| 摘要 | 第4-6页 |
| abstract | 第6-7页 |
| 第一章 绪论 | 第12-22页 |
| 1.1 亲和色谱的分离提纯蛋白质的机理及其固定相的局限性 | 第12-13页 |
| 1.2 MONOLITH材料作为亲和色谱固定相的介绍 | 第13-15页 |
| 1.2.1 MONOLITH材料的概念和特点 | 第13页 |
| 1.2.2 MONOLITH材料的发展背景 | 第13-14页 |
| 1.2.3 MONOLITH材料的分类 | 第14-15页 |
| 1.3 高分子类型MONOLITH材料的制备方法 | 第15-18页 |
| 1.3.1 自由基聚合 | 第15页 |
| 1.3.2 活性自由基聚合 | 第15-16页 |
| 1.3.3 高内相乳液聚合 | 第16页 |
| 1.3.4 缩合聚合 | 第16-17页 |
| 1.3.5 冻凝胶 | 第17-18页 |
| 1.4 高分子类型MONOLITH材料作为亲和色谱的固定相用于蛋白质的分离 | 第18-21页 |
| 1.4.1 生物亲和色谱 | 第18-19页 |
| 1.4.2 免疫亲和色谱 | 第19页 |
| 1.4.3 染料配基亲和色谱 | 第19-20页 |
| 1.4.4 硼酸亲和色谱 | 第20页 |
| 1.4.5 固定金属离子亲和色谱 | 第20-21页 |
| 1.5 课题的提出及研究思路 | 第21-22页 |
| 第二章 醋酸纤维素和纤维素MONOLITH材料的制备及其表征 | 第22-33页 |
| 2.1 材料与仪器 | 第23页 |
| 2.1.1 主要试剂 | 第23页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第23页 |
| 2.2 实验与方法 | 第23-25页 |
| 2.2.1 TIPS方法制备CAMONOLITH材料 | 第23-24页 |
| 2.2.2 CeMONOLITH材料的制备 | 第24页 |
| 2.2.2.1 CAMONOLITH材料的碱性水解 | 第24页 |
| 2.2.2.2 最佳水解反应时间的选择 | 第24页 |
| 2.2.3 TIPS方法的制备条件对MONOLITH材料内部结构的调控 | 第24-25页 |
| 2.2.3.1 CA浓度的影响 | 第25页 |
| 2.2.3.2 CA分子量的影响 | 第25页 |
| 2.2.3.3 混合溶剂组成比例的影响 | 第25页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第25-32页 |
| 2.3.1 CAMONOLITH材料的制备 | 第25-26页 |
| 2.3.2 CeMONOLITH材料的制备 | 第26-28页 |
| 2.3.2.1 CAMONOLITH材料的碱性水解 | 第26-27页 |
| 2.3.2.2 最佳水解反应时间的选择 | 第27-28页 |
| 2.3.3 CA和CeMONOLITH材料的表面积和孔径测定 | 第28页 |
| 2.3.4 TIPS方法的制备条件对MONOLITH材料内部结构的调控 | 第28-32页 |
| 2.3.4.1 聚合物浓度 | 第29-30页 |
| 2.3.4.2 CA的分子量 | 第30-31页 |
| 2.3.4.3 混合溶剂的组成比例 | 第31-32页 |
| 2.4 本章小结 | 第32-33页 |
| 第三章 纤维素MONOLITH材料的表面化学修饰和功能化 | 第33-48页 |
| 3.1 材料与仪器 | 第34-35页 |
| 3.1.1 主要试剂 | 第34页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第34-35页 |
| 3.2 实验部分 | 第35-38页 |
| 3.2.1 EDTA-CeMONOLITH材料的制备 | 第35页 |
| 3.2.2 NTA-CeMONOLITH材料的制备 | 第35页 |
| 3.2.3 反应温度对EDTA/NTA-CeMONOLITH材料内部结构形态的影响 | 第35-36页 |
| 3.2.4 反应时间对CeMONOLITH材料中EDTA/NTA引入率的影响 | 第36页 |
| 3.2.5 EDTA/NTA螯合配体含量的测定 | 第36页 |
| 3.2.6 不同金属离子的螯合吸附 | 第36-37页 |
| 3.2.7 金属离子含量的测定 | 第37-38页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第38-47页 |
