摘要 | 第3-9页 |
abstract | 第9-17页 |
中英文缩略词表 | 第21-23页 |
第1章 引言 | 第23-38页 |
1.1 肌萎缩侧索硬化概述 | 第23-25页 |
1.1.1 临床表现 | 第23-24页 |
1.1.2 诊断 | 第24页 |
1.1.3 病因和治疗 | 第24-25页 |
1.2 人类肌萎缩侧索硬化的疾病相关蛋白 | 第25-29页 |
1.2.1 人体体液里的疾病相关蛋白 | 第27-28页 |
1.2.2 人体组织里的疾病相关蛋白 | 第28-29页 |
1.3 SOD1-G93A转基因小鼠及其疾病相关蛋白 | 第29-32页 |
1.4 ArylsulfataseB与肌萎缩侧索硬化的潜在相关性 | 第32-33页 |
1.5 蛋白质组学方法概述 | 第33-37页 |
1.5.1 基本流程和技术 | 第33-35页 |
1.5.2 iTRAQ方法简介 | 第35-37页 |
1.6 本课题的研究内容 | 第37-38页 |
第2章 应用iTRAQ技术筛查肌萎缩侧索硬化差异蛋白 | 第38-79页 |
2.1 材料 | 第38-39页 |
2.1.1 实验动物 | 第38页 |
2.1.2 主要试剂 | 第38页 |
2.1.3 主要仪器 | 第38-39页 |
2.2 方法 | 第39-50页 |
2.2.1 转基因小鼠模型的构建、筛选及实验分组 | 第40-44页 |
2.2.2 标本取材与处理 | 第44页 |
2.2.3 蛋白质的提取 | 第44-45页 |
2.2.4 还原烷基化 | 第45页 |
2.2.5 蛋白质的质量检测 | 第45-46页 |
2.2.6 酶解 | 第46页 |
2.2.7 应用iTRAQ技术进行蛋白组学分析 | 第46-47页 |
2.2.8 生物信息学分析 | 第47-50页 |
2.3 结果 | 第50-73页 |
2.3.1 PCR检测结果 | 第50-51页 |
2.3.2 蛋白质质量检测结果 | 第51-52页 |
2.3.3 生物信息学分析结果 | 第52-73页 |
2.4 讨论 | 第73-77页 |
2.5 结论 | 第77-79页 |
第3章 肌萎缩侧索硬化差异蛋白Arylsulfatase B的验证 | 第79-112页 |
3.1 材料 | 第79-83页 |
3.1.1 实验动物 | 第79页 |
3.1.2 主要试剂 | 第79-80页 |
3.1.3 主要仪器设备 | 第80-81页 |
3.1.4 主要试剂的配制 | 第81-83页 |
3.2 方法 | 第83-90页 |
3.2.1 转基因小鼠模型的构建、筛选 | 第83-84页 |
3.2.2 蛋白质印迹法(Western blot)验证Arylsulfatase B在小鼠脊髓中的 | 第84页 |
表达 | 第84-87页 |
3.2.3 免疫荧光法分析ArylsulfataseB在小鼠脊髓中的表达和定位 | 第87-89页 |
3.2.4 统计分析和图像处理 | 第89-90页 |
3.3 结果 | 第90-108页 |
3.3.1 转基因小鼠的筛选检测结果 | 第90页 |
3.3.2 差异蛋白Arylsulfatase B的iTRAQ分析结果 | 第90-92页 |
3.3.3 Western blot实验的验证结果 | 第92-94页 |
3.3.4 免疫荧光单标实验结果 | 第94-105页 |
3.3.5 免疫荧光双标实验结果 | 第105-108页 |
3.4 讨论 | 第108-110页 |
3.5 结论 | 第110-112页 |
全文总结 | 第112-114页 |
致谢 | 第114-115页 |
参考文献 | 第115-123页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第123-124页 |
综述 | 第124-139页 |
参考文献 | 第133-139页 |