| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-12页 |
| 本文縮写符号 | 第12-16页 |
| 一、引言 | 第16-24页 |
| ·植物PRPs研究进展 | 第16-18页 |
| ·植物PRPs的类型和结构 | 第16-17页 |
| ·植物PRPs的表达和生物学功能 | 第17-18页 |
| ·植物细胞壁发育相关的功能基因 | 第18-22页 |
| ·立题依据和本文的研究意义 | 第22-24页 |
| 二、材料与方法 | 第24-44页 |
| ·实验材料 | 第24-27页 |
| ·植物材料 | 第24页 |
| ·质粒及菌种 | 第24页 |
| ·工具酶 | 第24页 |
| ·化学试剂 | 第24页 |
| ·常用储液 | 第24-25页 |
| ·常用缓冲液 | 第25页 |
| ·培养基 | 第25-26页 |
| ·棉花gDNA及总RNA的提取试剂 | 第26页 |
| ·酵母双杂交实验所用试剂 | 第26页 |
| ·PCR扩增试剂 | 第26-27页 |
| ·仪器设备 | 第27页 |
| ·实验方法 | 第27-44页 |
| ·PCR扩增目的基因的cDNA序列 | 第27-28页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳检测及DNA片段回收 | 第28页 |
| ·CaCl_2法制备大肠杆菌的感受态细胞 | 第28-29页 |
| ·连接产物的转化 | 第29页 |
| ·碱裂解法少量提取质粒 | 第29-30页 |
| ·双酶切反应 | 第30页 |
| ·载体构建 | 第30页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第30-31页 |
| ·农杆菌介导的烟草转化 | 第31-32页 |
| ·转基因拟南芥gDNA提取 | 第32页 |
| ·CTAB法小量提取棉花和烟草叶片的gDNA | 第32-33页 |
| ·转基因植株的鉴定 | 第33-34页 |
| ·GhPRP5启动子的表达活性分析 | 第34页 |
| ·拟南芥RNA的提取 | 第34-35页 |
| ·CTAB法提取棉花纤维的RNA和RT-PCR分析 | 第35-37页 |
| ·过量表达GhPRP5拟南芥的表型分析 | 第37-39页 |
| ·盐和ABA胁迫处理过量表达GhPRP5拟南芥 | 第39-40页 |
| ·酵母双杂交筛选10 dpa纤维cDNA文库 | 第40-44页 |
| 三、实验结果 | 第44-70页 |
| ·GhPRP5启动子的表达活性分析 | 第44-48页 |
| ·GhPRP5启动子的序列分析 | 第44-45页 |
| ·proGhPRP5-pBI101载体构建和烟草的转化 | 第45页 |
| ·转基因拟南芥和烟草的鉴定 | 第45-46页 |
| ·GhPRP5启动子的表达模式分析 | 第46-48页 |
| ·过量表达GhPRP5拟南芥的表型分析 | 第48-54页 |
| ·过量表达GhPRP5拟南芥在mRNA水平的鉴定 | 第48-49页 |
| ·过量表达GhPRP5拟南芥具有矮小的表型 | 第49-52页 |
| ·过量表达GhPRP5影响拟南芥植株的细胞大小 | 第52-53页 |
| ·过量表达GhPRP5拟南芥中细胞壁相关基因的表达分析 | 第53-54页 |
| ·GhPRP5-RNAi转基因棉花的分析 | 第54-59页 |
| ·T0代GhPRP5-RNAi棉花的分析 | 第54-55页 |
| ·T1代GhPRP5-RNAi棉花的分析 | 第55-56页 |
| ·T2代GhPRP5-RNAi棉花的PCR检测 | 第56页 |
| ·T2代GhPRP5-RNAi棉花的表型分析 | 第56-58页 |
| ·Real-time RT-PCR分析纤维发育相关基因的表达情况 | 第58-59页 |
| ·酵母双杂交筛选GhPRP5的互作蛋白 | 第59-64页 |
| ·pGBKT7-GhPRP5载体的构建 | 第59-60页 |
| ·pGBKT7-GhPRP5酵母转化子的鉴定 | 第60页 |
| ·BD-GhPRP5酵母融合蛋白的自激活和毒性检测 | 第60-61页 |
| ·棉花10 dpa纤维cDNA文库的筛选及阳性克隆的鉴定 | 第61-62页 |
| ·Mating效率的统计 | 第62页 |
| ·阳性克隆的测序结果分析 | 第62-63页 |
| ·小量Mating回转验证相互作用 | 第63-64页 |
| ·双分子荧光互补载体的构建 | 第64-65页 |
| ·过量表达GhPRP5拟南芥对盐和ABA的耐受性分析 | 第65-70页 |
| ·过量表达GhPRP5增强了拟南芥对盐的敏感性 | 第65-67页 |
| ·过量表达GhPRP5增强了拟南芥对ABA的敏感性 | 第67-68页 |
| ·盐胁迫和ABA胁迫应答基因的表达分析 | 第68-70页 |
| 四、讨论 | 第70-76页 |
| ·抑制GhPRP5基因表达促进棉纤维细胞伸长发育 | 第70-72页 |
| ·GhPRP5在纤维伸长过程中起着负调控的作用 | 第70-71页 |
| ·GhPRP5通过HRGP调控网络来调节纤维细胞壁的结构 | 第71-72页 |
| ·GhPRP5启动子可用于纤维品质的改良 | 第72-73页 |
| ·过量表达GhPRP5导致拟南芥植株矮小表型的分析 | 第73-74页 |
| ·过量表达GhPRP5增强了拟南芥对盐和ABA的敏感性 | 第74-76页 |
| 参考文献 | 第76-83页 |
| 在校期间发表的论文及参加的学术会议 | 第83-84页 |
| 致谢 | 第84-85页 |
