摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
1 前言 | 第8-17页 |
1.1 免疫系统概述 | 第8-9页 |
1.2 脊椎动物造血作用 | 第9-13页 |
1.2.1 造血细胞的起源和发生发育 | 第9页 |
1.2.2 造血相关细胞因子概述 | 第9-13页 |
1.3 无脊椎动物造血作用 | 第13-16页 |
1.3.1 造血细胞的发生过程 | 第14页 |
1.3.2 造血相关细胞因子概述 | 第14-16页 |
1.4 研究目的与意义 | 第16-17页 |
2 材料与方法 | 第17-35页 |
2.1 实验材料 | 第17-20页 |
2.1.1 实验动物 | 第17页 |
2.1.2 主要试剂 | 第17-18页 |
2.1.3 引物信息 | 第18-19页 |
2.1.4 仪器设备 | 第19-20页 |
2.2 实验方法 | 第20-33页 |
2.2.1 中华绒螯蟹总RNA提取及cDNA文库构建 | 第20-21页 |
2.2.2 基因克隆与序列分析 | 第21-23页 |
2.2.3 重组蛋白原核表达及纯化 | 第23-26页 |
2.2.4 多克隆抗体制备 | 第26-27页 |
2.2.5 抗体特异性检验 | 第27-28页 |
2.2.6 亚细胞定位和组织定位 | 第28-30页 |
2.2.7 中华绒螯蟹菌刺激实验 | 第30页 |
2.2.8 中华绒螯蟹RNA干扰实验 | 第30-31页 |
2.2.9 循环血细胞计数 | 第31页 |
2.2.10 新生血细胞检测 | 第31-32页 |
2.2.11 实时荧光定量PCR检测 | 第32-33页 |
2.3 数据统计分析 | 第33-35页 |
3 实验结果 | 第35-42页 |
3.1 中华绒螯蟹GLP基因序列分析 | 第35-36页 |
3.2 中华绒螯蟹GLP基因组织分布 | 第36-37页 |
3.3 中华绒螯蟹GLP蛋白原核表达及定位 | 第37-39页 |
3.4 各类免疫刺激后中华绒螯蟹GLP基因在血细胞和造血组织中的时序表达 | 第39-40页 |
3.5 抽取血淋巴后中华绒螯蟹造血组织中GLP基因的时序表达 | 第40-41页 |
3.6 中华绒螯蟹GLP基因RNA干扰后新生血细胞和循环血细胞总数的变化 | 第41-42页 |
4 分析与讨论 | 第42-46页 |
4.1 中华绒螯蟹GLP基因的基本分子特征 | 第42-43页 |
4.2 中华绒螯蟹GLP基因参与中华绒螯蟹的免疫应答 | 第43页 |
4.3 中华绒螯蟹GLP基因参与调控中华绒螯蟹造血过程 | 第43-46页 |
5 结论 | 第46-48页 |
参考文献 | 第48-55页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第55-58页 |
致谢 | 第58页 |