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RxLR效应因子结构特征及RxLR145调控机制探索

符号说明第5-9页
中文摘要第9-11页
Abstract第11页
1 前言第12-35页
    1.1 辣椒疫病与辣椒疫霉第13-15页
        1.1.1 辣椒疫病的发生与防治第13页
        1.1.2 辣椒疫霉生物学性状第13-14页
        1.1.3 辣椒疫病病害循环第14页
        1.1.4 辣椒疫病的发病条件第14页
        1.1.5 辣椒疫病的防治第14-15页
    1.2 卵菌效应因子研究进展第15-20页
    1.3 蛋白结构生物学第20-31页
        1.3.1 确定研究方向第20页
        1.3.2 基因扩增第20页
        1.3.3 目的基因的表达第20-24页
        1.3.4 蛋白纯化研究进展第24-25页
        1.3.5 X-射线晶体学第25-28页
        1.3.6 蛋白质结构测定第28-31页
    1.4 蛋白与DNA互作第31-32页
    1.5 RNA-SEQ第32-33页
    1.6 RXLR145研究进展第33-34页
    1.7 研究目的及意义第34-35页
2 材料与方法第35-51页
    2.1 实验材料第35-38页
        2.1.1 菌株和载体第35页
        2.1.2 仪器和耗材第35-36页
        2.1.3 生化试剂第36页
        2.1.4 试剂配制第36-38页
    2.2 实验方法第38-51页
        2.2.1 生物信息学分析第38-39页
        2.2.2 基因克隆与表达载体的构建第39-43页
        2.2.3 重组蛋白的表达第43-45页
        2.2.4 融合蛋白的纯化第45-46页
        2.2.5 RXLR145蛋白晶体的生长和优化第46页
        2.2.6 结构解析第46-47页
        2.2.7 结构比对第47-48页
        2.2.8 蛋白特异性结合DNA的筛选及蛋白和DNA结合的一对一验证第48-49页
        2.2.9 RNA-SEQ第49-50页
        2.2.10 荧光定量PCR第50-51页
3 结果与分析第51-86页
    3.1 RXLR145生物信息学分析第51页
        3.1.1 RXLR145基本理化性质分析第51页
        3.1.2 RXLR145信号肽的预测第51页
    3.2 RXLR145基因的克隆与原核表达第51-52页
    3.3 RXLR145蛋白的纯化第52-55页
        3.3.1 RXLR145的纯化第52-54页
        3.3.2 RXLR145硒代蛋白的纯化第54-55页
    3.4 RXLR145蛋白晶体初筛第55-56页
    3.5 RXLR145硒代蛋白晶体优化第56-57页
    3.6 晶体X衍射数据的收集和处理第57-58页
    3.7 蛋白结构的解析第58-60页
    3.8 9种RXLR效应因子结构特征分析第60-63页
    3.9 RXLR145转基因拟南芥CHIP-SEQ第63-70页
    3.10 RXLR145特异性结合序列验证第70-72页
        3.10.1 凝胶迁移率实验(EMSA)证明RXLR145可以和DNA序列发生特异性结合第70-71页
        3.10.2 微量热泳动技术(MST)证明RXLR145可以和DNA序列发生特异性结合第71页
        3.10.3 表明等离子共振技术(SPR)证明RXLR145可以和DNA序列发生特异性结合第71-72页
    3.11 含有RXLR145的转基因RNA-SEQ第72-85页
        3.11.1 含有RXLR145的转基因RNA-SEQ结果的QRT-PCR验证。第84-85页
    3.12 含有RXLR145的转基因拟南芥CHIP-SEQ和RNA-SEQ结果综合分析第85-86页
4 结论与讨论第86-90页
    4.1 RXLR效应因子结构特征第86-87页
    4.2 RXLR效应因子调控机制第87-88页
    4.3 结论第88-90页
参考文献第90-102页
附录第102-106页
致谢第106-107页
博士期间发表论文情况第107页

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