第一章 前言 | 第1-20页 |
1 美洲商陆抗病毒蛋白研究进展 | 第9-12页 |
·PAP的来源及种类 | 第10页 |
·PAP的理化性质 | 第10页 |
·PAP的抗病毒活性 | 第10-11页 |
·PAP的作用机理 | 第11-12页 |
·PAP基因的研究 | 第12页 |
2 巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)表达系统研究进展 | 第12-15页 |
·巴斯德毕赤酵母生物学特性 | 第13页 |
·巴斯德毕赤酵母表达系统的优点 | 第13-14页 |
·巴斯德毕赤酵母表达载体与受体菌 | 第14页 |
·外源基因在毕赤酵母中表达的研究 | 第14-15页 |
3 花卉基因工程研究进展 | 第15-18页 |
·花色基因工程研究 | 第16页 |
·花形基因工程研究 | 第16-17页 |
·花香味基因工程研究 | 第17页 |
·花卉抗性基因工程研究 | 第17-18页 |
4 矮牵牛遗传转化的研究概况 | 第18页 |
5 本研究的目的与意义 | 第18-20页 |
第二章 毕赤酵母工程菌摇瓶发酵条件的优化 | 第20-37页 |
1 材料 | 第20-21页 |
·主要仪器设备 | 第20页 |
·主要试剂 | 第20页 |
·菌株和培养基 | 第20-21页 |
2 方法 | 第21-24页 |
·PCR鉴定阳性转化子 | 第21-22页 |
·酵母细胞光密度分析 | 第22页 |
·重组毕赤酵母摇瓶发酵条件的研究 | 第22-23页 |
·SDS-PAGE电泳和Western-blotting分析发酵产物 | 第23页 |
·表达产物抗病毒活性的检测 | 第23-24页 |
3 结果与分析 | 第24-35页 |
·Mut~+转化子的PCR鉴定 | 第24页 |
·Mut~-转化子的显微观察 | 第24-25页 |
·摇瓶水平各Mut~+转化子PAP的表达 | 第25页 |
·Mut~+转化子遗传稳定性检测 | 第25页 |
·Mut~+转化子摇瓶发酵培养条件的研究 | 第25-32页 |
·重组毕赤酵母工程菌的发酵条件优化 | 第32-33页 |
·产物PAP抗病毒活性检测 | 第33-35页 |
4 讨论 | 第35-36页 |
5 结论 | 第36-37页 |
第三章 矮牵牛遗传转化的研究 | 第37-47页 |
1 材料 | 第37-38页 |
·主要仪器设备 | 第37页 |
·主要试剂 | 第37页 |
·材料 | 第37页 |
·培养基和试剂 | 第37-38页 |
2 方法 | 第38-42页 |
·大肠杆菌感受态的制备和转化 | 第38页 |
·碱法少量提取质粒DNA | 第38页 |
·双酶切和PCR鉴定重组表达载体pBI121-1 | 第38-39页 |
·土壤农杆菌感受态的制备和转化 | 第39-40页 |
·PCR检测农杆菌转化子 | 第40页 |
·农杆菌菌液的制备 | 第40页 |
·转化矮牵牛 | 第40页 |
·转基因矮牵牛的检测 | 第40-42页 |
3 结果与分析 | 第42-46页 |
·植物重组表达载体pBI121-1的检测 | 第42-43页 |
·转化农杆菌的鉴定 | 第43页 |
·转化体系的建立及优化 | 第43-44页 |
·矮牵牛的转化 | 第44-45页 |
·PCR检测转基因矮牵牛 | 第45-46页 |
4 讨论与结论 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-54页 |
缩略语 | 第54-55页 |
致谢 | 第55-56页 |
作者简历 | 第56页 |