| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 第1章 引言 | 第10-19页 |
| 1.1 植物细胞质雄性不育机理研究意义 | 第10页 |
| 1.2 细胞质雄性不育的类型 | 第10-12页 |
| 1.2.1 根据遗传特性分类 | 第11页 |
| 1.2.2 根据败育花粉的形态及败育时期分类 | 第11-12页 |
| 1.2.3 根据细胞质的来源和不育细胞质的恢保关系分类 | 第12页 |
| 1.3 细胞质雄性不育与线粒体基因组 | 第12页 |
| 1.4 CMS基因结构特点 | 第12-14页 |
| 1.4.1 CMS基因中的ATP合成酶序列 | 第13页 |
| 1.4.2 CMS基因中的细胞色素氧化酶序列 | 第13页 |
| 1.4.3 CMS基因中的未知序列 | 第13-14页 |
| 1.5 水稻CMS相关基因 | 第14-15页 |
| 1.6 CMS可能的调控机理假说 | 第15-16页 |
| 1.7 利用大肠杆菌系统研究水稻CMS基因 | 第16-18页 |
| 1.7.1 细菌内共生学说 | 第16-17页 |
| 1.7.2 细菌与线粒体的相似性 | 第17页 |
| 1.7.3 大肠杆菌中研究过的CMS基因 | 第17-18页 |
| 1.8 本文的研究目的及意义 | 第18-19页 |
| 第2章 材料与方法 | 第19-33页 |
| 2.1 实验材料与试剂 | 第19-21页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第19页 |
| 2.1.2 菌株与培养基 | 第19页 |
| 2.1.3 实验主要试剂配制 | 第19-21页 |
| 2.1.4 实验主要仪器设备 | 第21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-33页 |
| 2.2.1构建原核表达载体pET-28a-WA352、pET-28a-orf79 | 第21-26页 |
| 2.2.2 三种不育基因的原核表达检测 | 第26-28页 |
| 2.2.3 细菌生长曲线测定 | 第28页 |
| 2.2.4 细菌活菌落计数 | 第28页 |
| 2.2.5 CMS基因表达蛋白亚细胞定位 | 第28-29页 |
| 2.2.6 ROS含量检测 | 第29-30页 |
| 2.2.7 ATP含量检测 | 第30页 |
| 2.2.8 氧化呼吸关键酶活力测定 | 第30-33页 |
| 第3章 结果与分析 | 第33-50页 |
| 3.1 pET-28a-orf79、pET-28a-WA352原核表达载体构建 | 第33-37页 |
| 3.1.1 PCR扩增orf79、WA352基因 | 第33-34页 |
| 3.1.2 orf79、WA352、pET-28a质粒双酶切 | 第34页 |
| 3.1.3 重组质粒鉴定 | 第34-35页 |
| 3.1.4 pET-28a-orf79、pET-28a-WA352重组质粒测序验证 | 第35-37页 |
| 3.2 WesternBlot检测三种CMS基因在大肠杆菌中的表达 | 第37-40页 |
| 3.3 细菌生长曲线测定及活菌落对比 | 第40-41页 |
| 3.3.1 表达菌株与对照菌株生长曲线 | 第40-41页 |
| 3.3.2 稀释平板法检测活菌落数 | 第41页 |
| 3.4 三种CMS基因表达蛋白亚细胞定位 | 第41-43页 |
| 3.5 ROS含量检测 | 第43-46页 |
| 3.6 ATP含量检测 | 第46-47页 |
| 3.7 氧化呼吸关键酶活力测定 | 第47-50页 |
| 第4章 讨论 | 第50-53页 |
| 4.1 CMS基因表达抑制大肠杆菌的生长 | 第50-51页 |
| 4.2 CMS基因表达产物影响大肠杆菌的氧化呼吸 | 第51页 |
| 4.3 水稻三种CMS基因对大肠杆菌生长抑制机理的异同 | 第51-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-58页 |
| 附表 | 第58-60页 |
