| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 本文缩写符号 | 第7-10页 |
| 一、前言 | 第10-18页 |
| ·富含脯氨酸蛋白质的研究进展 | 第10-16页 |
| ·富含脯氨酸蛋白质的结构和分类 | 第10-11页 |
| ·富含脯氨酸蛋白质的表达 | 第11-13页 |
| ·富含脯氨酸蛋白质的功能 | 第13-15页 |
| ·富含脯氨酸蛋白质亚细胞定位研究 | 第15-16页 |
| ·农杆菌介导的棉花转基因技术研究进展 | 第16页 |
| ·研究目的和意义 | 第16-18页 |
| 二、材料与方法 | 第18-32页 |
| ·实验材料 | 第18-20页 |
| ·植物材料 | 第18页 |
| ·菌种和质粒 | 第18页 |
| ·化学试剂 | 第18页 |
| ·工具酶 | 第18页 |
| ·常用储存液 | 第18页 |
| ·常用缓冲液 | 第18-19页 |
| ·培养基 | 第19-20页 |
| ·棉花总RNA的提取试剂 | 第20页 |
| ·PCR分析扩增试剂 | 第20页 |
| ·仪器设备 | 第20页 |
| ·实验方法 | 第20-32页 |
| ·激素和NaCl及干旱处理离体棉花10DPA胚珠和纤维 | 第20-21页 |
| ·CTAB法提取棉花纤维RNA和Real-time RT-PCR分析 | 第21页 |
| ·载体构建实验方法 | 第21-24页 |
| ·GhPRP5启动子的表达活性分析方法 | 第24-26页 |
| ·亚细胞定位实验方法 | 第26-27页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备及质粒转化农杆菌 | 第27页 |
| ·浸花法转化拟南芥及阳性植株的筛选 | 第27-28页 |
| ·转基因拟南芥的RNA提取 | 第28页 |
| ·农杆菌介导的棉花转化 | 第28-30页 |
| ·转基因棉花的鉴定 | 第30-32页 |
| 三、实验结果 | 第32-42页 |
| ·GhPRP3和GhPRP5基因表达受激素和干旱胁迫调控 | 第32页 |
| ·GhPRP5启动子的表达活性分析 | 第32-34页 |
| ·pGhPRP5-GUS表达载体的构建 | 第32-33页 |
| ·启动子指导GUS在Arabidopsis的表皮毛中表达 | 第33-34页 |
| ·GhPRP3和GhPRP5的亚细胞定位 | 第34-36页 |
| ·GhPRP3::eGFP和GhPRP5::eGFP融合表达载体的构建及检测 | 第34页 |
| ·GhPRP3和GhPRP5定位在细胞质膜和细胞质中 | 第34-36页 |
| ·GhPRP3和GhPRP5过量表达载体的构建和拟南芥的转化及转基因拟南芥的鉴定 | 第36-38页 |
| ·过量表达载体的构建 | 第36-37页 |
| ·PBI121-GhPRP3和PBI121-GhPRP5过量表达载体转化农杆菌 | 第37页 |
| ·GhPRP3和GhPRP5转化拟南芥 | 第37页 |
| ·转基因拟南芥小苗的表达鉴定 | 第37-38页 |
| ·GhPRP3和GhPRP5基因的RNAi载体转化棉花 | 第38-41页 |
| ·外植体和农杆菌的共培养时期 | 第38页 |
| ·愈伤组织的诱导和抗性筛选 | 第38-39页 |
| ·胚性愈伤组织和体细胞胚诱导及体细胞胚的产生 | 第39页 |
| ·小苗的生长和移栽 | 第39-40页 |
| ·转化效率统计 | 第40-41页 |
| ·棉花转基因植株的PCR鉴定 | 第41-42页 |
| 四、讨论 | 第42-47页 |
| ·GhPRP3和GhPRP5基因表达受激素和外界胁迫调控 | 第42页 |
| ·GhPRP3和GhPRP5可能在纤维的发育中发挥重要的功能 | 第42-44页 |
| ·GhPRP3和GhPRP5可能编码一种具有新的功能的富含脯氨酸蛋白 | 第44页 |
| ·诸因素对转基因棉花组织培养的影响 | 第44-45页 |
| ·转基因作物的研究及应用 | 第45-47页 |
| 参考文献 | 第47-54页 |
| 硕士期间发表文章情况 | 第54-55页 |
| 致谢 | 第55页 |
