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格尔德霉素和放线菌酮的生物合成研究

摘要第1-6页
Abstract第6-11页
第一章 文献综述第11-43页
   ·天然产物是药物及先导化合物的主要来源第11-15页
   ·链霉菌是活性天然产物宝库第15-20页
     ·链霉菌简介第15-16页
     ·链霉菌在抗生素开发利用中的重要地位第16-18页
     ·链霉菌是研究活性天然产物生物合成的理想材料第18-20页
   ·抗生素的生物合成第20-31页
     ·聚酮类化合物的生物合成第20-24页
     ·Ⅰ型PKS第24-27页
     ·Ⅱ型PKS第27-29页
     ·Ⅲ型PKS第29页
     ·AT-less type Ⅰ型PKS第29-31页
   ·格尔德霉素类化合物研究概况第31-37页
   ·放线菌酮类化合物研究概况第37-40页
   ·本研究的目的和意义第40-43页
第二章 格尔德霉素的生物合成研究第43-141页
   ·前言第43-44页
   ·材料与方法第44-78页
     ·格尔德霉素生物合成研究路线第44页
     ·菌株、质粒、引物、培养基和化学试剂第44-45页
     ·自溶链霉菌培养及菌种保藏第45页
     ·发酵及产物分析第45-47页
     ·自溶链霉菌及大肠杆菌相关分子生物学和遗传学操作第47-53页
     ·构建自溶链霉菌基因组文库第53-60页
     ·自溶链霉菌基因组文库的筛选第60-68页
     ·格尔德霉素生物合成基因簇序列的测定第68-71页
     ·自溶链霉菌相关基因的敲除第71-73页
     ·自溶链霉菌基因敲除突变株的互补第73-75页
     ·蛋白质表达及其生化特性分析第75-78页
   ·结果与分析第78-134页
     ·自溶链霉菌的培养第78页
     ·发酵及产物分析第78-81页
     ·自溶链霉菌的遗传操作第81-83页
     ·构建自溶链霉菌基因组文库第83-87页
     ·自溶链霉菌基因组文库的筛选第87-96页
     ·格尔德霉素生物合成基因簇序列的测定第96-97页
     ·自溶链霉菌格尔德霉素生物合成基因簇的基因功能注释第97-104页
     ·自溶链霉菌相关基因的敲除第104-116页
     ·自溶链霉菌基因敲除突变株的互补第116-121页
     ·自溶链霉菌野生型和突变株的发酵第121-123页
     ·发酵产物的鉴定第123-127页
     ·蛋白质表达及其生化特性分析第127-134页
   ·讨论与小结第134-141页
     ·讨论第134-139页
     ·小结第139-141页
第三章 放线菌酮的生物合成研究第141-191页
   ·前言第141-142页
   ·材料与方法第142-150页
     ·放线菌酮生物合成研究路线第142页
     ·菌株、质粒、引物、培养基和化学试剂第142-143页
     ·链霉菌YIM 56141培养及菌种保藏第143页
     ·发酵及产物分析第143-145页
     ·链霉菌YIM 56141及大肠杆菌相关分子生物学和遗传学操作第145页
     ·构建链霉菌YIM 56141基因组文库第145页
     ·链霉菌YIM 56141基因组文库的筛选第145页
     ·放线菌酮和放线菌酚生物合成基因簇序列的测定第145-147页
     ·链霉菌YIM 56141相关基因的敲除第147-148页
     ·链霉菌YIM 56141基因敲除突变株的互补第148-149页
     ·蛋白质表达及其所催化反应的初步研究第149-150页
   ·结果与分析第150-179页
     ·链霉菌YIM 56141的培养第150页
     ·发酵及产物分析第150-153页
     ·链霉菌YIM 56141的遗传操作第153-155页
     ·构建链霉菌YIM 56141基因组文库第155页
     ·链霉菌YIM 56141基因组文库的筛选第155-158页
     ·放线菌酮和放线菌酚生物合成基因簇序列的测定第158-161页
     ·链霉菌YIM 56141放线菌酮和放线菌酚生物合成基因簇的基因功能注释第161-166页
     ·链霉菌YIM 56141相关基因的敲除第166-173页
     ·链霉菌YIM 56141野生型和突变株的发酵第173-175页
     ·链霉菌YIM 56141基因敲除突变株的互补第175-177页
     ·ChxH蛋白质表达及所催化反应的初步研究第177-179页
   ·讨论与小结第179-191页
     ·讨论第179-189页
     ·小结第189-191页
第四章 总结与展望第191-193页
   ·总结第191页
   ·创新点第191-192页
   ·展望第192-193页
附录第193-207页
参考文献第207-213页
科研成果第213-214页
致谢第214页

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