| 3.3.1 EDTA-CeMONOLITH材料的制备 | 第38-39页 |
| 3.3.2 NTA-CeMONOLITH材料的制备 | 第39页 |
| 3.3.3 反应温度对EDTA/NTA-CeMONOLITH材料内部结构形态的影响 | 第39-40页 |
| 3.3.4 反应时间对CeMONOLITH材料中EDTA/NTA引入率的影响 | 第40-43页 |
| 3.3.4.1 EDTA/NTACeMONOLITH材料的FT-IR光谱 | 第40-42页 |
| 3.3.4.2 EDTA/NTACeMONOLITH材料的有机元素分析 | 第42-43页 |
| 3.3.5 不同金属离子螯合吸附的影响 | 第43-46页 |
| 3.3.5.1 金属离子标准曲线的制作 | 第43-44页 |
| 3.3.5.2 对不同金属离子的螯合能力的影响 | 第44页 |
| 3.3.5.3 对E.coli裂解液中His-tagTPL吸附性能的影响 | 第44-46页 |
| 3.3.6 对金属离子Ni2+吸附量的考察 | 第46-47页 |
| 3.4 本章小结 | 第47-48页 |
| 第四章 功能型纤维素MONOLITH材料用于His-tag蛋白质药物的分离纯化研究 | 第48-69页 |
| 4.1 实验与仪器 | 第49-50页 |
| 4.1.1 主要试剂 | 第49页 |
| 4.1.2 主要仪器 | 第49-50页 |
| 4.2 实验部分 | 第50-54页 |
| 4.2.1 对His-tagTPL模型蛋白亲和吸附和分离性能的考察 | 第50-52页 |
| 4.2.1.1 His-tagTPL纯度的测定 | 第51页 |
| 4.2.1.2 His-tagTPL构象的检测 | 第51-52页 |
| 4.2.1.3 His-tagTPL活性的检测 | 第52页 |
| 4.2.2 对E.coli复杂裂解液中表达的His-tag蛋白的分离纯化研究 | 第52-53页 |
| 4.2.2.1 对E.coli裂解液中的His-tagTPL的分离纯化 | 第52-53页 |
| 4.2.2.2 对E.coli裂解液中的His-tagBAFF的分离纯化 | 第53页 |
| 4.2.2.3 对E.coli裂解液中的His-tagIL-1Ra的分离纯化 | 第53页 |
| 4.2.3 His-tag蛋白质吸附含量的测定 | 第53页 |
| 4.2.4 His-tag蛋白质吸附纯度的测定 | 第53-54页 |
| 4.2.5 MONOLITH材料重复利用能力的研究 | 第54页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第54-67页 |
| 4.3.1 对His-tagTPL模型蛋白亲和吸附和分离性能的考察 | 第55-60页 |
| 4.3.1.1 对His-tagTPL吸附性能的考察 | 第56-58页 |
| 4.3.1.2 His-tagTPL纯度的检测 | 第58页 |
| 4.3.1.3 His-tagTPL构象的检测 | 第58-59页 |
| 4.3.1.4 His-tagTPL活性的检测 | 第59-60页 |
| 4.3.2 对E.coli复杂裂解液中表达的His-tag蛋白质的分离纯化研究 | 第60-63页 |
| 4.3.2.1 对E.coli裂解液中His-tagTPL的分离纯化 | 第60-61页 |
| 4.3.2.2 对E.coli裂解液中His-tagBAFF的分离纯化 | 第61-62页 |
| 4.3.2.3 对E.coli裂解液中His-tagIL-lra的分离纯化 | 第62-63页 |
| 4.3.3 对His-tag蛋白质物理吸附的考察 | 第63-64页 |
| 4.3.4 咪唑浓度对His-tag蛋白质洗脱的影响 | 第64-65页 |
| 4.3.5 MONOLITH材料重复利用能力的研究 | 第65-66页 |
| 4.3.6 在蛋白质药物传递系统中的潜在应用 | 第66-67页 |
| 4.4 本章小结 | 第67-69页 |
| 第五章 结论与展望 | 第69-72页 |
| 5.1 结论与创新点 | 第69-71页 |
| 5.1.1 结论 | 第69-70页 |
| 5.1.2 创新点 | 第70-71页 |
| 5.2 展望 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-80页 |
| 致谢 | 第80-81页 |
| 攻读硕士学位期间发表论文 | 第81页 |
