| 中文摘要 | 第1-5页 |
| 英文摘要 | 第5-9页 |
| 一． 前言 | 第9-18页 |
| 1． 植物基因工程研究进展 | 第9-11页 |
| 2． 根癌农杆菌的Ti质粒及其应用 | 第11-12页 |
| 3． 植物甜蛋白Thaumatin研究现状 | 第12-18页 |
| 3．1 Thaumatin的结构和性质 | 第13-14页 |
| 3．2 Thaumatin甜味机理的研究 | 第14-16页 |
| 3．3 Thaumatin的开发和应用 | 第16-18页 |
| 二． 材料与方法 | 第18-28页 |
| 1 材料 | 第18-21页 |
| 1．1 植物材料 | 第18页 |
| 1．2 菌种、质粒 | 第18页 |
| 1．3 常用贮存液 | 第18页 |
| 1．4 限制性内切酶及其它工具酶 | 第18页 |
| 1．5 化学试剂 | 第18页 |
| 1．6 培养基 | 第18-19页 |
| 1．7 常用溶液配方 | 第19-21页 |
| 2． 方法 | 第21-28页 |
| 2．1 质粒DNA的提取 | 第21-22页 |
| 2．2 DNA的定量 | 第22页 |
| 2．3 DNA限制性内切酶消化 | 第22页 |
| 2．4 DNA片段的回收 | 第22-23页 |
| 2．5 DNA片段的连接 | 第23页 |
| 2．6 大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第23-24页 |
| 2．7 重组质粒的筛选 | 第24页 |
| 2．8 从核酸样品中去除蛋白使用的有机试剂 | 第24页 |
| 2．9 农杆菌感受态细胞的制备与转化 | 第24-25页 |
| 2．10 烟草的组织培养 | 第25-26页 |
| 2．11 鉴定方法 | 第26-28页 |
| 三． 实验结果 | 第28-34页 |
| 1 甜蛋白（thaumatin）基因植物表达质粒pBI_（121）-th的构建与鉴定 | 第28-29页 |
| 1．1 植物重组表达质粒pBI_（121）-th的构建 | 第28-29页 |
| 1．2 重组质粒pBI_（121）-th的鉴定 | 第29页 |
| 2 pBI_（121）-th质粒转化根癌农杆菌 | 第29页 |
| 3 植株再生体系的建立 | 第29-31页 |
| 3．1 不同培养基对叶片分化的效应 | 第30页 |
| 3．2 根的诱导 | 第30-31页 |
| 4 转化体筛选及植株再生 | 第31-32页 |
| 4．1 卡那霉素选择压力的确定 | 第31页 |
| 4．2 预培养对烟草在转化中叶片分化的影响 | 第31页 |
| 4．3 农杆菌感染时间对遗传转化的影响 | 第31-32页 |
| 5 转基因植株的鉴定 | 第32-34页 |
| 5．1 生根培养 | 第32-33页 |
| 5．2 PCR分析 | 第33-34页 |
| 四． 讨论 | 第34-37页 |
| 1． 重组表达质粒pBI_（121）-th的构建 | 第34页 |
| 2． 预培养效果 | 第34-35页 |
| 3． 农杆菌与外植体的感染时间及共培养 | 第35页 |
| 4． 卡那霉素的筛选过程 | 第35页 |
| 5． PCR鉴定 | 第35-37页 |
| 参考文献 | 第37-41页 |
| 本文缩写词 | 第41-42页 |
| 致谢 | 第42-44页 |