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扩展青霉碱性脂肪酶基因的表达及分子突变

内容提要第1-3页
英文摘要第3-8页
序言第8-10页
第一部分 文献综述第10-30页
 脂肪酶蛋白质工程研究进展第10-30页
  1. 活性位点(ACTIVE SITE)与活性(ACTIVITY)研究第11-14页
  2. 专一性(SPECIFICITY)研究第14-21页
  3. 稳定性(STABILITY)研究第21-23页
  4. 盖(LID)功能研究第23-26页
  5. 表达研究第26-27页
  6. 钙结合位点研究第27页
  7. 增加洗涤效果和表面活性剂抗性研究第27-30页
第二部分 材料与方法第30-43页
 1. 材料第30-32页
 2. 实验方法第32-43页
  2.1 PEL基因在巴斯德毕赤酵母中的表达第32-38页
  2.2 PEL-P163A定点突变第38-40页
  2.3 PEL-D92L定点突变第40-41页
  2.4 PEL的随机诱变第41-43页
第三部分 结果与分析第43-64页
 1. PEL基因在巴斯德毕赤酵母中的表达第43-49页
  1.1 表达质粒pPIC3.5K-PEL的构建第43-44页
  1.2 重组酵母菌GS-pPIC3.5K-PEL筛选第44页
  1.3 表达产物PEL-GS的鉴定第44-46页
  1.4 PEL-GS发酵条件优化第46-49页
 2. PEL-P163A定点突变第49-56页
  2.1 突变点的选择第49-50页
  2.2 突变基因P163A的获得第50-52页
  2.3 突变基因在巴斯德毕赤酵母GS115中的表达第52-53页
  2.4 PEL-P163A-GS最适反应温度和热稳定性的研究第53-55页
  2.5 PEL-P163A-GS发酵条件的优化第55-56页
  2.6 突变基因在巴斯德毕赤酵母SMD1168中的表达第56页
 3. PEI-D92L定点突变第56-60页
  3.1 突变点的选择第56-57页
  3.2 突变基因D92L的获得第57-58页
  3.3 突变基因在巴斯德毕赤酵母GS115中的表达第58-59页
  3.4 PEL-D92L-GS最适反应温度和热稳定性的研究第59-60页
 4. PEL的随机诱变第60-64页
  4.1 易错PCR(ERROR PRONE PCR)第60-61页
  4.2 突变体的筛选第61-62页
  4.3 突变体最适反应温度和热稳定性的研究第62-64页
第四部分 小结与讨论第64-68页
参考文献第68-79页
中文摘要第79-82页
附录 在学期间发表和完成的论文第82-83页
致谢第83页

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