| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第一章 引言 | 第11-20页 |
| 1 氟喹诺酮类药物在水产养殖中的应用 | 第11-13页 |
| 1.1 氟喹诺酮类药物的结构特点 | 第11-12页 |
| 1.2 氟喹诺酮类药物在防治水产疾病中的应用 | 第12-13页 |
| 2 氟喹诺酮类药物在应用中存在的耐药问题 | 第13-16页 |
| 3 以中草药控制细菌耐药 | 第16-19页 |
| 3.1 中草药对细菌的抑制作用 | 第16页 |
| 3.2 中草药及其有效成分对耐药性的控制作用 | 第16-17页 |
| 3.3 转录组学在研究中草药作用机制中的应用 | 第17-19页 |
| 4 研究目的、意义及研究内容 | 第19-20页 |
| 4.1 研究目的和意义 | 第19页 |
| 4.2 研究内容 | 第19-20页 |
| 第二章 连翘对恩诺沙星耐药性延缓作用的研究 | 第20-29页 |
| 1 材料和方法 | 第20-23页 |
| 1.1 材料 | 第20-21页 |
| 1.1.1 菌株 | 第20页 |
| 1.1.2 实验药物 | 第20-21页 |
| 1.1.3 培养基 | 第21页 |
| 1.2 实验方法 | 第21-23页 |
| 1.2.1 抗菌药物的筛选 | 第21页 |
| 1.2.2 五种抗生素对SS的最小抑菌浓度(MIC)的测定 | 第21-22页 |
| 1.2.3 耐药菌株的诱导 | 第22页 |
| 1.2.4 对SS和RS进行中草药诱导及筛选出具有延缓菌株耐药性的中草药 | 第22页 |
| 1.2.5 中草药有效成分的提取 | 第22页 |
| 1.2.6 中草药对RS耐药菌株的诱导 | 第22页 |
| 1.2.7 延缓耐药性验证实验 | 第22-23页 |
| 2 结果与讨论 | 第23-27页 |
| 2.1 中草药的初步筛选 | 第23-26页 |
| 2.2 延缓耐药性中草药的验证 | 第26-27页 |
| 3 讨论 | 第27-29页 |
| 3.1 嗜水气单胞菌对恩诺沙星等喹诺酮类药物耐药性现状 | 第27-28页 |
| 3.2 延缓耐药性的方法 | 第28-29页 |
| 第三章 连翘对嗜水气单胞菌耐药菌转录组学分析 | 第29-45页 |
| 1 材料 | 第29-30页 |
| 1.1 菌株来源 | 第29页 |
| 1.2 药品与试剂 | 第29-30页 |
| 1.3 仪器 | 第30页 |
| 2 方法 | 第30-33页 |
| 2.1 连翘提取液的制备 | 第30页 |
| 2.2 连翘对嗜水气单胞菌耐药菌转录组测序和结果分析 | 第30-32页 |
| 2.2.1 实验处理 | 第30页 |
| 2.2.2 细菌总RNA的提取 | 第30页 |
| 2.2.3 转录组测序 | 第30-31页 |
| 2.2.4 基因表达及差异表达基因分析 | 第31页 |
| 2.2.5 差异基因功能及代谢途径分析显著性富集分析 | 第31-32页 |
| 2.3 RT-qPCR验证 | 第32-33页 |
| 2.3.1 引物设计及合成 | 第32-33页 |
| 2.3.2 反应条件 | 第33页 |
| 3 结果 | 第33-43页 |
| 3.1 连翘提取液对嗜水气单胞菌耐药菌转录组学分析 | 第33-38页 |
| 3.1.1 碱基分布 | 第34页 |
| 3.1.2 碱基质量分布 | 第34-35页 |
| 3.1.3 差异基因分析 | 第35-38页 |
| 3.2 连翘对嗜水气单胞菌耐药菌代谢途径的分析 | 第38-42页 |
| 3.2.1 氨基酸代谢途径 | 第39-40页 |
| 3.2.2 糖酵解 | 第40-41页 |
| 3.2.3 三羧酸循环 | 第41页 |
| 3.2.4 连翘对耐药菌应急性影响 | 第41-42页 |
| 3.3 差异基因qPCR验证结果 | 第42-43页 |
| 4 讨论 | 第43-45页 |
| 第四章 连翘酯苷A对恩诺沙星药物外排作用的研究 | 第45-54页 |
| 1 实验材料与方法 | 第46-48页 |
| 1.1 实验材料 | 第46页 |
| 1.2 连翘有效成分溶液 | 第46页 |
| 1.3 连翘及其与恩诺沙星联合作用对耐药菌MIC的测定 | 第46页 |
| 1.4 嗜水气单胞菌生长曲线的测定 | 第46-47页 |
| 1.5 不同浓度的连翘有效成分对耐药菌的延缓效果 | 第47页 |
| 1.6 菌株差异基因的定量分析 | 第47-48页 |
| 1.6.1 引物设计与合成 | 第47-48页 |
| 1.6.2 菌液总RNA的提取 | 第48页 |
| 1.6.3 反转录反应 | 第48页 |
| 1.6.4 qPCR检测 | 第48页 |
| 1.6.5 连翘酯苷A对嗜水气单胞菌耐药菌作用 | 第48页 |
| 2 结果与分析 | 第48-52页 |
| 2.1 连翘与恩诺沙星联合作用对耐药菌MIC的测定 | 第48-49页 |
| 2.2 连翘与恩诺沙星对嗜水气单胞菌耐药菌生长曲线的影响 | 第49页 |
| 2.3 连翘不同有效成分抑菌效果 | 第49-50页 |
| 2.4 连翘酯苷A作用前后耐药基因表达量的变化 | 第50-52页 |
| 3 讨论 | 第52-54页 |
| 3.1 连翘及其与恩诺沙星联合作用对耐药菌的影响 | 第52页 |
| 3.2 连翘有效成分对耐药菌的作用效果对比 | 第52页 |
| 3.3 连翘酯苷A对耐药菌RND外排泵的作用 | 第52-54页 |
| 全文总结 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-64页 |
| 附录 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65页 |
