| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-17页 |
| 引言 | 第17-19页 |
| 第一篇 文献综述及技术路线 | 第19-49页 |
| 第一章 组氨酸三聚体核苷结合蛋白(HINT)研究进展 | 第20-28页 |
| 1 HINT的发现及结构特点 | 第20-22页 |
| ·HINT的发现和命名 | 第20-21页 |
| ·HINT的结构特点 | 第21-22页 |
| 2 HINT的功能 | 第22-26页 |
| ·生物学活性(酶催化作用) | 第22-24页 |
| ·转录调控作用 | 第24-25页 |
| ·肿瘤抑制作用 | 第25-26页 |
| 3 其他超家族成员概况 | 第26-27页 |
| 4 结语 | 第27-28页 |
| 第二章 胞嘧啶核苷脱氨酶研究进展 | 第28-34页 |
| 1 CDA的结构与分类 | 第28页 |
| 2 CDA与疾病诊断 | 第28-30页 |
| ·类风湿性疾病的诊断 | 第29页 |
| ·肝胆疾病的诊断 | 第29页 |
| ·病理妊娠的早期诊断 | 第29-30页 |
| ·急性白血病的疗效诊断 | 第30页 |
| 3 CDA的检测方法 | 第30-32页 |
| ·氨间接测定法 | 第31页 |
| ·紫外分光光度法 | 第31页 |
| ·放射性同位素法 | 第31页 |
| ·液相色谱法 | 第31-32页 |
| 4 CDA与肿瘤治疗 | 第32-33页 |
| ·结肠癌 | 第32页 |
| ·肝癌 | 第32页 |
| ·胃癌 | 第32页 |
| ·肝结肠转移癌 | 第32-33页 |
| ·肉瘤 | 第33页 |
| ·CDA基因治疗的特征 | 第33页 |
| 5 结语 | 第33-34页 |
| 第三章 泛素连接酶研究综述 | 第34-43页 |
| 1 泛素化 | 第34-36页 |
| 2 泛素化相关的酶 | 第36-38页 |
| ·E1泛素活化酶 | 第36页 |
| ·E2泛素结合酶 | 第36-37页 |
| ·E3泛素连接酶 | 第37页 |
| ·泛素蛋白酶体途径的其他成分 | 第37-38页 |
| 3 泛素连接酶 | 第38-41页 |
| ·HECT结构域家族连接酶结构与功能特点 | 第39页 |
| ·U-box结构域的泛素连接酶 | 第39-40页 |
| ·RING结构域家族的泛素连接酶 | 第40-41页 |
| 4 结语 | 第41-43页 |
| 第四章 β胸腺肽研究进展 | 第43-48页 |
| 1 胸腺肽Tβ4结构特点 | 第43-44页 |
| 2 生物学功能 | 第44-47页 |
| ·维持细胞骨架 | 第44-45页 |
| ·抗感染及促伤口愈合 | 第45-46页 |
| ·血管生成 | 第46页 |
| ·细胞凋亡 | 第46页 |
| ·胸腺肽β4与肿瘤生成 | 第46-47页 |
| 3 结语 | 第47-48页 |
| 技术路线图 | 第48-49页 |
| 第二篇 九孔鲍cDNA文库的构建 | 第49-65页 |
| 第五章 九孔鲍受脂多糖刺激后血淋巴细胞全长cDNA文库的构建和筛选 | 第50-65页 |
| 1 材料和方法 | 第50-58页 |
| ·材料 | 第50-52页 |
| ·方法 | 第52-58页 |
| 2 结果 | 第58-63页 |
| ·总RNA的制备 | 第58-59页 |
| ·双链cDNA的合成 | 第59-60页 |
| ·Chroma SPIN-400过柱分馏 | 第60页 |
| ·噬菌体文库滴度及重组效率 | 第60-61页 |
| ·质粒PCR筛选 | 第61-62页 |
| ·测序结果分析 | 第62-63页 |
| 3 讨论 | 第63-65页 |
| 第三篇 九孔鲍四种重要免疫相关蛋白的发现及其功能研究 | 第65-148页 |
| (一)九孔鲍HINT的鉴定与功能和机制的探索性研究 | 第66-101页 |
| 第六章 九孔鲍HINT的序列分析、组织表达分布及在免疫反应中的作用 | 第66-77页 |
| 1 材料和方法 | 第66-70页 |
| ·材料 | 第67-68页 |
| ·方法 | 第68-70页 |
| 2 结果 | 第70-75页 |
| ·鲍HINT的全长克隆 | 第70-71页 |
| ·鲍HINT的序列分析 | 第71-74页 |
| ·鲍HINT的组织表达分布及在免疫反应中的作用 | 第74-75页 |
| 3 讨论 | 第75-77页 |
| 第七章 九孔鲍HINT的原核表达、鉴定、细胞内定位、生物活性及二聚体结构分析 | 第77-92页 |
| 1 材料与方法 | 第77-84页 |
| ·材料 | 第77-80页 |
| ·方法 | 第80-84页 |
| 2 结果 | 第84-90页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第84-86页 |
| ·鲍HINT的原核表达、纯化及鉴定 | 第86-87页 |
