摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-11页 |
1 引言 | 第11-14页 |
2 材料和方法 | 第14-32页 |
·供试拟南芥、载体及菌株 | 第14页 |
·供试培养基、营养液和转化介质的配制 | 第14-15页 |
·供试试剂 | 第15-16页 |
·主要仪器 | 第16页 |
·拟南芥的种植 | 第16页 |
·拟南芥基因组DNA、总RNA 的提取及CDNA 的合成 | 第16-18页 |
·拟南芥基因组DNA 提取 | 第16-17页 |
·拟南芥总RNA 的提取及cDNA 的合成 | 第17-18页 |
·BRG1 基因的原核表达及其对灰葡萄孢的作用 | 第18-23页 |
·BRG1 基因的克隆 | 第18-20页 |
·表达载体的构建 | 第20-21页 |
·目的蛋白的表达 | 第21-22页 |
·表达蛋白的Western Blotting 分析 | 第22页 |
·pET-28a(+)/BRG1 融合蛋白的抑菌实验 | 第22-23页 |
·BRG1 突变体的鉴定及BRG1 基因的功能分析 | 第23-27页 |
·brg1 突变体的鉴定 | 第23-26页 |
·brg1 突变体的抗病性测定 | 第26页 |
·brg1 突变体的非生物胁迫试验 | 第26页 |
·brg1 突变体的RT-PCR 分析 | 第26-27页 |
·BRG1 基因的互补回复和超表达试验 | 第27-32页 |
·BRG1 基因表达载体的构建 | 第28-29页 |
·农杆菌的转化 | 第29-30页 |
·拟南芥的遗传转化 | 第30页 |
·转基因阳性苗的筛选 | 第30页 |
·转基因植株的PCR 鉴定 | 第30-31页 |
·转基因植株的RT-PCR 鉴定 | 第31页 |
·转基因株系的表型验证 | 第31-32页 |
3 结果与分析 | 第32-44页 |
·BRG1 基因的原核表达及其对灰葡萄孢的作用 | 第32-35页 |
·BRG1 基因的PCR 扩增 | 第32页 |
·pMD19/BRG1 和pET28a(+)双酶切的结果 | 第32-33页 |
·重组质粒的PCR 检测 | 第33页 |
·目的蛋白的表达 | 第33-34页 |
·BRG1 基因对灰葡萄孢萌发的作用 | 第34-35页 |
·BRG1 突变体的鉴定及BRG1 基因的功能分析 | 第35-40页 |
·brg1 突变体的PCR 鉴定 | 第35页 |
·brg1 突变体中T-DNA 的插入拷贝数分析 | 第35-36页 |
·brg1 突变体的RT-PCR 鉴定 | 第36-37页 |
·brg1 突变体的抗病性测定 | 第37页 |
·brg1 突变体的非生物胁迫试验 | 第37-39页 |
·brg1 突变体的RT-PCR 分析 | 第39-40页 |
·BRG1 基因的互补回复和超表达试验 | 第40-44页 |
·BRG1 基因表达载体的构建及拟南芥转化 | 第40-41页 |
·转基因阳性苗的筛选 | 第41页 |
·转基因株系的分子鉴定 | 第41-42页 |
·转基因株系的RT-PCR 验证 | 第42页 |
·转基因株系的表型验证 | 第42-44页 |
4 讨论 | 第44-47页 |
·BRG1 基因与拟南芥抗灰葡萄孢之间的关系 | 第44页 |
·BRG1 基因与抗病防御途径之间的关系 | 第44-45页 |
·下一步工作 | 第45-47页 |
·BRG1 基因所属抗病途径的确定 | 第45页 |
·双向电泳技术获得差异表达蛋白 | 第45-46页 |
·酵母双杂交技术筛选BRG1 蛋白的互作蛋白 | 第46-47页 |
5 结论 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-54页 |
在读期间发表的学术论文 | 第54-55页 |
作者简历 | 第55-56页 |
致谢 | 第56-57页 |