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沙门氏菌产生的microRNA样片段Sal-1抑制宿主细胞内iNOS蛋白表达以促进其细胞内生存

缩略词表第5-8页
摘要第8-11页
ABSTRACT第11-13页
第一章 研究背景综述第14-65页
    一、沙门氏菌第15-28页
        1. 沙门氏菌简介第15页
        2. 沙门氏菌感染第15-17页
        3. 沙门氏菌的感染机制——Ⅲ型分泌系统(T3SS)第17-23页
        4. 沙门氏菌与外界交流的重要工具——外膜囊泡(OMVs)第23-28页
    二、一氧化氮(NO)与免疫反应第28-35页
        1. 概述第28-29页
        2. NO的产生——一氧化氮合成酶(NOS)第29-32页
        3. NO在免疫反应中的作用第32-34页
            3.1. NO与微生物感染第32-34页
            3.2. NO在其他免疫反应中的作用第34页
        4. 总结第34-35页
    三、微小核糖核酸(MICRORNA)第35-49页
        1. microRNA简介第35页
        2. microRNA的生物合成第35-40页
            2.1. 动物miRNA合成的经典通路第35-37页
            2.2. 动物miRNA合成的非经典通路第37-40页
            2.3. 植物miRNA的合成第40页
        3. microRNA的作用机制第40-42页
            3.1. miRNA介导的mRNA特异性切割第40-41页
            3.2. miRNA介导的转录后调控第41-42页
        4. 分泌microRNA第42-46页
            4.1. 分泌miRNA的发现第42-43页
            4.2. 分泌miRNA的包装与分泌机制第43-44页
            4.3. 分泌miRNA被受体细胞摄取及其参与调控机体的生理病理过程第44-46页
        5. microRNA的跨界调控作用第46-49页
    参考文献第49-65页
第二章 实验部分第65-133页
    一、引言第66-67页
    二、实验材料与方法第67-92页
        1. 实验材料第67-70页
            1.1. 菌株、细胞系及模式动物第67-68页
            1.2. 主要试剂(表2.2.1)第68-70页
            1.3. 主要仪器设备(表2.2.2)第70页
        2. 实验方法第70-92页
            2.1. 细胞培养第70-71页
            2.2. 沙门氏菌侵染细胞实验第71-72页
            2.3. 沙门氏菌侵染能力的测定第72页
            2.4. RNA提取及qRT-PCR定量检测第72-74页
            2.5. Solexa测序第74-76页
            2.6. 转染细胞用除内毒素质粒的提取第76-77页
            2.7. 细胞转染第77-78页
            2.8. 免疫沉淀(IP)反应第78-79页
            2.9. 沙门氏菌来源的RNA分子Pri-Sal-1全长cDNA的获得及体外转录第79-80页
            2.10. Northern Blot第80-82页
            2.11. 沙门氏菌OMV的提取第82-83页
            2.12. Dot Blot第83-84页
            2.13. 生物信息学预测Sal-1的靶基因以及荧光素酶检测实验第84-86页
            2.14. Western Blot第86-88页
            2.15. 沙门氏菌突变株SE2472△Sal-1(1,2,5,7)的构建第88-89页
            2.16. 组织免疫荧光实验第89-90页
            2.17. 体内实验第90-92页
            2.18. 数据的处理与统计分析第92页
    三、实验结果第92-122页
        1. 经沙门氏菌感染的哺乳动物细胞中可发现沙门氏菌来源的小分子RNA第92-95页
        2. Sal-1的细胞内成熟需要细胞内Argonaute 2(Ago 2)蛋白的参与第95-105页
        3. 沙门氏菌将Sal-1包裹在OMV中送入宿主细胞第105-107页
        4. Sal-1能促进沙门氏菌在细胞内的生存率第107-108页
        5. Sal-1靶向宿主细胞内的诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)第108-116页
        6. Sal-1通过抑制结肠上皮细胞中iNOS的表达促进沙门氏菌感染小鼠的过程第116-122页
    四、结论第122页
    五、讨论第122-130页
    参考文献第130-133页
攻读博士学位期间发表论文第133-134页
致谢第134-136页

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