| ·鲍HINT二聚体结构分析 | 第87页 |
| ·鲍HINT的生物活性分析 | 第87-88页 |
| ·多克隆抗体制备及Western blot分析ab-HINT在鲍中的表达情况 | 第88-90页 |
| ·细胞内定位 | 第90页 |
| 3 讨论 | 第90-92页 |
| 第八章 九孔鲍HINT蛋白对鲍血淋巴细胞以及人肿瘤细胞的作用及机制研究 | 第92-101页 |
| 1 材料和方法 | 第92-95页 |
| ·材料 | 第92-93页 |
| ·方法 | 第93-95页 |
| 2 结果 | 第95-99页 |
| ·鲍HINT诱导血淋巴细胞凋亡的电镜分析结果 | 第95-96页 |
| ·鲍HINT诱导血淋巴细胞凋亡的流式细胞仪分析结果 | 第96页 |
| ·鲍诱导血淋巴细胞凋亡中的作用机制探索 | 第96-97页 |
| ·鲍HINT诱导肿瘤细胞凋亡的电镜分析结果 | 第97-98页 |
| ·鲍HINT诱导肿瘤细胞凋亡的流式细胞仪分析结果 | 第98页 |
| ·鲍HINT诱导肿瘤细胞凋亡的作用机制探索 | 第98-99页 |
| 3 讨论 | 第99-101页 |
| (二)九孔鲍CDA的鉴定与功能的探索性研究 | 第101-121页 |
| 第九章 九孔鲍CDA的序列分析、组织表达分布及在免疫反应中的作用 | 第101-111页 |
| 1 材料和方法 | 第101-103页 |
| ·材料 | 第101-102页 |
| ·方法 | 第102-103页 |
| 2 结果 | 第103-108页 |
| ·鲍CDA的全长克隆 | 第103页 |
| ·鲍CDA的序列分析 | 第103-106页 |
| ·鲍CDA的组织表达分布及在免疫反应中的作用 | 第106-108页 |
| 3 讨论 | 第108-111页 |
| 第十章 九孔鲍CDA的原核表达、生物活性分析及细胞内的定位 | 第111-121页 |
| 1 材料与方法 | 第111-113页 |
| ·材料 | 第111-112页 |
| ·方法 | 第112-113页 |
| 2 结果 | 第113-119页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第113-114页 |
| ·鲍CDA的原核表达、纯化及鉴定 | 第114-115页 |
| ·鲍CDA的生物活性分析 | 第115-116页 |
| ·多克隆抗体制备及Western blot分析 | 第116-117页 |
| ·鲍CDA在蛋白水平上的表达分析 | 第117-118页 |
| ·鲍CDA在鲍组织细胞内的定位 | 第118-119页 |
| 3 讨论 | 第119-121页 |
| (三)九孔鲍Rbx1的鉴定与功能的研究探讨 | 第121-139页 |
| 第十一章 九孔鲍Rbx1的序列分析、组织表达分布及其与免疫的关系探讨 | 第121-130页 |
| 1 材料和方法 | 第121-122页 |
| ·材料 | 第121-122页 |
| ·方法 | 第122页 |
| 2 结果 | 第122-128页 |
| ·鲍Rbx1的全长克隆 | 第122-123页 |
| ·鲍Rbx1的序列分析 | 第123-127页 |
| ·鲍Rbx1的组织表达分布及PHA诱导刺激后表达变化 | 第127-128页 |
| 3 讨论 | 第128-130页 |
| 第十二章 九孔鲍Rbx1的原核表达、细胞内定位及泛素化修饰 | 第130-139页 |
| 1 材料与方法 | 第130-132页 |
| ·材料 | 第130页 |
| ·方法 | 第130-132页 |
| 2 结果 | 第132-137页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第132-133页 |
| ·鲍Rbx1的原核表达、纯化及鉴定 | 第133-134页 |
| ·多克隆抗体制备及Western blot分析 | 第134-135页 |
| ·组织细胞内定位 | 第135-136页 |
| ·体外自身泛素化修饰 | 第136-137页 |
| 3 讨论 | 第137-139页 |
| (四)九孔鲍胸腺肽β的克隆鉴定与表达分析 | 第139-148页 |
| 第十三章 九孔鲍胸腺肽β的克隆鉴定与表达分析 | 第139-148页 |
| 1 材料和方法 | 第139-140页 |
| ·材料 | 第139-140页 |
| ·方法 | 第140页 |
| 2 结果 | 第140-146页 |
| ·鲍胸腺肽β的全长克隆 | 第140-141页 |
| ·鲍胸腺肽β的序列分析 | 第141-144页 |
| ·鲍胸腺肽β的组织表达分布及在免疫反应中的作用 | 第144-146页 |
| 4 讨论 | 第146-148页 |
| 全文小结 | 第148-151页 |
| 参考文献 | 第151-169页 |
| 个人简历 | 第169-170页 |
| 攻读博士期间发表的学术论文及研究成果 | 第170-171页 |
| 致谢 | 第171页 |
