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西瓜果实特异性基因wml1 5端启动子区转录调控功能及其应用研究

缩略词表第1-11页
中文摘要第11-13页
第一篇 立论依据和文献综述第13-38页
 第一章 立论依据和研究思路第13-17页
  1. 立论依据第13-15页
  2. 本论文的研究思路和目标第15-16页
  3. 研究内容及技术路线第16-17页
 第二章 文献综述第17-38页
  1 果实成熟的生理过程第17-20页
   1.1 果实色、香、味的变化第17-18页
   1.2 果实质地的变化第18-19页
   1.3 乙烯在果实成熟过程中的作用第19-20页
  2 果实成熟过程的分子生物学研究第20-29页
   2.1 果实成熟相关基因的克隆第20-21页
   2.2 成熟相关基因表达的影响因素第21-22页
    2.2.1 基因在成熟期间的表达第21页
    2.2.2 乙烯及IAA对基因表达的调控第21-22页
    2.2.3 环境刺激对基因表达的影响第22页
   2.3 果实成熟相关基因上游启动子的调控研究第22-29页
    2.3.1 番茄的PG基因的表达调控第23-24页
    2.3.2 番茄2A11基因的表达调控第24页
    2.3.3 番茄E4基因的表达调控第24-26页
    2.3.4 番茄E8基因的表达调控第26-27页
    2.3.5 苹果ACC氧化酶基因及PG基因的表达调控第27-28页
    2.3.6 草莓EGase基因的表达调控第28页
    2.3.7 其它果实成熟相关基因的表达调控第28-29页
  3 果实成熟相关基因及其启动子的应用研究进展第29-31页
   3.1 反义技术控制果实成熟第29-30页
   3.2 果实特异性启动子在基因工程研究中的应用第30-31页
  4 其它类型的植物启动子研究进展第31-36页
   4.1 植物启动子的一般特征第31-32页
   4.2 激素效应启动子第32-34页
    4.2.1 生长素效应启动子第32-33页
    4.2.2 其它乙烯效应启动子第33页
    4.2.3 ABA效应启动子第33-34页
    4.2.4 GA效应启动子第34页
   4.3 环境因素诱导表达启动子第34-36页
  5 植物AGPase研究进展第36-38页
   5.1 植物AGPase的基本特性第36页
   5.2 植物AGPase的分子生物学研究第36-38页
第二篇 西瓜wml1 5’端启动子区域在番茄中的表达分析第38-53页
 第三章 西瓜wml1 5’端启动子区域对番茄的遗传转化及其转录调控功能研究第38-53页
  1 材料与方法第39-43页
   1.1 植物材料第39页
   1.2 质粒载体与菌株第39页
   1.3 培养基第39-40页
   1.4 wml1的5’端启动子区域的结构组成分析第40页
   1.5 不同长度的wml1的5’端启动子区域遗传转化载体的构建第40-41页
    1.5.1 不同长度的wml1的5’端启动子区域的获得及亚克隆过程第40-41页
    1.5.2 适合于农杆菌介导的遗传转化的植物表达载体的构建第41页
   1.6 不同长度的wml1的5’端启动子区域对番茄的遗传转化及抗性芽的筛选第41-42页
    1.6.1 根癌农杆菌的培养第41页
    1.6.2 外植体的准备及预培养第41页
    1.6.3 转化与再生第41-42页
   1.7 转基因番茄植株的PCR鉴定第42页
   1.8 转基因植株的Southern杂交鉴定第42页
   1.9 GUS组织化学染色第42页
   1.10 GUS酶活性的定量分析第42-43页
   1.11 RNA的小量提取及RT-PCR反应第43页
  2 结果第43-50页
   2.1 不同长度的wml1的5’端启动子区域的植物表达载体的构建第43-45页
   2.2 各载体对番茄的遗传转化第45页
   2.3 转基因植株总DNA的PCR特异扩增检测第45-46页
   2.4 转基因植株的Southern杂交分析第46-47页
   2.5 转基因植株中GUS基因表达的组织化学分析和GUS酶活性分析第47-48页
   2.6 转基因植株叶片的RT-PCR扩增第48-50页
