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美洲商陆抗病毒蛋白基因的表达和遗传转化的研究

第一章 前言第1-20页
 1 美洲商陆抗病毒蛋白研究进展第9-12页
   ·PAP的来源及种类第10页
   ·PAP的理化性质第10页
   ·PAP的抗病毒活性第10-11页
   ·PAP的作用机理第11-12页
   ·PAP基因的研究第12页
 2 巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)表达系统研究进展第12-15页
   ·巴斯德毕赤酵母生物学特性第13页
   ·巴斯德毕赤酵母表达系统的优点第13-14页
   ·巴斯德毕赤酵母表达载体与受体菌第14页
   ·外源基因在毕赤酵母中表达的研究第14-15页
 3 花卉基因工程研究进展第15-18页
   ·花色基因工程研究第16页
   ·花形基因工程研究第16-17页
   ·花香味基因工程研究第17页
   ·花卉抗性基因工程研究第17-18页
 4 矮牵牛遗传转化的研究概况第18页
 5 本研究的目的与意义第18-20页
第二章 毕赤酵母工程菌摇瓶发酵条件的优化第20-37页
 1 材料第20-21页
   ·主要仪器设备第20页
   ·主要试剂第20页
   ·菌株和培养基第20-21页
 2 方法第21-24页
   ·PCR鉴定阳性转化子第21-22页
   ·酵母细胞光密度分析第22页
   ·重组毕赤酵母摇瓶发酵条件的研究第22-23页
   ·SDS-PAGE电泳和Western-blotting分析发酵产物第23页
   ·表达产物抗病毒活性的检测第23-24页
 3 结果与分析第24-35页
   ·Mut~+转化子的PCR鉴定第24页
   ·Mut~-转化子的显微观察第24-25页
   ·摇瓶水平各Mut~+转化子PAP的表达第25页
   ·Mut~+转化子遗传稳定性检测第25页
   ·Mut~+转化子摇瓶发酵培养条件的研究第25-32页
   ·重组毕赤酵母工程菌的发酵条件优化第32-33页
   ·产物PAP抗病毒活性检测第33-35页
 4 讨论第35-36页
 5 结论第36-37页
第三章 矮牵牛遗传转化的研究第37-47页
 1 材料第37-38页
   ·主要仪器设备第37页
   ·主要试剂第37页
   ·材料第37页
   ·培养基和试剂第37-38页
 2 方法第38-42页
   ·大肠杆菌感受态的制备和转化第38页
   ·碱法少量提取质粒DNA第38页
   ·双酶切和PCR鉴定重组表达载体pBI121-1第38-39页
   ·土壤农杆菌感受态的制备和转化第39-40页
   ·PCR检测农杆菌转化子第40页
   ·农杆菌菌液的制备第40页
   ·转化矮牵牛第40页
   ·转基因矮牵牛的检测第40-42页
 3 结果与分析第42-46页
   ·植物重组表达载体pBI121-1的检测第42-43页
   ·转化农杆菌的鉴定第43页
   ·转化体系的建立及优化第43-44页
   ·矮牵牛的转化第44-45页
   ·PCR检测转基因矮牵牛第45-46页
 4 讨论与结论第46-47页
参考文献第47-54页
缩略语第54-55页
致谢第55-56页
作者简历第56页

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