摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-10页 |
第一章 绪论 | 第10-27页 |
·概述---功能性甜味剂 | 第10页 |
·稀有糖 | 第10-13页 |
·稀有糖的定义 | 第10页 |
·稀有糖的研究进展 | 第10-13页 |
·D-塔格糖 | 第13-17页 |
·D-塔格糖的结构和理化性质 | 第13-14页 |
·D-塔格糖的代谢途径 | 第14-15页 |
·D-塔格糖的生理功能 | 第15-16页 |
·D-塔格糖的生物法制备 | 第16-17页 |
·L-阿拉伯糖异构酶的研究进展 | 第17-21页 |
·L-阿拉伯糖异构酶的微生物来源 | 第17-18页 |
·L-阿拉伯糖异构酶的性质 | 第18-20页 |
·L-阿拉伯糖异构酶的蛋白质基因工程 | 第20-21页 |
·L-阿拉伯糖异构酶与D-塔格糖的生产 | 第21页 |
·本课题的立题依据和意义 | 第21-23页 |
·本课题研究思路与主要内容 | 第23页 |
参考文献 | 第23-27页 |
第二章 A. cellulolytics L-阿拉伯糖异构酶基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达 | 第27-50页 |
·前言 | 第27-28页 |
·材料与方法 | 第28-36页 |
·菌种与质粒 | 第28页 |
·培养基 | 第28页 |
·主要试剂 | 第28-29页 |
·主要仪器 | 第29页 |
·L-阿拉伯糖异构酶基因的克隆 | 第29-32页 |
·L-阿拉伯糖异构酶基因在大肠杆菌中的表达 | 第32-36页 |
·结果与讨论 | 第36-47页 |
·L-阿拉伯糖异构酶基因的扩增 | 第36-37页 |
·PCR 产物的克隆 | 第37-39页 |
·L-阿拉伯糖异构酶基因的测序及序列分析 | 第39-42页 |
·L-阿拉伯糖异构酶表达质粒的构建 | 第42-43页 |
·表达产物的SDS-PAGE 分析 | 第43-44页 |
·诱导表达条件的优化 | 第44-46页 |
·重组细胞催化D-半乳糖异构化反应 | 第46-47页 |
·本章小结 | 第47页 |
参考文献 | 第47-50页 |
第三章 重组L-阿拉伯糖异构酶的分离、纯化及活性研究 | 第50-59页 |
·前言 | 第50-51页 |
·材料与方法 | 第51-53页 |
·菌种及保藏方法 | 第51页 |
·主要实验材料 | 第51页 |
·主要实验仪器 | 第51页 |
·主要实验方法 | 第51-53页 |
·结果与讨论 | 第53-57页 |
·Q-Sepharose Fast Folw 离子交换层析 | 第53页 |
·Superdex 200 (10/300 GL) 凝胶过滤层析 | 第53-54页 |
·Superdex 200 凝胶色谱确定L-阿拉伯糖异构酶分子量 | 第54-55页 |
·纯化结果及SDS-PAGE 电泳鉴定 | 第55-57页 |
·本章小结 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-59页 |
第四章 L-阿拉伯糖异构酶的酶学性质研究 | 第59-70页 |
·前言 | 第59页 |
·材料与方法 | 第59-61页 |
·实验材料 | 第59页 |
·主要实验仪器 | 第59页 |
·主要实验方法 | 第59-61页 |
·结果与讨论 | 第61-67页 |
·最适温度及最适pH | 第61-62页 |
·金属离子对酶活的影响 | 第62-64页 |
·热稳定性及pH 稳定性 | 第64-65页 |
·L-阿拉伯糖异构酶的底物特异性研究 | 第65页 |
·L-阿拉伯糖异构酶的反应动力学常数 | 第65-67页 |
·本章小结 | 第67-68页 |
参考文献 | 第68-70页 |
第五章 A. cellulolytics L-阿拉伯糖异构酶的催化机理初探及分子改造 | 第70-85页 |
·前言 | 第70页 |
·材料与方法 | 第70-75页 |
·菌种与质粒 | 第70-71页 |
·主要试剂 | 第71页 |
·主要仪器 | 第71页 |
·主要实验方法 | 第71-75页 |
·结果与讨论 | 第75-83页 |
·L-阿拉伯糖异构酶的结构分析及活性位点预测 | 第75-77页 |
·改造位点的确定 | 第77-78页 |
·L-阿拉伯糖异构酶基因定点突变PCR 扩增 | 第78-79页 |
·L-阿拉伯糖异构酶突变体基因的测序及序列分析 | 第79页 |
·L-阿拉伯糖异构酶突变体表达质粒的构建 | 第79-80页 |
·表达产物的SDS-PAGE 分析 | 第80-81页 |
·突变体酶纯化结果SDS-PAGE 电泳鉴定 | 第81页 |
·突变体酶催化性质研究 | 第81-83页 |
·本章小结 | 第83页 |
参考文献 | 第83-85页 |
论文主要结论 | 第85-87页 |
论文创新点 | 第87-88页 |
致谢 | 第88-89页 |
附录:作者在攻读博士学位期间发表的论文 | 第89页 |