  3 讨论第50-53页
第三篇 wml1 5’端启动子区域在西瓜中的表达调控第53-75页
 第四章 wml1 5’端启动子区域在西瓜中的瞬时表达分析第54-62页
  1 材料与方法第54-56页
   1.1 植物材料第54页
   1.2 质粒载体与菌株第54页
   1.3 亚克隆载体的构建第54页
   1.4 基因枪介导的瞬间表达载体的构建第54-55页
   1.5 农杆菌介导的瞬间表达载体的构建第55页
   1.6 基因枪介导的遗传转化第55-56页
    1.6.1 轰击材料的处理第55页
    1.6.2 质粒的提取和纯化第55页
    1.6.3 金粉的制备第55页
    1.6.4 微弹载体的制备第55-56页
    1.6.5 装弹轰击第56页
   1.7 农杆菌介导的瞬间表达转化第56页
   1.8 GUS基因瞬间表达的组织化学分析第56页
  2 结果第56-60页
   2.1 wml1 5’端启动子区不同长度片段瞬间表达载体的构建第56-58页
   2.2 基因枪介导的GUS基因瞬间表达检测与分析第58-59页
   2.3 农杆菌介导的GUS基因在西瓜果实中的瞬间表达分析第59-60页
  3 讨论第60-62页
 第五章 西瓜遗传转化体系的优化研究第62-70页
  1 材料和方法第62-65页
   1.1 植物材料第62页
   1.2 培养基第62页
   1.3 质粒和菌种第62-63页
   1.4 无菌苗的获得第63页
   1.5 外植体的准备第63页
    1.5.1 不同苗龄对转化及再生的影响第63页
    1.5.2 不同切苗方式对转化及再生的影响第63页
    1.5.3 不同预培养时间对转化及再生的影响第63页
   1.6 根癌农杆菌的培养第63页
   1.7 遗传转化第63-64页
    1.7.1 不同时间的超声波处理对转化再生的影响第64页
    1.7.2 不同时间的农杆菌悬浮液浸泡对转化再生的影响第64页
    1.7.3 不同共培养时间对转化再生的影响第64页
   1.8 抗性芽的伸长及长成正常植株第64页
   1.9 DNA的少量提取及转基因植株的PCR鉴定第64-65页
   1.10 GUS组织化学染色分析第65页
  2 结果与讨论第65-69页
   2.1 不同苗龄对Kan抗性芽分化的影响第65页
   2.2 不同切苗方式对Kan抗性芽分化及抗性愈伤诱导效率的影响第65-66页
   2.3 不同预培养时间对Kan抗性芽分化及基因转化效率的影响第66-67页
   2.4 不同时间的超声波处理对抗性芽分化及基因转化效率的影响第67-68页
   2.5 农杆菌悬浮液浸泡时间对抗性芽分化及转化效率的影响第68页
   2.6 共培养时间对西瓜转化再生的影响第68-69页
  3 小结第69-70页
 第六章 wml1 5’端不同长度的启动子区域对西瓜的遗传转化第70-75页
  1 材料和方法第70-72页
   1.1 植物材料第70-71页
   1.2 质粒与菌种第71页
   1.3 培养基第71页
   1.4 根癌农杆菌的培养第71页
   1.5 遗传转化第71页
   1.6 抗性芽的伸长及长成正常植株第71页
   1.7 DNA的少量提取及转基因植株的PCR鉴定第71-72页
  2 结果第72-75页
   2.1 各载体转化后Kan抗性植株的获得第72页
   2.2 转基因西瓜植株的PCR特异扩增检测第72-75页
第四篇 西瓜果实特异性启动子在定向提高西瓜果实甜味品质中的应用第75-82页
 第七章 西瓜果实特异性启动子调控的Brazzein基因植物表达载体的构建第75-82页
  1 材料与方法第76-77页
   1.1 质粒与菌种第76页
   1.2 果实特异启动子片段的获得第76页
   1.3 Brazzein基因的分离第76-77页
   1.4 GUS基因的分离第77页
   1.5 果实特异性启动子与Brazzein基因在pBI221质粒载体上的融合第77页
   1.6 适合于遗传转化的表达载体的构建第77页
  2 结果第77-82页
展望和后续研究第82-84页
参考文献第84-104页
英文摘要第104-106页

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