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荧光假单胞菌遗传标记及工程菌生物安全性评价

1 引言第1-16页
   ·荧光假单胞菌及其工程菌的应用第8-9页
     ·荧光假单胞菌在农业方面的应用第8-9页
     ·荧光假单胞菌遗传改良第9页
   ·遗传重组微生物(Genetically modified microorganisim,GMM)的安全性研究第9-14页
     ·基于培养的监测方法第10-12页
     ·免培养检测方法第12-13页
     ·荧光假单胞菌工程菌的检测第13-14页
   ·本研究的目的意义第14-16页
2 材料与方法第16-28页
   ·供试材料及仪器第16-20页
     ·供试材料、培养基与抗生素:第16-18页
     ·供试作物和昆虫第18页
     ·试剂和溶液第18-19页
     ·仪器设备第19-20页
   ·研究方法第20-28页
     ·P303的遗传标记第20-21页
     ·PCR检测第21-22页
     ·Southern印迹分析第22-23页
     ·SDS-PAGE检测第23页
     ·生长曲线和稳定性测定第23页
     ·荧光假单胞菌及其工程菌生存竞争能力检测第23-24页
     ·荧光假单胞菌及其工程菌生物安全性的分子生物学检测第24-28页
3 实验结果第28-43页
   ·荧光假单胞菌的遗传标记第28-32页
     ·绿色荧光蛋白基因gfpmut3标记P303第28页
     ·绿色荧光蛋白基因gfpmut1标记P303第28-30页
     ·P303m1和P303m3菌体形态观察第30页
     ·PCR检测结果第30-31页
     ·Southern印迹分析第31页
     ·SDS-PAGE第31-32页
     ·生长曲线及稳定性测定第32页
   ·荧光假单胞菌工程菌生物学活性及其安全性评价第32-39页
     ·工程菌株BioP8的构建及杀虫活性测定第32-33页
     ·室内平板抑菌试验结果第33-34页
     ·温室自然土壤中的消长动态第34-35页
     ·田间大白菜根际的消长动态第35-36页
     ·大白菜叶面的消长动态第36-38页
     ·工程菌中重组质粒扩散第38页
     ·工程菌BioP8的鉴定第38-39页
   ·荧光假单胞菌生物安全性的分子生态学检测第39-43页
     ·土壤微生物总DNA的提取第39页
     ·细菌16S rDNA PCR扩增第39-40页
     ·变性梯度凝胶电泳(DGGE)第40-43页
4 讨论第43-46页
   ·GFP及其特点第43-44页
   ·BioP8定殖能力,应用前景第44页
   ·土壤总DNA的提取纯化第44-45页
   ·DGGE技术第45页
   ·安全性评价的研究现状第45-46页
5 结论第46-47页
参考文献第47-55页
发表学术论文第55-62页
作者简历第62-63页
致谢第63页

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