| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 第1章 前言 | 第9-18页 |
| 1.1 课题背景 | 第9-17页 |
| 1.1.1 β-内酰胺酶的概述 | 第9-12页 |
| 1.1.2 β-内酰胺酶的作用机理 | 第12-14页 |
| 1.1.3 β-内酰胺类荧光探针的应用 | 第14-17页 |
| 1.2 课题思路 | 第17-18页 |
| 第2章 基于碳青霉烯荧光探针的金属β-内酰胺酶抑制剂筛选方法 | 第18-54页 |
| 2.1. 课题背景 | 第18-26页 |
| 2.1.1 金属β-内酰胺酶抑制剂研究进展 | 第18-23页 |
| 2.1.2 金属β-内酰胺酶抑制剂筛选方法的研究进展 | 第23-26页 |
| 2.2 课题思路 | 第26页 |
| 2.3 实验结果与讨论 | 第26-42页 |
| 2.3.1 NDM-1,IMP-1,CphA的表达纯化 | 第26-27页 |
| 2.3.2 pBAD-L1质粒的构建 | 第27-30页 |
| 2.3.3 L1蛋白的表达纯化 | 第30-31页 |
| 2.3.4 L1酶活性检测 | 第31-32页 |
| 2.3.5 不同底物对金属β-内酰胺酶的光学性质研究 | 第32-35页 |
| 2.3.6 金属β-内酰胺酶对CPC-1的动力学参数 | 第35-37页 |
| 2.3.7 CPC-1对金属β-内酰胺酶的检测灵敏度 | 第37页 |
| 2.3.8 金属β-内酰胺酶抑制剂筛选方法研究 | 第37-42页 |
| 2.4 本章小结 | 第42页 |
| 2.5 实验用品 | 第42-46页 |
| 2.5.1 实验材料、试剂及主要仪器 | 第42-44页 |
| 2.5.2 试剂配制 | 第44-46页 |
| 2.6 实验方法和操作步骤 | 第46-54页 |
| 2.6.1 pBAD-L1质粒的构建 | 第46-49页 |
| 2.6.2 L1蛋白的表达纯化 | 第49-51页 |
| 2.6.3 L1酶活性检测 | 第51页 |
| 2.6.4 不同底物对金属β-内酰胺酶的光学性质研究 | 第51页 |
| 2.6.5 金属β-内酰胺酶对CPC-1的动力学参数 | 第51页 |
| 2.6.6 CPC-1对金属β-内酰胺酶的检测灵敏度 | 第51-52页 |
| 2.6.7 金属β-内酰胺酶抑制剂筛选方法研究 | 第52-54页 |
| 第3章 碳青霉烯探针在β-内酰胺酶化学标签的应用 | 第54-75页 |
| 3.1 课题背景 | 第54-59页 |
| 3.2 课题思路 | 第59-60页 |
| 3.3 实验结果与讨论 | 第60-69页 |
| 3.3.1 CB-1与TEM-1β-内酰胺酶的荧光响应 | 第60-62页 |
| 3.3.2 CB-1和TEM-1β-内酰胺酶的结合能力研究 | 第62-64页 |
| 3.3.3 EGFR-TEM-1质粒的构建 | 第64-66页 |
| 3.3.4 验证TEM-1β-内酰胺酶标签的可行性 | 第66-67页 |
| 3.3.5 CB-1作为β-内酰胺酶标签配体在活体细胞荧光成像的应用 | 第67-69页 |
| 3.4 本章小结 | 第69页 |
| 3.5 实验用品 | 第69-70页 |
| 3.6 实验方法和操作步骤 | 第70-75页 |
| 3.6.1 EGFR-TEM-1质粒的构建 | 第70-71页 |
| 3.6.2 CB-1与TEM-1β-内酰胺酶的荧光响应 | 第71-72页 |
| 3.6.3 CB-1和TEM-1β-内酰胺酶的结合能力研究 | 第72页 |
| 3.6.4 细胞实验 | 第72-75页 |
| 第4章 全文总结与展望 | 第75-76页 |
| 4.1 全文总结 | 第75页 |
| 4.2 展望 | 第75-76页 |
| 参考文献 | 第76-83页 |
| 致谢 | 第83-84页 |
| 发表论文 | 第84页 |
