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刺参免疫相关基因(AjFL-1和AjCystain)的克隆表达与功能分析

摘要第3-4页
Abstract第4-5页
1 前言第9-15页
    1.1 刺参的简介第9-10页
    1.2 刺参的免疫系统第10页
        1.2.1 细胞免疫第10页
        1.2.2 体液免疫第10页
    1.3 凝集素第10-12页
        1.3.1 凝集素的分类第11页
        1.3.2 F-型凝集素的研究进展第11-12页
    1.4 自溶第12-15页
        1.4.1 半胱氨酸蛋白酶第12页
        1.4.2 半胱氨酸蛋白酶抑制剂第12-13页
        1.4.3 半胱氨酸蛋白酶抑制剂的分类和功能第13-15页
2 材料与方法第15-29页
    2.1 实验材料第15-18页
        2.1.1 实验动物与菌株第15页
        2.1.2 主要试剂及仪器设备第15-17页
        2.1.3 引物信息第17-18页
    2.2 实验方法第18-29页
        2.2.1 组织取样及免疫刺激实验第18页
        2.2.2 刺参总RNA的提取及cDNA的合成第18-19页
        2.2.3 基因的克隆第19-21页
        2.2.4 序列分析第21页
        2.2.5 荧光实时定量PCR检测第21-22页
        2.2.6 重组表达、蛋白纯化及抗体的制备第22-24页
        2.2.7 Westernblot检测第24-25页
        2.2.8 重组蛋白的PAMPs结合活性检测第25页
        2.2.9 亚细胞定位第25-26页
        2.2.10 细菌凝集实验第26页
        2.2.11 菌结合实验第26-27页
        2.2.12 免疫组织化学鉴定第27-29页
3 实验结果第29-43页
    3.1 一种广谱识别PAMPs的刺参岩藻糖凝集素第29-36页
        3.1.1 基因克隆和序列分析结果第29页
        3.1.2 同源比对和进化树构建第29-31页
        3.1.3 组织分布和灿烂弧菌刺激后的表达模式的变化第31-32页
        3.1.4 AjFL-1基因的重组表达及抗体特异性的检验第32-33页
        3.1.5 PAMPs的结合活性第33-34页
        3.1.6 亚细胞定位第34-35页
        3.1.7 细菌凝集活性第35-36页
        3.1.8 菌结合活性第36页
    3.2 半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因参与刺参免疫应答响应第36-43页
        3.2.1 AjCystain基因的克隆和序列分析第36-37页
        3.2.2 序列比对和进化树分析第37-38页
        3.2.3 AjCystain基因的组织分布和灿烂弧菌刺激后的表达模式的变化第38-39页
        3.2.4 AjFL-1基因的重组表达及抗体特异性的检验第39-41页
        3.2.5 AjCystain的蛋白水平的组织定位第41-43页
4 讨论第43-47页
    4.1 一种广谱识别PAMPs的刺参岩藻糖凝集素第43-45页
    4.2 AjCystain参与刺参免疫应答的初步研究第45-47页
5 结论第47-48页
参考文献第48-54页
攻读硕士期间发表的学术论文第54-57页
致谢第57页

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