| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 缩略语表 | 第13-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-24页 |
| 1.1 白蚁 | 第14-16页 |
| 1.1.1 白蚁及共生菌 | 第14页 |
| 1.1.2 黄翅大白蚁 | 第14-15页 |
| 1.1.3 Dysgonomonas | 第15-16页 |
| 1.2 木聚糖酶 | 第16-18页 |
| 1.2.1 木聚糖酶概述 | 第16-17页 |
| 1.2.2 木聚糖酶的应用 | 第17-18页 |
| 1.2.3 白蚁肠道共生细菌木聚糖酶的研究进展 | 第18页 |
| 1.3 β-1,4-内切葡聚糖酶 | 第18-20页 |
| 1.3.1 β-1,4-内切葡聚糖酶概述 | 第18-19页 |
| 1.3.2 白蚁肠道共生菌来源β-1,4-内切葡聚糖酶的研究进展 | 第19-20页 |
| 1.4 木质纤维素酶的协同作用 | 第20-21页 |
| 1.4.1 木质纤维素酶系组成 | 第20-21页 |
| 1.4.2 木质纤维素酶共表达作用以及协同作用的研究 | 第21页 |
| 1.5 本文的立题依据和研究内容 | 第21-24页 |
| 1.5.1 立题依据 | 第21-22页 |
| 1.5.2 研究内容 | 第22-24页 |
| 第二章 D.macrotermitis木聚糖酶基因的克隆与表达 | 第24-40页 |
| 2.1 引言 | 第24页 |
| 2.2 实验材料、试剂及仪器 | 第24页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第24页 |
| 2.2.2 实验试剂与仪器设备 | 第24页 |
| 2.3 实验方法与步骤 | 第24-29页 |
| 2.3.1 基因组分析 | 第24页 |
| 2.3.2 进化树分析 | 第24-25页 |
| 2.3.3 分子克隆与载体的构建 | 第25-26页 |
| 2.3.4 平板验证酶活力 | 第26页 |
| 2.3.5 诱导表达及纯化 | 第26-27页 |
| 2.3.6 酶学性质测定方法 | 第27-29页 |
| 2.4 实验结果 | 第29-38页 |
| 2.4.1 生物信息学分析Dysxyns | 第29-31页 |
| 2.4.2 在大肠杆菌中表达Dysxyns | 第31-33页 |
| 2.4.3 酶学性质分析 | 第33-38页 |
| 2.5 小结与讨论 | 第38-40页 |
| 第三章 D.macrotermitis β-1,4-内切葡聚糖酶基因的克隆与表达 | 第40-51页 |
| 3.1 引言 | 第40页 |
| 3.2 实验材料、试剂及仪器 | 第40页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第40页 |
| 3.2.2 实验试剂与仪器 | 第40页 |
| 3.3 实验方法与步骤 | 第40-43页 |
| 3.3.1 基因组分析 | 第40-41页 |
| 3.3.2 进化树分析以及同源建模分析 | 第41页 |
| 3.3.3 分子克隆与载体的构建 | 第41页 |
| 3.3.4 平板验证酶活力 | 第41-42页 |
| 3.3.5 诱导表达及纯化 | 第42页 |
| 3.3.6 酶学性质测定方法 | 第42-43页 |
| 3.4 实验结果 | 第43-49页 |
| 3.4.1 生物信息学分析Dysengs | 第43-44页 |
| 3.4.2 在大肠杆菌JM109中表达Dysengs | 第44-46页 |
| 3.4.3 酶学性质分析 | 第46-49页 |
| 3.5 小结与讨论 | 第49-51页 |
| 第四章 白蚁及其共生菌来源四种木质纤维素酶基因的共表达 | 第51-66页 |
| 4.1 引言 | 第51页 |
| 4.2 实验材料、试剂与仪器 | 第51-52页 |
| 4.2.1 菌株与质粒 | 第51页 |
| 4.2.2 实验材料、仪器 | 第51-52页 |
| 4.3 实验方法与步骤 | 第52-57页 |
| 4.3.1 构建表达载体获得重组子 | 第52-54页 |
| 4.3.2 Co-BGEG、Co-CotAXyl和Co-BECX在E.coli中的表达 | 第54页 |
| 4.3.3 标准曲线的测定 | 第54-55页 |
| 4.3.4 酶活力测定方法 | 第55-56页 |
| 4.3.5 底物处理 | 第56页 |
| 4.3.6 白蚁及肠道微生物来源木质纤维素酶的协同作用研究 | 第56-57页 |
| 4.4 实验结果 | 第57-63页 |
| 4.4.1 表达载体的构建 | 第57-58页 |
| 4.4.2 Co-BGEG、Co-CotAXyl和Co-BECX在E.coli中的表达 | 第58-59页 |
| 4.4.3 标准曲线的测定 | 第59-60页 |
| 4.4.4 白蚁及其肠道微生物来源的木质纤维素酶的协同作用 | 第60-63页 |
| 4.5 小结与讨论 | 第63-66页 |
| 第五章 白蚁类芽孢杆菌由来XylMb1基因在毕赤酵母中表达 | 第66-73页 |
| 5.1 引言 | 第66页 |
| 5.2 实验材料、试剂及仪器 | 第66页 |
| 5.2.1 实验材料 | 第66页 |
| 5.2.2 实验试剂与仪器 | 第66页 |
| 5.3 实验方法与步骤 | 第66-68页 |
| 5.3.1 pPICZαA-Mb1xy1在P.pastoris GS115中的表达 | 第66-67页 |
| 5.3.2 重组蛋白XylMb1的活性测定 | 第67页 |
| 5.3.3 重组蛋白Xy1Mb1糖基化修饰分析 | 第67-68页 |
| 5.4 实验结果 | 第68-71页 |
| 5.4.1 pPICZαA-XylMb1在P.pastoris GS115中的表达 | 第68-69页 |
| 5.4.2 pPICZαA-XylMb1在P.pastoris GS115的酶活验证 | 第69-70页 |
| 5.4.3 重组蛋白XylMb1糖基化修饰分析 | 第70-71页 |
| 5.5 小结与讨论 | 第71-73页 |
| 第六章 总结与展望 | 第73-76页 |
| 参考文献 | 第76-83页 |
| 附录 | 第83-89页 |
| 附录一 相关试剂 | 第83-84页 |
| 附录二 所用仪器 | 第84-85页 |
| 附录三 所用相关培养基 | 第85-87页 |
| 附录四 所用相关溶液 | 第87-88页 |
| 附录五 制备毕赤酵母感受态细胞 | 第88-89页 |
| 致谢 | 第89-90页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第90-91页 |
| 附件 | 第91页 |
