| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-7页 |
| 第一章 绪论 | 第7-17页 |
| ·植物抗逆性研究进展 | 第7-8页 |
| ·甘油的特点及甘油代谢 | 第8-9页 |
| ·甘油与甘油的特点 | 第8页 |
| ·生物体内的甘油代谢 | 第8-9页 |
| ·植物抗逆性启动子的研究 | 第9-11页 |
| ·启动子的一般特点 | 第9页 |
| ·克隆启动子的方法 | 第9-11页 |
| ·常用报告基因简介 | 第11-13页 |
| ·GUS 报告基因的酶学特性 | 第12页 |
| ·GUS 报告基因的化学分析方法 | 第12-13页 |
| ·植物基因工程育种 | 第13-15页 |
| ·农杆菌介导的植物基因转化技术 | 第13-14页 |
| ·植物基因转化的受体系统 | 第14-15页 |
| ·立题意义与本研究主要任务 | 第15-17页 |
| 第二章 pScGPD1启动子融合gus报告基因在酿酒酵母中瞬时表达的研究 | 第17-29页 |
| ·材料 | 第17-20页 |
| ·菌株及质粒 | 第17页 |
| ·主要仪器 | 第17-18页 |
| ·工具酶和试剂 | 第18-19页 |
| ·培养基 | 第19-20页 |
| ·方法 | 第20-25页 |
| ·菌体的培养 | 第20页 |
| ·染色体DNA 制备 | 第20页 |
| ·PCR 引物 | 第20页 |
| ·PCR 反应体系及反应条件 | 第20-21页 |
| ·PCR 产物胶回收 | 第21页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第21页 |
| ·pScGPD1 及gus 与pMD-18T 连接 | 第21页 |
| ·转化 | 第21-22页 |
| ·质粒DNA 的提取 | 第22页 |
| ·转化子的筛选鉴定 | 第22页 |
| ·酿酒酵母S. cerevisiae/pYX212-zeocin-pScGPD1-gus 基因工程菌的构建 | 第22-24页 |
| ·SDS-PAGE | 第24页 |
| ·GUS 瞬时表达的荧光法测定 | 第24-25页 |
| ·结果与分析 | 第25-28页 |
| ·pMD-18T- pScGPD1 和pMD-18T-gus 的构建 | 第25页 |
| ·酿酒酵母S. cerevisiae 表达载体的构建 | 第25-26页 |
| ·酿酒酵母S. cerevisiae 基因工程菌的获得 | 第26页 |
| ·重组菌全细胞蛋白SDS-PAGE 电泳分析 | 第26-27页 |
| ·渗透胁迫对pScGPD1 启动子表达的影响 | 第27-28页 |
| ·小结 | 第28-29页 |
| 第三章 pScGPD1启动子融合gus报告基因在烟草中的瞬时表达 | 第29-38页 |
| ·材料 | 第29-31页 |
| ·菌株与质粒 | 第29页 |
| ·植物材料 | 第29页 |
| ·主要仪器 | 第29页 |
| ·工具酶与试剂 | 第29-30页 |
| ·培养基 | 第30-31页 |
| ·方法 | 第31-34页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第31-32页 |
| ·根癌农杆菌电击转化 | 第32页 |
| ·烟草的遗传转化 | 第32-33页 |
| ·GUS 瞬时表达活性检测 | 第33-34页 |
| ·结果与分析 | 第34-37页 |
| ·表达载体p3300-zeocin-pScGPD1-gus 的酶切验证 | 第34页 |
| ·根癌农杆菌的电击转化 | 第34-35页 |
| ·转基因烟草的选择与再生 | 第35-36页 |
| ·GUS 瞬时表达检测结果 | 第36-37页 |
| ·小结 | 第37-38页 |
| 第四章 酵母甘油合成关键酶基因ScGPD1在烟草中的表达研究 | 第38-47页 |
| ·材料 | 第38-40页 |
| ·菌株与质粒 | 第38页 |
| ·植物材料 | 第38页 |
| ·主要仪器 | 第38-39页 |
| ·工具酶和试剂 | 第39页 |
| ·培养基 | 第39-40页 |
| ·方法 | 第40-41页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第40页 |
| ·根癌农杆菌电击转化 | 第40-41页 |
| ·烟草的遗传转化 | 第41页 |
| ·转基因烟叶中甘油含量的测定 | 第41页 |
| ·转基因烟叶中GPDH 的测定 | 第41页 |
| ·结果与分析 | 第41-46页 |
| ·表达载体p3300-zeocin-ScGPD1 的酶切验证 | 第41-42页 |
| ·根癌农杆菌的电击转化 | 第42-43页 |
| ·转基因烟草的获得 | 第43页 |
| ·初始烟叶中甘油的测定 | 第43-44页 |
| ·初始烟叶中GPDH 的检测 | 第44-45页 |
| ·不同盐胁迫下烟叶中的甘油含量及GPDH 酶活 | 第45-46页 |
| ·小结 | 第46-47页 |
| 主要结论与展望 | 第47-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-53页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第53页 |
