| 缩略语表 | 第6-9页 |
| 中文摘要 | 第9-14页 |
| ABSTRACT | 第14-19页 |
| 前言 | 第20-23页 |
| 文献回顾 | 第23-46页 |
| 第一部分 LNCRNA NCRAN-L在肝癌中表达及相关意义 | 第46-63页 |
| 引言 | 第46页 |
| 1. 材料 | 第46-50页 |
| 1.1 标本收集 | 第46-47页 |
| 1.2 选用细胞系 | 第47页 |
| 1.3 主要试剂 | 第47-48页 |
| 1.4 引物序列 | 第48-49页 |
| 1.5 主要仪器 | 第49-50页 |
| 2. 方法 | 第50-53页 |
| 2.1 细胞培养相关 | 第50-51页 |
| 2.2 提取组织与细胞总RNA | 第51-52页 |
| 2.3 实时定量RT-PCR | 第52-53页 |
| 2.4 统计学分析 | 第53页 |
| 3. 结果 | 第53-60页 |
| 3.1 提取细胞系RNA样品质控检测 | 第53-54页 |
| 3.2 肝癌相关lncRNAs的筛选 | 第54-55页 |
| 3.3 LncRNA ncRAN-L在肝癌组织中的表达检测 | 第55-56页 |
| 3.4 ncRAN-L在肝癌组织中表达水平与临床病理特征关系 | 第56-58页 |
| 3.5 ncRAN-L在肝癌组织中表达水平与患者预后关系 | 第58-60页 |
| 4. 讨论 | 第60-63页 |
| 第二部分 LNCRNAS NCRAN-L对肝癌细胞生物学行为的影响 | 第63-80页 |
| 引言 | 第63页 |
| 1 材料 | 第63-64页 |
| 1.1 选用细胞系 | 第63页 |
| 1.2 主要试剂 | 第63-64页 |
| 1.3 主要仪器 | 第64页 |
| 2 方法 | 第64-71页 |
| 2.1 siRNA oligo细胞转染 | 第64-65页 |
| 2.2 RNA提取、cDNA合成、Realtime PCR | 第65页 |
| 2.3 MTT实验 | 第65-66页 |
| 2.4 平板克隆形成实验 | 第66页 |
| 2.5 划痕实验 | 第66页 |
| 2.6 Ed U检测DNA复制 | 第66-67页 |
| 2.7 流式检测细胞凋亡 | 第67-68页 |
| 2.8 Westernblot实验 | 第68-69页 |
| 2.9 建立lncRNA-ncRAN-L稳定表达下调的细胞系 | 第69-70页 |
| 2.10 裸鼠皮下成瘤实验 | 第70页 |
| 2.11 统计学分析 | 第70-71页 |
| 3 结果 | 第71-76页 |
| 3.1 siRNA转染肝癌细胞效率验证 | 第71页 |
| 3.2 慢病毒包装ncRAN-L稳转HepG2细胞系鉴定 | 第71-72页 |
| 3.3 调控ncRAN-L对肝癌细胞增殖的影响 | 第72-73页 |
| 3.4 调控ncRAN-L对肝癌细胞凋亡的影响 | 第73-75页 |
| 3.5 调控ncRAN-L对肝癌细胞侵袭的影响 | 第75-76页 |
| 3.6 调控ncRAN-L体内水平对肝癌细胞HepG2增殖的影响 | 第76页 |
| 4 讨论 | 第76-80页 |
| 第三部分 LNCRNA NCRAN-L调控肝癌细胞增殖及凋亡的分子机制研究 | 第80-96页 |
| 引言 | 第80页 |
| 1 材料 | 第80-81页 |
| 1.1 细胞系 | 第80页 |
| 1.2 主要试剂 | 第80-81页 |
| 1.3 主要仪器 | 第81页 |
| 2 方法 | 第81-85页 |
| 2.0 细胞培养 | 第81页 |
| 2.1 MTT实验 | 第81页 |
| 2.2 流式检测凋亡 | 第81-82页 |
| 2.3 Westernblot实验 | 第82页 |
| 2.4 细胞转染 | 第82-84页 |
| 2.5 免疫组化染色 | 第84-85页 |
| 2.6 总RNA提取、cDNA合成、Realtime PCR | 第85页 |
| 2.7 Ed U实验 | 第85页 |
| 2.8 统计分析 | 第85页 |
| 3 结果 | 第85-93页 |
| 3.1 ST6GALNAC2可能是ncRAN-L下游的靶基因之一 | 第85-86页 |
| 3.2 肝癌组织及细胞系中ST6GALNAC2的表达与ncRAN-L相关性 | 第86-89页 |
| 3.3 过表达ST6GALNAC2对肝癌细胞增殖凋亡影响 | 第89-90页 |
| 3.4 ncRAN-L/ST6GALNAC2在肝癌细胞中参与PI3K/Akt信号通路 | 第90-91页 |
| 3.5 ncRAN-L与ST6GALNAC2调控PI3K/Akt信号通路影响肝癌细胞增殖凋亡 | 第91-93页 |
| 4 讨论 | 第93-96页 |
| 小结 | 第96-97页 |
| 参考文献 | 第97-113页 |
| 个人简历和研究成果 | 第113-114页 |
| 致谢 | 第114页 |
