| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 缩略词表 | 第5-8页 |
| 第一章 引言 | 第8-15页 |
| ·禽流感病毒神经氨酸酶的结构与功能 | 第8-10页 |
| ·禽流感检测方法研究进展 | 第10-12页 |
| ·杆状病毒表达系统 | 第12-14页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第14-15页 |
| 第二章 禽流感病毒NA1和NA2基因重组杆状病毒的表达 | 第15-38页 |
| ·材料 | 第15-17页 |
| ·禽流感病毒毒株 | 第15页 |
| ·载体,菌株和细胞 | 第15页 |
| ·主要鸡血清 | 第15页 |
| ·主要试剂 | 第15-16页 |
| ·所用溶液及其配制 | 第16页 |
| ·主要仪器设备 | 第16-17页 |
| ·方法 | 第17-27页 |
| ·RT-PCR扩增目的基因NA1和NA2 | 第17-19页 |
| ·重组转移载体pFastBacHTA-NA1和pFastBacHTA-NA2的构建 | 第19-21页 |
| ·重组穿梭载体Bacmid的构建 | 第21-22页 |
| ·重组杆状病毒的获得和鉴定 | 第22-24页 |
| ·表达产物的检测与鉴定 | 第24-26页 |
| ·表达条件的优化 | 第26页 |
| ·目的蛋白的纯化 | 第26-27页 |
| ·结果 | 第27-35页 |
| ·RT-PCR扩增目的基因NA1和NA2 | 第27页 |
| ·重组转移载体pFastBacHTA-NA1和pFastBacHTA-NA2的构建 | 第27-28页 |
| ·重组穿梭载体Bacmid的构建 | 第28-29页 |
| ·重组杆状病毒的鉴定 | 第29-30页 |
| ·表达产物的检测与鉴定 | 第30-33页 |
| ·表达条件的优化 | 第33-34页 |
| ·目的蛋白的纯化 | 第34-35页 |
| ·讨论与小结 | 第35-38页 |
| ·关于表达系统的选择 | 第35页 |
| ·关于重组穿梭载体Bacmid的构建 | 第35-36页 |
| ·关于转染 | 第36页 |
| ·关于目的蛋白的表达 | 第36-37页 |
| ·关于目的蛋白的检测方法 | 第37页 |
| ·小结 | 第37-38页 |
| 第三章 检测禽流感病毒N1和N2抗体间接ELISA方法的建立 | 第38-54页 |
| ·材料 | 第38-39页 |
| ·主要试剂和材料 | 第38页 |
| ·主要器材和设备 | 第38页 |
| ·实验动物 | 第38-39页 |
| ·疫苗 | 第39页 |
| ·所用溶液及配制 | 第39页 |
| ·方法 | 第39-42页 |
| ·间接ELISA的操作步骤 | 第39页 |
| ·间接ELISA相关试验条件的确定试验 | 第39-41页 |
| ·间接ELISA判定标准的确定 | 第41页 |
| ·间接ELISA的特异性、敏感性和重复性试验 | 第41-42页 |
| ·间接ELISA的初步应用 | 第42页 |
| ·结果 | 第42-51页 |
| ·间接ELISA相关试验条件的确定试验 | 第42-47页 |
| ·试验结果的判定 | 第47页 |
| ·间接ELISA特异性、敏感性和重复性试验 | 第47-50页 |
| ·间接ELISA的初步应用 | 第50-51页 |
| ·讨论与小结 | 第51-54页 |
| ·关于AIV神经氨酸酶N1和N2亚型的鉴别 | 第51页 |
| ·关于间接ELISA方法的建立 | 第51-52页 |
| ·关于ELISA方法与NIT方法的比较 | 第52页 |
| ·关于间接ELISA的初步应用 | 第52页 |
| ·小结 | 第52-54页 |
| 第四章 结论 | 第54-55页 |
| 第五章 对下一步研究的设想 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 附录 | 第62-74页 |
