第一章 文献综述 | 第1-38页 |
·引言 | 第14页 |
·油菜菌核病致病机理 | 第14-17页 |
·病菌的侵染过程 | 第14-15页 |
·生理生化机制 | 第15-17页 |
·寄主的抗病机理 | 第17-20页 |
·避病 | 第17页 |
·形态结构的抗病性 | 第17-18页 |
·油菜抗病的组织病理学及生理生化 | 第18-19页 |
·对草酸的耐性 | 第19-20页 |
·抗性遗传和抗病育种途径 | 第20-24页 |
·油菜抗菌核病抗源筛选现状 | 第20-21页 |
·抗性遗传 | 第21页 |
·抗病育种途径 | 第21-24页 |
·抗真菌病害植物基因工程研究进展 | 第24-37页 |
·水解酶 | 第26-27页 |
·病程相关蛋白 | 第27页 |
·抗菌蛋白、肽和其它化合物 | 第27-28页 |
·植物保卫素 | 第28页 |
·抑制病原菌毒性产物 | 第28-29页 |
·结构成分的改变 | 第29-30页 |
·植物防御系统的活化 | 第30-31页 |
·抗性基因 | 第31-37页 |
·本研究的目的意义 | 第37-38页 |
第二章 材料和方法 | 第38-50页 |
·材料 | 第38-40页 |
·植物材料 | 第38页 |
·根癌农杆菌及其质粒 | 第38页 |
·培养基 | 第38-39页 |
·生化试剂 | 第39-40页 |
·仪器 | 第40页 |
·烟草转化植株的获得 | 第40-41页 |
·转化受体的获取 | 第40-41页 |
·烟草耐卡那霉素水平的筛选 | 第41页 |
·确定转化系统中适宜培养基 | 第41页 |
·农杆菌感染与共培 | 第41页 |
·转化子的筛选与植株再生 | 第41页 |
·油菜转化植株的获得 | 第41-43页 |
·无菌苗体系的建立 | 第41页 |
·油菜下胚轴高效再生系统的建立 | 第41-42页 |
·根癌农杆菌介导转化 | 第42-43页 |
·转基因植株的分子检测 | 第43-49页 |
·CTAB 法提取植物总 DNA | 第43-44页 |
·质粒的提取 | 第44-45页 |
·再生苗的 PCR 检测 | 第45-46页 |
·特异扩增 DNA 片段的克隆与测序 | 第46-49页 |
·特异扩增片段的序列分析 | 第49页 |
·转化植株对草酸的耐受性 | 第49-50页 |
第三章 结果与分析 | 第50-68页 |
·烟草转化植株的获得 | 第50-51页 |
·烟草种子无菌发芽及子叶再生 | 第50页 |
·Km 浓度的选择 | 第50页 |
·转化系统中适宜培养基的确定 | 第50-51页 |
·转化子的筛选与植株再生 | 第51页 |
·油菜转化植株的获得 | 第51-55页 |
·无菌苗的获得及外植体的选择 | 第51页 |
·不同浓度激素(6-BA,NAA)配比对下胚轴分化频率的影响 | 第51-52页 |
·不同时期的下胚轴材料对芽分化率的影响 | 第52页 |
·AgNO3对外植体芽再生的影响 | 第52-53页 |
·不同浓度 Km 对下胚轴外植体芽再生的影响 | 第53页 |
·不同抗生素对芽分化的影响 | 第53-54页 |
·预培养对芽苗分化的影响 | 第54页 |
·Cb 对农杆菌的抑制效应和对转化细胞再生的影响 | 第54-55页 |
·生根培养基中激素、抗生素的选择 | 第55页 |
·油菜转化再生系统中最适培养基的确定 | 第55页 |
·转化子的筛选与植株再生 | 第55页 |
·转基因植株的 PCR 检测 | 第55-57页 |
·转化烟草的 PCR 检测结果 | 第55-56页 |
·转化油菜的 PCR 检测结果 | 第56-57页 |
·特异扩增 DNA 片段的克隆结果 | 第57-58页 |
·特异扩增 DNA 片段重组克隆的获得 | 第57页 |
·重组质粒的酶切和 PCR 鉴定 | 第57-58页 |
·PCR 产物的测序结果及比较 | 第58-66页 |
·转化烟草特异扩增片段测序结果及分析 | 第58-62页 |
·转化油菜特异扩增片段测序结果及分析 | 第62-66页 |
·对草酸耐性的表现结果 | 第66-68页 |
·转化烟草植株对草酸的耐性 | 第66页 |
·转化油菜植株对草酸的耐性 | 第66-68页 |
第四章 讨论 | 第68-82页 |
·根癌农杆菌介导油菜基因转化方法及关键因子研究 | 第68-73页 |
·不同的植物基因型对转化的影响 | 第68页 |
·外植体对转化的影响 | 第68-69页 |
·外植体生理状态及其培养条件对转化效率的影响 | 第69-70页 |
·农杆菌侵染方法 | 第70-71页 |
·预培养 | 第71页 |
·AgNO3对下胚轴芽再生的作用 | 第71-72页 |
·筛选方法 | 第72-73页 |
·外源基因在转化植株的表达和遗传 | 第73页 |
·植物基因转化受体系统建立中常遇的问题 | 第73-77页 |
·试管苗的玻璃化现象 | 第74-75页 |
·培养物的褐化 | 第75-76页 |
·试管苗的移栽成活率 | 第76-77页 |
·油菜基因转化存在的问题 | 第77页 |
·转基因农业的困惑 | 第77-79页 |
·转基因植物对环境安全的影响 | 第78页 |
·转基因植物对生态的影响 | 第78-79页 |
·转基因植物对食品安全的影响 | 第79页 |
·我国转基因育种的发展与存在的问题 | 第79-80页 |
·展望 | 第80-82页 |
第五章 结论 | 第82-84页 |
参考文献 | 第84-96页 |
附表:M63223. Wheat germin 9f-2.8[gi:170697] | 第96-98页 |
附图 | 第98-100页 |
致谢 | 第100-101页 |