| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-5页 |
| 英文缩写表 | 第5-6页 |
| 目录 | 第6-8页 |
| 第一章 引言 | 第8-21页 |
| ·猪支原体肺炎研究背景 | 第8-9页 |
| ·猪支原体肺炎 | 第8页 |
| ·猪肺炎支原体 | 第8-9页 |
| ·关于猪肺炎支原体的国内外研究进展 | 第9-19页 |
| ·致病机理研究进展 | 第9-10页 |
| ·疫苗的研究进展 | 第10-14页 |
| ·猪肺炎支原体的免疫机理研究进展 | 第14-16页 |
| ·诊断方法的研究进展 | 第16-19页 |
| ·研究目的与意义 | 第19-20页 |
| ·研究内容 | 第20-21页 |
| ·猪肺炎支原体R1基因在原核表达系统的重组表达 | 第20页 |
| ·猪肺炎支原体重组目的蛋白免疫原性研究 | 第20-21页 |
| 第二章 猪肺炎支原体p97基因R1区与LTB基因的克隆、表达 | 第21-49页 |
| ·材料 | 第21-28页 |
| ·载体和菌株 | 第21-22页 |
| ·主要的生物试剂 | 第22页 |
| ·溶液的配制 | 第22-27页 |
| ·主要仪器设备和耗材 | 第27-28页 |
| ·方法 | 第28-38页 |
| ·克隆载体的构建 | 第28-31页 |
| ·表达载体的构建 | 第31-34页 |
| ·蛋白的诱导表达 | 第34-35页 |
| ·表达蛋白的表达形式的分析 | 第35页 |
| ·重组蛋白的纯化和回收 | 第35-36页 |
| ·表达产物的Western-Blot鉴定 | 第36-37页 |
| ·rLTBR1蛋白生物活性的ELISA检测 | 第37-38页 |
| ·结果和分析 | 第38-47页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第38-41页 |
| ·重组蛋白的诱导表达 | 第41-46页 |
| ·rLTBR1蛋白生物活性的ELISA检测结果 | 第46-47页 |
| ·讨论 | 第47-48页 |
| ·关于重组蛋白rLTBR1和rR1 | 第47页 |
| ·关于目的蛋白的纯化 | 第47-48页 |
| ·小结 | 第48-49页 |
| 第三章 重组目的蛋白免疫原性研究 | 第49-66页 |
| ·材料 | 第49-51页 |
| ·主要的血清和抗体 | 第49页 |
| ·主要的试剂 | 第49-50页 |
| ·实验用溶液及其配置 | 第50-51页 |
| ·主要仪器设备和耗材 | 第51页 |
| ·蛋白免疫原性测定 | 第51-57页 |
| ·动物免疫试验方案 | 第51-52页 |
| ·小鼠血清,肺泡灌洗液,脾细胞上清的采集 | 第52页 |
| ·琼脂免疫扩散试验检测小鼠血清抗体 | 第52-53页 |
| ·小鼠血清,肺泡灌洗液,脾细胞上清液的ELISA检测 | 第53-57页 |
| ·结果和分析 | 第57-63页 |
| ·琼脂凝胶扩散试验结果 | 第57页 |
| ·检测R1和rLTBR1抗体的间接ELISA方法的建立 | 第57-59页 |
| ·用建立的间接ELISA方法检测试验动物小鼠血清抗体水平 | 第59-60页 |
| ·ELISA检测小鼠脾细胞上清液IFN-γ结果 | 第60-61页 |
| ·ELISA方法检测小鼠肺泡灌洗液中IgA水平的结果 | 第61-63页 |
| ·讨论 | 第63-65页 |
| ·有关p97粘附因子的基因工程疫苗免疫原性研究概况 | 第63页 |
| ·选择LTB作为黏膜免疫佐剂的研究情况 | 第63页 |
| ·LTB的黏膜佐剂作用与黏膜免疫途径的关系研究情况 | 第63-64页 |
| ·LTB在该实验中的细胞免疫作用研究情况 | 第64页 |
| ·IFN-γ在细胞免疫中的作用以及对黏膜免疫的作用 | 第64-65页 |
| ·小结 | 第65-66页 |
| 第四章 结论 | 第66-67页 |
| ·实验总结 | 第66页 |
| ·下一步工作设想 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
| 作者简历 | 第74页 |
