致谢 | 第1-12页 |
摘要 | 第12-15页 |
Abstract | 第15-18页 |
前言 | 第18-20页 |
1 文献综述 | 第20-34页 |
·番茄与叶霉菌互作系统 | 第20-24页 |
·Cf基因产物结构和功能 | 第20页 |
·Avr基因产物的结构和功能 | 第20-21页 |
·番茄Cf蛋白对C.fulvum Avr蛋白的识别 | 第21-23页 |
·番茄抗病基因Cf-4和Cf-9下游信号传导研究进展 | 第23-24页 |
·蛋白质组学在植物与病原互作研究方面的应用 | 第24-29页 |
·蛋白质组学研究技术 | 第24-25页 |
·双向凝胶电泳技术 | 第25页 |
·蛋白质组学方法在植物与病原互作研究方面的应用 | 第25-29页 |
·病毒诱导的基因沉默技术及其在鉴定植物基因功能中的应用 | 第29-34页 |
·VIGS的作用机制 | 第29页 |
·VIGS的病毒载体 | 第29-30页 |
·VIGS用于基因功能鉴定的优点 | 第30-31页 |
·VIGS在鉴定植物基因功能中的应用 | 第31-34页 |
2 番茄子叶总蛋白双向电泳体系的建立及优化 | 第34-56页 |
前言 | 第34-35页 |
·材料和方法 | 第35-41页 |
·材料 | 第35页 |
·仪器和试剂 | 第35-36页 |
·实验方法 | 第36-41页 |
·结果和分析 | 第41-44页 |
·不同pH梯度的IPG胶条双向电泳结果比较 | 第41-42页 |
·不同上样方式的双向电泳结果比较 | 第42-43页 |
·不同上样量双向电泳结果比较 | 第43-44页 |
·不同聚焦参数的双向电泳结果比较 | 第44页 |
·番茄子叶总蛋白制备型凝胶双向电泳 | 第44页 |
·适合番茄子叶总蛋白分离的双向电泳体系 | 第44页 |
·讨论 | 第44-56页 |
·IPG胶条的选择 | 第44-45页 |
·上样方式 | 第45页 |
·上样量 | 第45-46页 |
·双向电泳聚焦参数 | 第46页 |
·出现主要问题和解决方法 | 第46-56页 |
3 番茄抗病基因Cf-4和Cf-9下游信号传导途径的蛋白质组学比较分析 | 第56-100页 |
前言 | 第56-58页 |
·材料和方法 | 第58-61页 |
·植物培养和取样 | 第58页 |
·双向凝胶电泳 | 第58-60页 |
·蛋白质的质谱鉴定 | 第60-61页 |
·结果和分析 | 第61-69页 |
·Cf-4和Avr4/Cf-4基因型番茄子叶总蛋白表达谱分析 | 第61-63页 |
·Cf-9和Avr9/Cf-9基因型番茄子叶总蛋白表达谱分析 | 第63-65页 |
·四种基因型番茄苗差异表达蛋白的汇总分析 | 第65-66页 |
·四种基因型番茄苗差异表达蛋白质谱鉴定、数据库搜索及功能分类 | 第66-68页 |
·Cf-4和Cf-9下游信号传导途径的蛋白质组比较分析 | 第68页 |
·蛋白质组学和cDNA-AFLP筛选的一致结果 | 第68-69页 |
·讨论 | 第69-100页 |
·Cf-4和Cf-9下游信号传导途径 | 第69-72页 |
·关于Cf-4和Cf-9下游信号传导途径蛋白的差异 | 第72页 |
·Cf-9下游特异性差异表达相关蛋白 | 第72-73页 |
·转录组水平与蛋白质组水平差异表达基因靶标谱不完全一致的可能原因分析 | 第73-100页 |
4 差异表达蛋白对应基因在Cf-4和Cf-9介导的过敏性坏死反应中的作用分析 | 第100-122页 |
前言 | 第100-101页 |
·材料和方法 | 第101-105页 |
·实验材料 | 第101页 |
·实验方法 | 第101-105页 |
·结果和分析 | 第105-117页 |
·适于基因功能分析的Cf-4/Avr4和Cf-9/Avr9介导的HR检测分析体系的优化 | 第105-107页 |
·供基因沉默功能分析的差异表达蛋白编码基因的选择 | 第107-109页 |
·沉默结构的构建 | 第109-110页 |
·差异表达蛋白编码基因对植株生长发育的调控作用分析 | 第110-113页 |
·差异表达蛋白编码基因对Cf-4和Cf-9介导的HR的调控作用分析 | 第113-115页 |
·沉默植株的RT-PCR验证 | 第115-117页 |
·讨论 | 第117-122页 |
·采用蛋白质组学和VIGS技术相结合的体系筛选HR调控基因的有效性 | 第117页 |
·Cf-4和Cf-9下游信号传导相关因子 | 第117-119页 |
·Cf-4和Cf-9下游信号传导途径的差异 | 第119-122页 |
5 66个基因在Cf-4和Cf-9介导的过敏性坏死反应中的作用分析 | 第122-138页 |
前言 | 第122-123页 |
·材料和方法 | 第123-124页 |
·实验材料 | 第123页 |
·实验方法 | 第123-124页 |
·结果和分析 | 第124-134页 |
·用于沉默分析的基因 | 第124-127页 |
·66个基因沉默对植株发育的影响分析 | 第127-128页 |
·66个基因沉默对Cf-4和Cf-9介导HR的影响作用分析 | 第128-133页 |
·沉默植株的RT-PCR检验 | 第133-134页 |
·讨论 | 第134-138页 |
全文小结 | 第138-140页 |
参考文献 | 第140-148页 |
附录 论文相关溶液配置 | 第148-154页 |
在学期间发表的学术论文 | 第154页 |