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番茄叶绿体LesAPX和Cu/Zn-SOD的克隆及功能分析

中文摘要第1-9页
英文摘要第9-12页
英文缩写符号及其中英文对照第12-15页
1 引言第15-25页
   ·低温胁迫对植物的影响第15-19页
     ·低温对光合作用的影响第15-16页
     ·低温条件下的光抑制第16-17页
     ·低温胁迫下的光破坏防御机制第17-19页
   ·抗氧化酶的作用机理第19-24页
     ·抗坏血酸过氧化物酶的代谢途径第20-22页
     ·超氧化物岐化酶的代谢途径第22-24页
   ·本研究的目的、意义第24-25页
2 材料与方法第25-46页
   ·实验材料第25-26页
   ·实验方法第26-46页
     ·番茄叶绿体基质抗坏血酸过氧化物酶基因的获得第26-32页
       ·总 RNA 的提取第27-28页
       ·cDNA 第一条链的合成第28页
       ·cDNA 纯化第28-29页
       ·对cDNA 进行末端加尾第29页
       ·番茄叶绿体基质抗坏血酸过氧化物酶基因全长的克隆第29-32页
       ·LesAPX 反义表达载体的构建第32页
     ·番茄叶绿体 Cu/Zn-SOD 基因的获得第32-44页
       ·番茄叶绿体 Cu/Zn-SOD 基因真核表达载体的构建第32-37页
       ·转基因烟草植株的 PCR 检测第37-39页
       ·Cu/Zn-SOD 基因原核表达及 Western 杂交第39-44页
     ·各项生理指标的测定第44-46页
       ·活性氧清除酶的活性测定第44页
       ·组织化学染色第44-45页
       ·荧光参数测定第45页
       ·快速荧光诱导曲线的测定第45页
       ·光合气体交换参数的测定第45页
       ·盐胁迫下的种子发芽试验第45-46页
3 结果与分析第46-65页
   ·番茄叶绿体基质抗坏血酸过氧化物酶基因的分离及表达第46-54页
     ·LesAPX 基因的分离第46-47页
     ·LesAPX 基因的序列分析第47-51页
     ·LesAPX 基因表达载体的构建及转基因体系的建立第51-53页
       ·LesAPX 基因表达载体的构建第51-52页
       ·转反义 LesAPX 基因烟草植株的鉴定第52-53页
     ·LesAPX 基因在烟草中的表达分析第53-54页
   ·番茄叶绿体 Cu/Zn-SOD 基因的分离及表达第54-65页
     ·番茄叶绿体 Cu/Zn-SOD 基因的分离第54-55页
     ·原核表达载体pET-Cu/Zn-SOD 的构建及原核表达分析第55-56页
     ·Cu/Zn-SOD 基因正、反义表达载体的构建第56-57页
     ·转正、反义 Cu/Zn-SOD 基因烟草植株的鉴定第57-58页
     ·Westen blot 检测分析第58页
     ·低温弱光胁迫对转 Cu/Zn-SOD 基因烟草自由基清除酶系统的影响第58-59页
     ·低温弱光胁迫对转 Cu/Zn-SOD 基因烟草活性氧产生量的影响第59-60页
     ·低温弱光胁迫对 Cu/Zn-SOD 基因烟草植株荧光参数的影响第60-61页
     ·低温弱光胁迫对转 Cu/Zn-SOD 基因烟草快速荧光诱导曲线的影响第61-63页
     ·低温弱光胁迫对转 Cu/Zn-SOD 基因烟草植株光合速率的影响第63页
     ·盐胁迫处理对转 Cu/Zn-SOD 基因烟草种子发芽率的影响第63-65页
4 讨论第65-69页
   ·番茄基质抗坏血酸过氧化物酶的功能第65-66页
   ·番茄叶绿体 Cu/Zn-SOD 基因的功能第66-69页
5 结论第69-70页
参考文献第70-81页
致谢第81-82页
攻读学位期间发表的论文第82页

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