摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-7页 |
1 绪论 | 第7-17页 |
·胰腺 | 第7-12页 |
·胰腺的构成 | 第7页 |
·胰腺的发育 | 第7-12页 |
·miRNAs | 第12-16页 |
·miRNAs的经典定义 | 第12页 |
·动物中miRNAs的生物合成与作用机制 | 第12-13页 |
·miRNAs的鉴定方法 | 第13-15页 |
·胰腺miRNAs的研究进展 | 第15-16页 |
·本研究目的及意义 | 第16-17页 |
2 预测可调控Ptf1a表达的miRNAs | 第17-22页 |
·预测所用数据库 | 第17页 |
·基于miRanda预测算法的miRBase靶基因数据库 | 第17页 |
·基于TargetScanS预测算法的TargetScan数据库 | 第17页 |
·预测结果 | 第17-18页 |
·讨论 | 第18-21页 |
·本章小结 | 第21-22页 |
3 三种miRNAs对Ptf1a表达的调控作用 | 第22-33页 |
·试验材料 | 第22页 |
·主要仪器与药品 | 第22-24页 |
·主要仪器设备 | 第22页 |
·主要试验器械的清洗和消毒 | 第22-23页 |
·试剂药品及溶液配制 | 第23-24页 |
·PCR引物 | 第24页 |
·试验方法 | 第24-29页 |
·成体小鼠胰腺总RNA提取与反转录 | 第24-25页 |
·转染载体的构建 | 第25-28页 |
·双荧光素酶报告系统检测 | 第28-29页 |
·实验结果 | 第29-31页 |
·成体小鼠胰腺总RNA提取与反转录 | 第29页 |
·转染载体的构建 | 第29-30页 |
·双荧光素酶报告系统检测 | 第30-31页 |
·讨论 | 第31-32页 |
·本章小结 | 第32-33页 |
4 小鼠胰腺发育中miRNAs和Ptf1a的表达模式 | 第33-43页 |
·实验动物 | 第33页 |
·主要仪器与药品 | 第33-34页 |
·主要仪器设备 | 第33页 |
·药品与溶液 | 第33-34页 |
·试验方法 | 第34-36页 |
·胎鼠胰腺取材 | 第34页 |
·胎鼠胰腺总的R_NA提取 | 第34页 |
·DNase Ⅰ消化 | 第34-35页 |
·RNA聚腺苷酸化(加PolyA尾) | 第35页 |
·胎鼠胰腺总RNA的反转录与实时定量PCR | 第35-36页 |
·免疫荧光染色 | 第36页 |
·实验结果 | 第36-40页 |
·胎鼠胰腺总RNA的提取与反转录 | 第36-37页 |
·实时定量PCR | 第37页 |
·免疫荧光染色 | 第37-40页 |
·讨论 | 第40-42页 |
·本章小结 | 第42-43页 |
5 小鼠胰腺发育中Ptf1a相关的分子调控通路 | 第43-45页 |
·主要工具与方法 | 第43页 |
·结果 | 第43页 |
·讨论 | 第43-44页 |
·本章小结 | 第44-45页 |
6 结论 | 第45-46页 |
7 参考文献 | 第46-58页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第58-59页 |
致谢 | 第59-60页 |