摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
1 前言 | 第9-15页 |
1.1 刺参的简介 | 第9-10页 |
1.2 刺参的免疫系统 | 第10页 |
1.2.1 细胞免疫 | 第10页 |
1.2.2 体液免疫 | 第10页 |
1.3 凝集素 | 第10-12页 |
1.3.1 凝集素的分类 | 第11页 |
1.3.2 F-型凝集素的研究进展 | 第11-12页 |
1.4 自溶 | 第12-15页 |
1.4.1 半胱氨酸蛋白酶 | 第12页 |
1.4.2 半胱氨酸蛋白酶抑制剂 | 第12-13页 |
1.4.3 半胱氨酸蛋白酶抑制剂的分类和功能 | 第13-15页 |
2 材料与方法 | 第15-29页 |
2.1 实验材料 | 第15-18页 |
2.1.1 实验动物与菌株 | 第15页 |
2.1.2 主要试剂及仪器设备 | 第15-17页 |
2.1.3 引物信息 | 第17-18页 |
2.2 实验方法 | 第18-29页 |
2.2.1 组织取样及免疫刺激实验 | 第18页 |
2.2.2 刺参总RNA的提取及cDNA的合成 | 第18-19页 |
2.2.3 基因的克隆 | 第19-21页 |
2.2.4 序列分析 | 第21页 |
2.2.5 荧光实时定量PCR检测 | 第21-22页 |
2.2.6 重组表达、蛋白纯化及抗体的制备 | 第22-24页 |
2.2.7 Westernblot检测 | 第24-25页 |
2.2.8 重组蛋白的PAMPs结合活性检测 | 第25页 |
2.2.9 亚细胞定位 | 第25-26页 |
2.2.10 细菌凝集实验 | 第26页 |
2.2.11 菌结合实验 | 第26-27页 |
2.2.12 免疫组织化学鉴定 | 第27-29页 |
3 实验结果 | 第29-43页 |
3.1 一种广谱识别PAMPs的刺参岩藻糖凝集素 | 第29-36页 |
3.1.1 基因克隆和序列分析结果 | 第29页 |
3.1.2 同源比对和进化树构建 | 第29-31页 |
3.1.3 组织分布和灿烂弧菌刺激后的表达模式的变化 | 第31-32页 |
3.1.4 AjFL-1基因的重组表达及抗体特异性的检验 | 第32-33页 |
3.1.5 PAMPs的结合活性 | 第33-34页 |
3.1.6 亚细胞定位 | 第34-35页 |
3.1.7 细菌凝集活性 | 第35-36页 |
3.1.8 菌结合活性 | 第36页 |
3.2 半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因参与刺参免疫应答响应 | 第36-43页 |
3.2.1 AjCystain基因的克隆和序列分析 | 第36-37页 |
3.2.2 序列比对和进化树分析 | 第37-38页 |
3.2.3 AjCystain基因的组织分布和灿烂弧菌刺激后的表达模式的变化 | 第38-39页 |
3.2.4 AjFL-1基因的重组表达及抗体特异性的检验 | 第39-41页 |
3.2.5 AjCystain的蛋白水平的组织定位 | 第41-43页 |
4 讨论 | 第43-47页 |
4.1 一种广谱识别PAMPs的刺参岩藻糖凝集素 | 第43-45页 |
4.2 AjCystain参与刺参免疫应答的初步研究 | 第45-47页 |
5 结论 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-54页 |
攻读硕士期间发表的学术论文 | 第54-57页 |
致谢 | 第57页 |