| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 缩略语表 | 第10-11页 |
| 第一章 百脉根SERKs蛋白与共生受体激酶SymRK的互作机制研究 | 第11-46页 |
| 1 前言 | 第11-24页 |
| 1.1 共生固氮的意义 | 第11页 |
| 1.2 根瘤的形成过程 | 第11-13页 |
| 1.3 共生信号转导途径中的分子机制 | 第13-14页 |
| 1.4 植物LRR型类受体激酶 | 第14-21页 |
| 1.4.1 共生受体激酶SymRK | 第15页 |
| 1.4.2 SymRK相互作用蛋白的研究进展 | 第15-17页 |
| 1.4.3 LRR型类受体激酶SERKs家族的结构与功能 | 第17-21页 |
| 1.5 共生与免疫 | 第21-22页 |
| 1.5.1 植物免疫系统 | 第21-22页 |
| 1.5.2 共生过程中的免疫抑制 | 第22页 |
| 1.6 研究目的及意义 | 第22-24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-33页 |
| 2.1 材料 | 第24-29页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第24页 |
| 2.1.2 质粒与菌株 | 第24-26页 |
| 2.1.3 主要生化试剂和培养基 | 第26-29页 |
| 2.2 方法 | 第29-33页 |
| 2.2.1 目标蛋白的诱导 | 第29页 |
| 2.2.2 融合蛋白的表达 | 第29-31页 |
| 2.2.3 体外pull-down实验 | 第31页 |
| 2.2.4 蛋白激酶的自磷酸化和底物水平磷酸化 | 第31页 |
| 2.2.5 植物总基因组DNA的抽提 | 第31-32页 |
| 2.2.6 三引物PCR法鉴定突变体的类型 | 第32-33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-44页 |
| 3.1 LjBAK1/SERK3、LjSERK2基因和蛋白的结构特征 | 第33-35页 |
| 3.2 百脉根SERKs激酶与SymRK蛋白的相互作用 | 第35-44页 |
| 3.2.1 克隆的构建 | 第35-36页 |
| 3.2.2 目的蛋白的诱导表达与纯化 | 第36-37页 |
| 3.2.3 LjBAK1SERK3和LjSERK2编码有功能的蛋白激酶 | 第37-38页 |
| 3.2.4 LjBAK1/SERK3、LjSERK2与SymRK之间的相互磷酸化作用 | 第38-40页 |
| 3.2.5 LjSERK2、LjBAK1/SERK3与SymRK之间的相互作用 | 第40-41页 |
| 3.2.6 LjBAK1/SERK3突变体的研究 | 第41-44页 |
| 4 小结 | 第44-46页 |
| 第二章 CRISPR/Cas9系统在百脉根中的应用及结瘤因子受体的编辑 | 第46-59页 |
| 1 前言 | 第46-50页 |
| 1.1 基因组编辑技术 | 第46-49页 |
| 1.1.1 锌指核酸酶介导的基因组编辑 | 第47页 |
| 1.1.2 TALENs介导的基因组编辑 | 第47-48页 |
| 1.1.3 CRISPR/Cas9系统在植物基因组编辑中的应用 | 第48-49页 |
| 1.2 研究目的及意义 | 第49-50页 |
| 2 材料与方法 | 第50-55页 |
| 2.1 材料 | 第50-55页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第50页 |
| 2.1.2 菌株与载体 | 第50-51页 |
| 2.1.3 主要生化试剂和培养基 | 第51页 |
| 2.1.4 Gibson反应液的配置 | 第51-52页 |
| 2.2.5 百脉根基因组靶位点sgRNA的设计 | 第52-54页 |
| 2.1.8 基因组DNA的提取及目的基因靶位点的突变检测 | 第54-55页 |
| 3 结果与分析 | 第55-58页 |
| 3.1 CRISPR/Cas9系统在豆科植物百脉根中的应用 | 第55-58页 |
| 3.1.1 CRISPR/Cas9系统毛根转化克隆的构建 | 第55页 |
| 3.1.2 CRISPR/Cas9毛根转化植株的鉴定 | 第55-56页 |
| 3.1.3 CRISPR/Cas9系统对豆科植物NFR1基因靶位点的编辑 | 第56-58页 |
| 4 小结 | 第58-59页 |
| 第三章 全文总结、讨论与展望 | 第59-63页 |
| 1 全文总结 | 第59-61页 |
| 1.1 百脉根SERKs蛋白与共生受体激酶SymRK的互作机制研究 | 第59-60页 |
| 1.2 CRISPR/Cas9系统在百脉根中的应用及结瘤因子受体的编辑 | 第60-61页 |
| 2 讨论与展望 | 第61-63页 |
| 2.1 百脉根SERKs蛋白与共生受体激酶SymRK的互作机制研究 | 第61页 |
| 2.2 CRISPR/Cas9系统在百脉根中的应用及结瘤因子受体的编辑 | 第61-63页 |
| 参考文献 | 第63-70页 |
| 附录一:本研究所用引物 | 第70-72页 |
| 致谢 | 第72页 |
