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番茄Cf-4和Cf-9基因介导的过敏性反应调控基因的筛选和鉴定

致谢第1-12页
摘要第12-15页
Abstract第15-18页
前言第18-20页
1 文献综述第20-34页
   ·番茄与叶霉菌互作系统第20-24页
     ·Cf基因产物结构和功能第20页
     ·Avr基因产物的结构和功能第20-21页
     ·番茄Cf蛋白对C.fulvum Avr蛋白的识别第21-23页
     ·番茄抗病基因Cf-4和Cf-9下游信号传导研究进展第23-24页
   ·蛋白质组学在植物与病原互作研究方面的应用第24-29页
     ·蛋白质组学研究技术第24-25页
     ·双向凝胶电泳技术第25页
     ·蛋白质组学方法在植物与病原互作研究方面的应用第25-29页
   ·病毒诱导的基因沉默技术及其在鉴定植物基因功能中的应用第29-34页
     ·VIGS的作用机制第29页
     ·VIGS的病毒载体第29-30页
     ·VIGS用于基因功能鉴定的优点第30-31页
     ·VIGS在鉴定植物基因功能中的应用第31-34页
2 番茄子叶总蛋白双向电泳体系的建立及优化第34-56页
 前言第34-35页
   ·材料和方法第35-41页
     ·材料第35页
     ·仪器和试剂第35-36页
     ·实验方法第36-41页
   ·结果和分析第41-44页
     ·不同pH梯度的IPG胶条双向电泳结果比较第41-42页
     ·不同上样方式的双向电泳结果比较第42-43页
     ·不同上样量双向电泳结果比较第43-44页
     ·不同聚焦参数的双向电泳结果比较第44页
     ·番茄子叶总蛋白制备型凝胶双向电泳第44页
     ·适合番茄子叶总蛋白分离的双向电泳体系第44页
   ·讨论第44-56页
     ·IPG胶条的选择第44-45页
     ·上样方式第45页
     ·上样量第45-46页
     ·双向电泳聚焦参数第46页
     ·出现主要问题和解决方法第46-56页
3 番茄抗病基因Cf-4和Cf-9下游信号传导途径的蛋白质组学比较分析第56-100页
 前言第56-58页
   ·材料和方法第58-61页
     ·植物培养和取样第58页
     ·双向凝胶电泳第58-60页
     ·蛋白质的质谱鉴定第60-61页
   ·结果和分析第61-69页
     ·Cf-4和Avr4/Cf-4基因型番茄子叶总蛋白表达谱分析第61-63页
     ·Cf-9和Avr9/Cf-9基因型番茄子叶总蛋白表达谱分析第63-65页
     ·四种基因型番茄苗差异表达蛋白的汇总分析第65-66页
     ·四种基因型番茄苗差异表达蛋白质谱鉴定、数据库搜索及功能分类第66-68页
     ·Cf-4和Cf-9下游信号传导途径的蛋白质组比较分析第68页
     ·蛋白质组学和cDNA-AFLP筛选的一致结果第68-69页
   ·讨论第69-100页
     ·Cf-4和Cf-9下游信号传导途径第69-72页
     ·关于Cf-4和Cf-9下游信号传导途径蛋白的差异第72页
     ·Cf-9下游特异性差异表达相关蛋白第72-73页
     ·转录组水平与蛋白质组水平差异表达基因靶标谱不完全一致的可能原因分析第73-100页
4 差异表达蛋白对应基因在Cf-4和Cf-9介导的过敏性坏死反应中的作用分析第100-122页
 前言第100-101页
   ·材料和方法第101-105页
     ·实验材料第101页
     ·实验方法第101-105页
   ·结果和分析第105-117页
     ·适于基因功能分析的Cf-4/Avr4和Cf-9/Avr9介导的HR检测分析体系的优化第105-107页
     ·供基因沉默功能分析的差异表达蛋白编码基因的选择第107-109页
     ·沉默结构的构建第109-110页
     ·差异表达蛋白编码基因对植株生长发育的调控作用分析第110-113页
     ·差异表达蛋白编码基因对Cf-4和Cf-9介导的HR的调控作用分析第113-115页
     ·沉默植株的RT-PCR验证第115-117页
   ·讨论第117-122页
     ·采用蛋白质组学和VIGS技术相结合的体系筛选HR调控基因的有效性第117页
     ·Cf-4和Cf-9下游信号传导相关因子第117-119页
     ·Cf-4和Cf-9下游信号传导途径的差异第119-122页
5 66个基因在Cf-4和Cf-9介导的过敏性坏死反应中的作用分析第122-138页
 前言第122-123页
   ·材料和方法第123-124页
     ·实验材料第123页
     ·实验方法第123-124页
   ·结果和分析第124-134页
     ·用于沉默分析的基因第124-127页
     ·66个基因沉默对植株发育的影响分析第127-128页
     ·66个基因沉默对Cf-4和Cf-9介导HR的影响作用分析第128-133页
     ·沉默植株的RT-PCR检验第133-134页
   ·讨论第134-138页
全文小结第138-140页
参考文献第140-148页
附录 论文相关溶液配置第148-154页
在学期间发表的学术论文第154页

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