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草酸氧化酶基因转化烟草和油菜的研究

第一章 文献综述第1-38页
   ·引言第14页
   ·油菜菌核病致病机理第14-17页
     ·病菌的侵染过程第14-15页
     ·生理生化机制第15-17页
   ·寄主的抗病机理第17-20页
     ·避病第17页
     ·形态结构的抗病性第17-18页
     ·油菜抗病的组织病理学及生理生化第18-19页
     ·对草酸的耐性第19-20页
   ·抗性遗传和抗病育种途径第20-24页
     ·油菜抗菌核病抗源筛选现状第20-21页
     ·抗性遗传第21页
     ·抗病育种途径第21-24页
   ·抗真菌病害植物基因工程研究进展第24-37页
     ·水解酶第26-27页
     ·病程相关蛋白第27页
     ·抗菌蛋白、肽和其它化合物第27-28页
     ·植物保卫素第28页
     ·抑制病原菌毒性产物第28-29页
     ·结构成分的改变第29-30页
     ·植物防御系统的活化第30-31页
     ·抗性基因第31-37页
   ·本研究的目的意义第37-38页
第二章 材料和方法第38-50页
   ·材料第38-40页
     ·植物材料第38页
     ·根癌农杆菌及其质粒第38页
     ·培养基第38-39页
     ·生化试剂第39-40页
     ·仪器第40页
   ·烟草转化植株的获得第40-41页
     ·转化受体的获取第40-41页
     ·烟草耐卡那霉素水平的筛选第41页
     ·确定转化系统中适宜培养基第41页
     ·农杆菌感染与共培第41页
     ·转化子的筛选与植株再生第41页
   ·油菜转化植株的获得第41-43页
     ·无菌苗体系的建立第41页
     ·油菜下胚轴高效再生系统的建立第41-42页
     ·根癌农杆菌介导转化第42-43页
   ·转基因植株的分子检测第43-49页
     ·CTAB 法提取植物总 DNA第43-44页
     ·质粒的提取第44-45页
     ·再生苗的 PCR 检测第45-46页
     ·特异扩增 DNA 片段的克隆与测序第46-49页
     ·特异扩增片段的序列分析第49页
   ·转化植株对草酸的耐受性第49-50页
第三章 结果与分析第50-68页
   ·烟草转化植株的获得第50-51页
     ·烟草种子无菌发芽及子叶再生第50页
     ·Km 浓度的选择第50页
     ·转化系统中适宜培养基的确定第50-51页
     ·转化子的筛选与植株再生第51页
   ·油菜转化植株的获得第51-55页
     ·无菌苗的获得及外植体的选择第51页
     ·不同浓度激素(6-BA,NAA)配比对下胚轴分化频率的影响第51-52页
     ·不同时期的下胚轴材料对芽分化率的影响第52页
     ·AgNO3对外植体芽再生的影响第52-53页
     ·不同浓度 Km 对下胚轴外植体芽再生的影响第53页
     ·不同抗生素对芽分化的影响第53-54页
     ·预培养对芽苗分化的影响第54页
     ·Cb 对农杆菌的抑制效应和对转化细胞再生的影响第54-55页
     ·生根培养基中激素、抗生素的选择第55页
     ·油菜转化再生系统中最适培养基的确定第55页
     ·转化子的筛选与植株再生第55页
   ·转基因植株的 PCR 检测第55-57页
     ·转化烟草的 PCR 检测结果第55-56页
     ·转化油菜的 PCR 检测结果第56-57页
   ·特异扩增 DNA 片段的克隆结果第57-58页
     ·特异扩增 DNA 片段重组克隆的获得第57页
     ·重组质粒的酶切和 PCR 鉴定第57-58页
   ·PCR 产物的测序结果及比较第58-66页
     ·转化烟草特异扩增片段测序结果及分析第58-62页
     ·转化油菜特异扩增片段测序结果及分析第62-66页
   ·对草酸耐性的表现结果第66-68页
     ·转化烟草植株对草酸的耐性第66页
     ·转化油菜植株对草酸的耐性第66-68页
第四章 讨论第68-82页
   ·根癌农杆菌介导油菜基因转化方法及关键因子研究第68-73页
     ·不同的植物基因型对转化的影响第68页
     ·外植体对转化的影响第68-69页
     ·外植体生理状态及其培养条件对转化效率的影响第69-70页
     ·农杆菌侵染方法第70-71页
     ·预培养第71页
     ·AgNO3对下胚轴芽再生的作用第71-72页
     ·筛选方法第72-73页
   ·外源基因在转化植株的表达和遗传第73页
   ·植物基因转化受体系统建立中常遇的问题第73-77页
     ·试管苗的玻璃化现象第74-75页
     ·培养物的褐化第75-76页
     ·试管苗的移栽成活率第76-77页
   ·油菜基因转化存在的问题第77页
   ·转基因农业的困惑第77-79页
     ·转基因植物对环境安全的影响第78页
     ·转基因植物对生态的影响第78-79页
     ·转基因植物对食品安全的影响第79页
   ·我国转基因育种的发展与存在的问题第79-80页
   ·展望第80-82页
第五章 结论第82-84页
参考文献第84-96页
附表:M63223. Wheat germin 9f-2.8[gi:170697]第96-98页
附图第98-100页
致谢第100-101页

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