-63页
     ·再生培养基筛选第63-64页
     ·再生株系的获得第64-65页
     ·生根选择压第65页
     ·再生苗的鉴定第65-67页
   ·小结与讨论第67-69页
     ·菊花转基因效果的影响因素第67-68页
       ·不同培养基配方影响转化效果第67页
       ·预培养和延迟培养影响转化效果第67-68页
     ·菊花转基因研究的难点第68-69页
5 结论第69-71页
参考文献第71-80页
附图第80-84页
个人简介第84-85页
导师简介第85-86页
获得成果目录第86-87页
致谢第87页

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