| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-21页 |
| ·肝脏急性损伤研究现状以及治疗手段 | 第11-12页 |
| ·CCl_4 肝脏急性损伤模型的机理和病理变化 | 第12-14页 |
| ·CCl_4造成肝损伤的机理 | 第12页 |
| ·病理学变化 | 第12-14页 |
| ·趋化因子CXCL14 的研究现状 | 第14-19页 |
| ·趋化因子家族与肝脏疾病 | 第14-16页 |
| ·CXCL14 研究现状 | 第16-19页 |
| ·立题依据和研究目标 | 第19-21页 |
| 第二章 cxcl14 在多种肝损伤中的表达谱研究 | 第21-39页 |
| ·引文 | 第21-22页 |
| ·实验方法 | 第22-29页 |
| ·动物模型建立 | 第22-24页 |
| ·肝脏cDNA 的制备以及定量PCR | 第24-27页 |
| ·肝脏组织切片制备以及组织学染色，观察 | 第27-29页 |
| ·实验结果 | 第29-36页 |
| ·实验动物模型建立 | 第29-31页 |
| ·定量PCR 实验的质量控制 | 第31页 |
| ·CXCL14 在不同肝脏病模型中的表达量变化 | 第31-36页 |
| ·讨论 | 第36-39页 |
| 第三章 CXCL14 对 CCl_4诱导的急性肝损伤的影响 | 第39-67页 |
| ·引言 | 第39-40页 |
| ·实验方法 | 第40-47页 |
| ·CCl_4肝脏损伤模型建立 | 第40页 |
| ·质粒介导的CXCL14 过表达对CCl_4急性损伤的影响 | 第40-44页 |
| ·CXCL14 抗体中和对CCl_4诱导的急性肝损伤的影响 | 第44-45页 |
| ·CXCL14 抗体中和对CCl_4诱导的急性肝衰竭的保护作用 | 第45-46页 |
| ·血液学检测及肝脏组织学检测 | 第46页 |
| ·统计学方法 | 第46-47页 |
| ·实验结果 | 第47-62页 |
| ·质粒介导的CXCL14 过表达实验 | 第47页 |
| ·CXCL14-pcDNA 在A549 细胞中的表达 | 第47-48页 |
| ·质粒肌肉电转染的检测 | 第48-50页 |
| ·过量表达CXCL14 加剧肝脏损伤并且抑制肝细胞再生 | 第50-54页 |
| ·CXCL14 免疫中和对CCl_4诱导的肝脏损伤的保护作用 | 第54-62页 |
| ·讨论 | 第62-67页 |
| 第四章 重组小鼠 CXCL14 蛋白的表达与纯化 | 第67-89页 |
| ·引言 | 第67-68页 |
| ·实验方法 | 第68-74页 |
| ·重组小鼠CXCL14 原核表达质粒构建 | 第68页 |
| ·rmCXCL14 诱导表达 | 第68-69页 |
| ·rmCXCL14 的大量表达及亲和纯化 | 第69页 |
| ·蛋白的还原与重折叠 | 第69-70页 |
| ·离子交换纯化 | 第70-71页 |
| ·SDS-PAGE 和Western blot 检测 | 第71页 |
| ·反相高效液相色谱(RP-HPLC)鉴定蛋白质纯度 | 第71-72页 |
| ·内毒素活性测定 | 第72页 |
| ·rmCXCL14 融合蛋白标签的切除 | 第72页 |
| ·CXCL14 蛋白质活性测定 | 第72-74页 |
| ·实验结果 | 第74-85页 |
| ·CXCL14 原核表达质粒构建 | 第74-75页 |
| ·CXCL14 重组蛋白表达条件的摸索 | 第75-76页 |
| ·镍离子亲和纯化rmCXCL14 | 第76-79页 |
| ·离子交换纯化 | 第79-81页 |
| ·rmCXCL14 纯度、内毒素含量和生物活性测定 | 第81-83页 |
| ·rmCXCL14 融合蛋白His-tag 的切除 | 第83-85页 |
| ·讨论 | 第85-89页 |
| 第五章 CXCL14 和 CXCR 受体家族的相互作用 | 第89-101页 |
| ·引言 | 第89-90页 |
| ·实验方法 | 第90-95页 |
| ·CXCL14 蛋白~(125)I 标记 | 第90-92页 |
| ·CXC 受体家族基因克隆以及真核表达载体构建 | 第92-93页 |
| ·CXCR 家族在NIH3T3 细胞中的表达 | 第93-94页 |
| ·竞争结合实验 | 第94-95页 |
| ·实验结果 | 第95-99页 |
| ·CXCR 家族成员基因克隆以及表达载体构建 | 第95-97页 |
| ·CXCR 家族在NIH3T3 细胞中的表达 | 第97页 |
| ·竞争性结初步实验 | 第97-99页 |
| ·讨论 | 第99-101页 |
| 第六章 结论与展望 | 第101-103页 |
| ·结论 | 第101页 |
| ·展望 | 第101-103页 |
| 参考文献 | 第103-110页 |
| 附录1 实验材料与仪器 | 第110-114页 |
| 附录2 缩略词中英文对照 | 第114-116页 |
| 附录3 常用溶液配制 | 第116-120页 |
| 附录4 小鼠cxcl14 m RNA 序列 | 第120-121页 |
| 附录5 肝脏cxcl14 基因表达的性别差异 | 第121-122页 |
| 附录6 基于Sybr green 染料的定量PCR 优化策略 | 第122-127页 |
| 附录7 CXCL14 的分子进化分析 | 第127-130页 |
| 附录8 质粒图谱 | 第130-133页 |
| 致谢 | 第133-134页 |
| 攻读博士期间发表的文章 | 第134-137页 |
| 附件 | 第137页 |
