| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| Ⅰ 文献综述 | 第9-25页 |
| 1 水稻遗传转化的研究进展 | 第9-13页 |
| ·水稻遗传转化的研究简史 | 第9-10页 |
| ·水稻遗传转化方法的研究 | 第10-13页 |
| 2 根癌农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第13-20页 |
| ·根癌农杆菌介导转化水稻的简要发展历程 | 第13-14页 |
| ·根癌农杆菌Ti质粒转化的基本程序 | 第14-15页 |
| ·根癌农杆菌介导遗传转化的原理 | 第15页 |
| ·根癌农杆菌介导转化水稻的优点 | 第15-16页 |
| ·根癌农杆菌介导转化水稻的影响因素 | 第16-17页 |
| ·根癌农杆菌介导遗传转化在水稻基因工程育种中的应用进展 | 第17-20页 |
| 3 直链淀粉与稻米品质的改良 | 第20-21页 |
| 4 反义waxy基因改良稻米淀粉品质 | 第21-24页 |
| ·反义调控策略在转基因操作中的应用 | 第21-23页 |
| ·反义waxy基因改良稻米淀粉品质 | 第23-24页 |
| 5 本研究的目的和意义 | 第24-25页 |
| Ⅱ 材料与方法 | 第25-36页 |
| 1 实验材料 | 第25-26页 |
| ·受体材料 | 第25页 |
| ·菌株和质粒 | 第25-26页 |
| 2 主要实验仪器和试剂 | 第26页 |
| 3 水稻转化所用的培养基 | 第26-28页 |
| ·细菌培养基 | 第26-27页 |
| ·愈伤组织培养基 | 第27-28页 |
| 4 实验方法 | 第28-36页 |
| ·水稻遗传转化体系的建立 | 第28-29页 |
| ·不同外植体的诱导、继代培养 | 第28页 |
| ·幼胚的低温处理对出愈率的影响 | 第28页 |
| ·最佳侵染时间的确定 | 第28页 |
| ·最佳共培养时间的确定 | 第28页 |
| ·共培养温度的选择 | 第28-29页 |
| ·最佳农杆菌侵染浓度的确定 | 第29页 |
| ·不同的农杆菌稀释液对愈伤组织的影响 | 第29页 |
| ·愈伤组织生理状态与农杆菌侵染 | 第29页 |
| ·潮霉素敏感性试验 | 第29页 |
| ·水稻再生体系的优化 | 第29-30页 |
| ·外植体和培养基的选择 | 第29页 |
| ·筛选模式对再生率的影响 | 第29-30页 |
| ·转基因植株的分子鉴定 | 第30-34页 |
| ·抗性植株的DNA的提取 | 第30-31页 |
| ·农杆菌质粒的小量提取及鉴定(碱法) | 第31-32页 |
| ·PCR扩增 | 第32-33页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第33-34页 |
| ·转基因植株后代的遗传分析 | 第34-36页 |
| ·转基因植株T_0代自交种的潮霉素发芽试验 | 第34页 |
| ·水稻成熟种子胚乳直链淀粉含量的测定 | 第34-36页 |
| Ⅲ 结果与分析 | 第36-47页 |
| 1 水稻遗传转化体系的建立 | 第36-42页 |
| ·不同外植体的诱导、继代培养 | 第36-37页 |
| ·幼胚的低温处理对出愈率的影响 | 第37-38页 |
| ·最佳浸染时间的确定 | 第38-39页 |
| ·最佳共培养时间的确定 | 第39页 |
| ·最佳农杆菌浸染浓度的确定 | 第39-40页 |
| ·不同的农杆菌稀释液对愈伤组织的影响 | 第40-41页 |
| ·愈伤组织生理状态对根癌农杆菌侵染的影响 | 第41页 |
| ·潮霉素(Hyg)选择压的确定 | 第41-42页 |
| 2 再生体系的优化 | 第42-43页 |
| ·外植体和培养基的选择 | 第42-43页 |
| ·筛选模式对再生率的影响 | 第43页 |
| 3 转基因植株的获得 | 第43-44页 |
| 4 转基因植株的PCR检测 | 第44-45页 |
| ·转基因植株中潮霉素抗性基因的PCR分析 | 第44-45页 |
| ·转基因植株反义waxy-GUS融合基因的PCR分析 | 第45页 |
| 5 转基因水稻后代的潮霉素抗性试验及遗传分析 | 第45-46页 |
| 6 转基因植株种子直链淀粉含量的测定 | 第46-47页 |
| Ⅳ 讨论 | 第47-50页 |
| 1 水稻遗传转化与再生系统的完善 | 第47-48页 |
| ·外植体的选择 | 第47页 |
| ·外植体的接种与农杆菌的共培养 | 第47页 |
| ·外植体的脱菌及选择培养 | 第47页 |
| ·试管苗的移栽 | 第47-48页 |
| 2 转化受体的外源基因在转基因后代中的遗传表达行为 | 第48页 |
| 3 反义RNA技术改良稻米品质的可行性 | 第48-50页 |
| Ⅴ 参考文献 | 第50-56页 |
| Ⅵ 图版 | 第56-58页 |
| 致谢 | 第58页 |
