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利用超声波介导花粉转化法获得转植酸酶玉米的研究

中文摘要第1-6页
Abstract第6-8页
目录第8-11页
第一章 文献综述第11-29页
   ·前言第11-13页
   ·植酸酶的概述第13-18页
     ·植酸的发现第13-14页
     ·植酸在畜牧生产中的危害第14-15页
     ·植酸酶的基本特性及生物功能第15-16页
     ·植酸酶的来源第16-17页
     ·植酸酶在饲料工业中的应用第17-18页
   ·转植酸酶基因玉米的研究现状第18-19页
   ·植物遗传转化方法第19-26页
     ·基因枪法第20-21页
     ·农杆菌介导法第21-22页
     ·PEG 法第22-23页
     ·显微注射法第23页
     ·电击法和激光法第23-24页
     ·花粉管通道法第24-25页
     ·超声波介导花粉法第25-26页
   ·转基因植物与抗除草剂基因的筛选第26-27页
   ·本研究的目的与意义第27-29页
第二章 实验材料与方法第29-43页
   ·实验材料第29-30页
     ·供试植物材料第29页
     ·质粒载体第29-30页
     ·试剂及试剂盒第30页
     ·实验仪器第30页
   ·质粒提取第30-32页
     ·提取步骤第30-32页
     ·纯度和浓度的确定第32页
   ·酶切体系第32-33页
   ·琼脂糖凝胶目的片段回收第33-34页
   ·超声波介导花粉进行玉米转化的方法第34-36页
     ·预备实验第34-36页
       ·花粉采集和悬浮液浓度的测定第34-35页
       ·超声波介导的参数选择第35-36页
     ·花粉的转化与授粉第36页
   ·玉米植株叶片的总 DNA 提取第36-38页
     ·试剂配制第36-37页
     ·提取步骤第37-38页
   ·提取玉米叶片总 RNA第38-39页
     ·提取总 RNA 方法第38-39页
     ·RT-PCR第39页
   ·转基因玉米的检测第39-43页
     ·除草剂喷洒实验第39-40页
     ·除草剂试纸条检测第40-41页
     ·bar 基因和 phy 基因的 PCR 检测第41-42页
     ·phy 基因的 RT-PCR 检测第42-43页
第三章 结果与分析第43-54页
   ·载体改造第43-45页
   ·超声波介导花粉转化玉米第45-48页
     ·花粉萌发实验:蔗糖溶液浓度的选择第45-46页
     ·种子的结实情况第46-48页
   ·转基因玉米检测第48-54页
     ·除草剂喷洒实验第48-49页
     ·除草剂试纸条检测第49-50页
     ·bar 基因和 phy 基因的 PCR 检测第50-52页
     ·phy 基因的 RT-PCR 检测第52-54页
第四章 结论第54-55页
第五章 讨论第55-61页
   ·关于花粉介导花粉转化第55-56页
   ·超声波介导花粉转化法的优势第56-57页
   ·进一步需要论证的问题第57-58页
   ·玉米花粉介导法转基因成活率、成株率、转化率提高的相应对策第58-59页
   ·展望第59-61页
     ·超声波介导花粉转化技术应用展望第59-60页
     ·利用转基因玉米生产植酸酶的前景第60-61页
参考文献第61-70页
作者简介及科研成果第70-71页
致谢第71页

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