| 中文摘要 | 第1-11页 |
| 英文摘要 | 第11-13页 |
| 1 前言 | 第13-44页 |
| 1．1 研究目的与意义 | 第13-14页 |
| 1．2 小麦贮藏蛋白研究进展 | 第14-24页 |
| 1．2．1 小麦种子贮藏蛋白组成和分类 | 第14-16页 |
| 1．2．2 小麦胚乳贮藏蛋白组分遗传研究 | 第16-19页 |
| 1．2．3 小麦胚乳贮藏蛋白特性 | 第19-21页 |
| 1．2．4 小麦种子贮藏蛋白与加工品质关系 | 第21-24页 |
| 1．3 小麦胚乳贮藏蛋白分子生物学研究 | 第24-28页 |
| 1．3．1 小麦胚乳贮藏蛋白结构特点 | 第24-28页 |
| 1．4 小麦谷蛋白基因克隆 | 第28-35页 |
| 1．4．1 基因克隆主要方法 | 第28-33页 |
| 1．4．2 HMW谷蛋白亚基基因研究 | 第33-34页 |
| 1．4．3 HMW谷蛋白亚基基因氨基酸序列特征 | 第34-35页 |
| 1．5 小麦谷蛋白基因表达调控 | 第35-44页 |
| 1．5．1 转录水平调控 | 第36-38页 |
| 1．5．2 转录后水平调控 | 第38-40页 |
| 1．5．3 翻译水平调控 | 第40-44页 |
| 2 材料与方法 | 第44-61页 |
| 2．1 植物材料 | 第44页 |
| 2．2 小麦高分子量谷蛋白12亚基积累动态 | 第44-46页 |
| 2．2．1 试剂及配制 | 第44-45页 |
| 2．2．2 植物材料 | 第45页 |
| 2．2．3 样品提取 | 第45页 |
| 2．2．4 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第45-46页 |
| 2．3 DN7742和XKH9的HMW-GS 12亚基基因mRNA定量分析 | 第46-49页 |
| 2．3．1 植物材料 | 第47页 |
| 2．3．2 分子生物学及生化试剂 | 第47页 |
| 2．3．3 RT-PCR半定量法扩增内参照及目的片段引物 | 第47页 |
| 2．3．4 提取RNA的准备工作 | 第47页 |
| 2．3．5 TRizol Kit制备小麦籽粒总RNA | 第47-48页 |
| 2．3．6 RT-PCR半定量法检测HMW-GS 12基因mRNA水平 | 第48-49页 |
| 2．4 DN7742和XKH9的HMW-GS 12基因克隆及测序 | 第49-56页 |
| 2．4．1 菌种和质粒 | 第49-50页 |
| 2．4．2 分子生物学及生化试剂 | 第50页 |
| 2．4．3 PCR法扩增HMW-GS 12基因引物 | 第50页 |
| 2．4．4 细菌培养基 | 第50页 |
| 2．4．5 DN7742和XKH9基因组总DNA提取 | 第50-51页 |
| 2．4．6 小麦HMW-GS 12基因PCR扩增 | 第51页 |
| 2．4．7 凝胶中回收扩增的NA片段 | 第51-52页 |
| 2．4．8 HMW-GS 12基因与pMD18-T载体连接 | 第52页 |
| 2．4．9 大肠杆菌感受态细胞制备 | 第52页 |
| 2．4．10 连接产物转化大肠杆菌 | 第52页 |
| 2．4．11 细菌中质粒DNA制备 | 第52-53页 |
| 2．4．12 重组质粒的筛选与鉴定 | 第53-54页 |
| 2．4．13 序列测定 | 第54-56页 |
| 2．5 DN7742和XKH9的HMW-GS 12基因上游调控区克隆及测序 | 第56-58页 |
| 2．5．1 植物材料 | 第56页 |
| 2．5．2 菌种和质粒 | 第56页 |
| 2．5．3 分子生物学及生化试剂 | 第56页 |
| 2．5．4 扩增HMW-GS 12基因上游调控区引物 | 第56页 |
| 2．5．5 细菌培养基 | 第56页 |
| 2．5．6 DN7742和XKH9基因组总DNA提取 | 第56页 |
| 2．5．7 HMW-GS 12基因上游调控区PCR扩增 | 第56-57页 |
| 2．5．8 凝胶中回收扩增的DNA片段 | 第57页 |
| 2．5．9 半巣式PCR扩增12亚基基因上游调控区 | 第57页 |
| 2．5．10 重组质粒的筛选与鉴定 | 第57-58页 |
| 2．5．11 序列测定与分析 | 第58页 |
| 2．6 DN7742的HMW-GS 12亚基基因表达载体构建 | 第58-59页 |
| 2 6．1 菌种和质粒 | 第58页 |
| 2．6．2 分子生物学及生化试剂 | 第58页 |
| 2．6．3 扩增pHG12DN-P启动子和pHG12 DN-BM编码区引物 | 第58页 |
| 2．6．4 小麦pHG12 DN-P和pHG12 DN-BM基因亚克隆 | 第58-59页 |
| 2．6．5 pDNPBIHG植物表达载体构建及鉴定 | 第59页 |
| 2．6．6 pUbPBIHG植物表达载体构建及鉴定 | 第59页 |
| 2．7 主要仪器设备 | 第59-60页 |
| 2．8 主要试剂和药品 | 第60-61页 |
| 3 结果与分析 | 第61-101页 |
| 3．1 小麦贮藏蛋白中高分子量谷蛋白亚基积累动态 | 第61-68页 |
| 3．1．1 材料背景 | 第61-62页 |
| 3．1．2 小麦高分子量谷蛋白亚基积累 | 第62-68页 |
| 3．2 小麦高分子量谷蛋白12亚基基因mRNA定量分析 | 第68-71页 |
| 3．3 小麦高分子量谷蛋白12亚基基因克隆及序列分析 | 第71-86页 |
| 3．3．1 小麦高分子量谷蛋白12亚基基因克隆 | 第71-73页 |
| 3．3．2 高分子量谷蛋白12亚基基因序列与结构分析 | 第73-86页 |
| 3．4 HMW-GS 12亚基基因上游调控区克隆及序列分析 | 第86-92页 |
| 3．5 DN7742高分子量谷蛋白12亚基基因表达载体构建 | 第92-101页 |
| 3．5．1 DN7742的高分子量谷蛋白12亚基基因及启动子亚克隆 | 第92-94页 |
| 3．5．2 pDNPPBIHG植物表达载体构建 | 第94-96页 |
| 3．5．3 pUbPBIHG植物表达载体构建 | 第96-101页 |
| 4 讨论 | 第101-108页 |
| 4．1 小麦高分子量谷蛋白亚基积累与品质关系 | 第101-102页 |
| 4．2 mRNA表达水平与谷蛋白基因积累调控 | 第102-103页 |
| 4．3 高分子量谷蛋白12亚基基因结构与品质关系 | 第103-105页 |
| 4．4 5′上游调控区与谷蛋白基因积累表达调控 | 第105-108页 |
| 5 结论 | 第108-110页 |
| 参考文献 | 第110-124页 |
| 攻读博士学位期间发表学术论文 | 第124-125页 |
| 致谢 | 第125页 |
